蝮亚科蛇毒中多种可作用于血液系统蛋白质的研究论文

《蝮亚科蛇毒中多种可作用于血液系统蛋白质的研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、蝮亚科蛇毒中多种作用于血液系统的蛋白质研究摘要蛇毒中含有种类繁多、功能丰富的蛋白质。这其中有相当一部分可作蹋于高等动物血液系统，往往因其表现出的毒性而被视为血液毒素。这些作用于血液系统的蛋白质彳i少有很高的酶活力或底物特异性，且对人类血液系统中的抑制荆普遍不敏感，作为检验试剂和f晒床用药具有一定的先天优势；蛇毒血液毒素中的各种蛋白酶与人类血液系统中的丝氨酸蛋白酶和人类基质会属蛋白酶(MMPs)家族及ADAms(proteinswith△旦isintegrin—And丛etalloproteases)超家族的成员在结构和功能上有很多相似之

2、处，从而为研究蛋白质结构与功能关系提供了便利，也为药物设计和改进提供了良好的素材。因此，蛇毒血液毒素可广泛应用于医药和科研领域，具有相当的研究价值。本论文中对蝮亚科蛇类蛇毒中多种可作用于血液系统的蛋白质进行了研究。其中包括：1)．从尖吻蝮蛇毒中分离纯化出～种新型的凝血酶原激话剂螈PA，对其开展了生物活性及底物作用途径研究、基因克隆表达和序列分析。AaPA为单结构域的金属蛋白酶，分子量较小，仅24KD，并虬自己独特的方式激活凝血酶原，不同于以往所发现的四类蛇毒凝血酶原激活剂：它们分子量较大，包括多个结构域。同时，根据AaPA基因序列，其表

3、而结合有一个钙离子，EDTA对AaPA溶液构象的影响过程表明AaPA对此钙离子结合较为牢崮，我们推断此钙离子除了帮助稳定金属蛋向酶结构之外，在AaPA识别凝啦酶原的过程中很可能也起重要作用。此外，鉴于血浆丝氨酸蛋白酶原激活位点的序列特性，以及哺乳动物中MMPs、ADAMs与AaPA的结构相似性和功能相关性，我们提出假说，认为哺乳动物MMPs、ADAMs两个家族中可能有某些成员可激活一些与凝血有关韵丝氨酸蛋白酶原，在一些生化事件中发挥作用。2)，从蛇岛蝮蛇中分离纯化得到一种类去整合素／富半胱氨酸区双结构域蛋白Asdislicrin，对翼进

4、行了生物活性研究、基囚克隆和序列分析，并存大肠杆菌成功表达，得到了其有活槛的重组蛋白。Asdislicrin能抑制由胶原诱导的血小板聚集，呈剂量依赖性：并能抑制血管形成，诱导血管内皮细胞凋亡。因此具有作为抗血栓及抗肿瘤药物的潜质。扩增Asdislicrin的基因时，还获取了一种来自}亓!i一蛇种中的去整合素(disintegr[u)的基因，通过数据库检索，在世界上首次发现：在许多蛇类中P．II型蛇毒金属蛋白酶的3’非编码区和同蛇种的P—III型金属蛋白酶3’编码区末端高度同源。此发现。脂}有助于了解蛇毒金属蛋白酶和哺乳动物ADAMs转录

5、后加工私翻译后加工的机制，也可能有助于确立富半胱氨酸结构域的进化地位，并为了解富半胱氨酸结构域的功能提供线索。3)．蛇岛蝮蛇毒中的～种具有纤溶酶Shedaoenase的分离纯化，生物活性研究、基因克隆和序歹4分析。sbedaoenase是’种丝氨酸蛋白酶，优先作用于纤维蛋白原Aa链，缓慢作用于B0链。4)．对江浙蝮蛇毒碱性磷脂酶A2与溶血有关的位点进行了探讨，证明磷脂酶A2的34位碱性氨基酸残基在溶血过程具有重要作用。关键词蛇毒血液毒素蝮亚科蛇类丝氨酸蛋白酶蛇毒金属蛋白酶StudyonsomeCrotalinaesnakevenompr

6、oteinswiththeabiIityofinffuencingthebIoodsystem7iaoHaomang(BiochemistryandMoleeularBiology)DirectedbyProfessorZhouYuancongkbstr8ctThisthesisfocusedonsomeCrotalinaesnakevenomeproteinswiththeabilityofinfluencingtheblcodsystem：11．AaPA，anoveltypeofprothrombinactivatorfromthe

7、venomofAgkfxtrodon8truE：Isolationandpurification，studyoi3thebiologicalactivityandsubstrata—activationpathway，genecloningandexpression，sequenceanalyzing．AaPAisamOnO—domainmetalloproteinasewiththetoolecularmasslessthan24kDa，acLivatingboyiDeprothrombinjnaparticalarway：soAaP

8、AdiffersfromthefourgroupsofsnakevenomacLiv让torsdiscoveredpreviously，whichconsistofmuttidomainandare札thl