体外诱导人脐带间充质干细胞分化为表皮样细胞

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1、；ｉ＜‘嬌＇；：．，评ｆ．＇－‘．；．矿…ｒ．：巧．．；．＇＂＇＇．＾＇＾ｙ＇：＼少：．：．诚＇－，－－；，＇＇巧；＇－＾！＾：遽１１１—習ｉｌｌｌｌｌｌｌＢｌ＇ｉ—Ｉ１—解放军医学院硕±学位论文分类号：Ｒ３４密级：公开体外诱导人勝带间充质干细胞分化为表皮样细胞Ｔｒａｎｓｄ－ｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＵｍｂｉｌｉｃａｌＣｏｒｄＤｅｒｉｖｅｄＭｅｓｅｎｃｈｍａｌＳ化ｍＣｅｌｌｓｉＷｏ

2、ｙＥｉｄｅｒｍａＫＬｉｋｅＣｅｌｌｓｉｎＶ化ｏｐ作者姓名：炼德看学科专业：生物化学与分子生物学导师：韩为东教＾答辩委员会主席；论文答辩时间二Ｏ—五占二十一曰：院校地址：北京市复兴路２８号１００８邮政编码：巧解放军医学院研究生学位论文原创性声明＂＂秉承我院忠诚、敬业、和谐、创新的学风，本人声明，所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研巧工作机取得的研究成果，除。据我所知了文中特别加标注和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写

3、过的研巧成果，也不含为获得我院或其他教育机构的学位及证书而使用过的材料，对本文的研巧作出贡献的个人或集体，均己在文中做了明确的说明并表示谢意。一，本人承担切相关责任申请学位论文与材料若有不实之处。：论文作者签名：曰期姑旧身、坪／指导教师签名￣曰期口方：耳诚旧气解放军医学晓研究生学位论文版权使用授巧书本人保证毕业离院后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为军医进修学院或解放军总医院。学院有权保留并向国家有关部口或机构送交论文，可Ｗ采用影印原件、复印件和电子版本、缩

4、印、扫描或其他手段保存论文Ｗ供被查阅和借阅。学院可レッ公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外）。：论文作者签名：皆複系曰期＞店午的泊指导教师签名期：兴巧年娜８．解放军医学院硕±学位论文目录中文摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３刖胃７一第部分人旅带间充质干细胞的分离１１、培养和鉴定材料和方法１１结果１７Ｍｉｔ１９４＾２０第二部分人脫带间充质干细胞在胶原－壳聚糖支架材料中培养２１材料和方法２１２５结果職２９

5、／、］结３０．３１第Ｈ部分模抵皮肤微环境诱导人脉带间充质干细胞分化为表皮样细胞．．．．．３１材料和方法结果３８讨论４０小结４１４３第四部分表皮替代物促进大鼠全层皮肤创面愈合材料和方法４３结果４５Ｍｉｔ４７小Ｓ４８解放军医学院硕±学位论文４８参考文献５０ＳＥ５５英文缩略词表６３发表论文情况６５致谢６６解放军医学院硕±学位论文作者：陈德云学科专业：生物化学与分子生物学导师：韩

6、为东教授体外诱导人厮带间充质干细胞分化为表皮样细胞中文巧要目的课题探讨人挤带间充质干细胞（ＨｕｍａｎＵｍｂｉｌｉｃａｌＣｏｒｄ－Ｄｅｒｉｖｅｄ；本ＭｅｓｅｎｃｈｍａｌＳ化ｍＣｅｌｌｓｈＵＣ－ＭＳＣｓ）的分离、培养《及对其生物学特性的ｙ，鉴定－－。构建胶原壳聚糖支架材料同时检测其生物学特性。利用ｈＵＣ，ＭＳＣｓ的多向分化特性探索由ｈＵＣ－ＭＳＣｓ和胶原－壳聚糖支架构建的３Ｄ环，境结合气－－ｓ分化成表皮样细胞液培养的方式是否可诱导ｈＵＣＭＳＣ，并构建成表皮替代物用于

7、大鼠全层皮肤损伤的治疗。，方法－１．，培养ＭＳＣｓ。采用相差显微镜；采用组巧块培养法来分离原代ｈＵＣ－ＭＳＣｓ表面标志物采用成观察细胞形态特征，采用流式细胞仪鉴定ｈＵＣ，脂验检测ｈＵＣ－ＭＳＣｓ的多向分化潜能。，成骨诱导实－－２、．采用冷冻干燥交联的方法制备胶原壳聚糖支架材料，将ｈＵＣ一－Ｗ构建富含生物活性的支架材料ＭＳＣｓ接种到胶原壳聚糖支架材料上。，次接种细胞４ｈ后待细胞进、支架中二次将ｈＵＣ－ＭＳＣｓ接种到活性支架，，表面上２ｄ后培养条件转变为气－。在正常培养条件下，培

8、养，然液培养，分－別于气－７ｄ１４ｄ。利ｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｔｉｎ的方法检测气液液培养，用免疫组化和ｗｇ培养７ｄ，１４ｄ细胞角蛋白１９（ＣＩＣ１９）和外皮蛋白的表达情况。３．构建直径々１ｃｍ的ＳＤ大鼠全层皮肤损伤模型，分为王个不同的处理组：表皮替代物组单纯支架材料组空白对照组观察不同处理组的创，，，面愈合情况并进一步通过组织学的方法（ＨＥ染色）检测大鼠皮肤修复情，况。采用焚光染料示踪的方法检测移植入的细胞的去