髓性白血病细胞诱导分化成为树突状细胞的实验研究

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1、广西医科大学硕士学位论文髓性白血病细胞诱导分化成为树突状细胞的实验研究姓名：罗琳申请学位级别：硕士专业：内科学血液指导教师：刘汉锋;杨日楷2003.5.1绫写DCDendriticcellMNCMononuclearcell英文缩写rhGM-CSFRecombinanthumanrhIL．4Granulocyte／Marcophagecolonystimulatingfactor中文全称树突状细胞单个核纲脆霆组人粒一巨细胞集落刺激因子Recombinanthumaninterleukin一4霆缝入自细胞介索-4rhTNF一&Recombinanthuma

2、ntumornecrosis重组入肿瘤坏死因factor-囊子AⅣ【LCML蚓fLRM疆Acutemyeloidleukemia急性髓缨胞皇盘病Chronicmyelogenousleukemia慢性髓细胞白血病Mixedleukocyteresponses混合淋巴细胞反应Methylthiazolyltetrazolium四唑盐2髓性白血病细胞诱导分化成为树突状细胞的实验研究摘要目的：髓性白血病患者的白血病细胞体外诱导分化成为树突状细胞。材料与方法：从20例髓性自血病患者的骨髓或外周血中获取非贴壁细胞，8例健康人外周血获取贴壁细胞，利用细胞因子(rhG

3、M．CSF、rhIL．4、rhTNF．o)联合培养，每3天补充新的细胞因子，其中rhTNF．a为第9天添加，第12天收获细胞。培养前后分别用光镜、倒置显微镜、电镜观察细胞形态，流式细胞仪测定细胞表面标志，MTT法检测收获细胞激发混合淋巴细胞反应的能力。陆果：17例标本的白血病细胞和全部8(例健康人标本分化成为具有典型树突状形态的细胞，流式细胞仪检测白血病细胞的HLA．DR由23．664-20．02％增至46．85±24．07％，CD86由5．13±5．04％增至15．69±13．96％，CDla由13．82±13．22％增至28．35±19．74％，差异

4、有统计学意义(氏0．01)，但与健康人的相比差异无统计学意义(P>0．05)。在混合淋巴细胞反应中具有强烈激发同种T淋巴细胞增殖的能力y结论：髓性白血病细胞可以诱导分化成为具有DC形态、表型、功能的细胞。关键词：树突状雹胞；白皿旁，髓警；诱皂爹化、-，’-．／3ThestudyofmyeloidleukemiccellsinducedtodifferentiateintodendriticceilsAbstractOBJECTIVE：Toinduceanddifferentiateintodendriticcellsfromleukemiccellsof

5、patientswithmyeloidleukemia．MATERIALANDMETHoDS：Nonadherentcellsfrombonemarroworperipheralbloodmononuclearcellsof20patientswithmyeloidleukemiaandadherentcellsfrom8healthyvolunteerswereculturedwithrhGM—CSFandrhlL一4．Thecytokinesweresupplementedeverythreedays．RhTNF·Qwasusedattheninth

6、dayAllthecellswereharvestedatthetwelfthday．Themorphologyofceilsweredetectedbyusingmicroscope，inveamicroscopeandelectronmicroscope，whilethephenotypeswereanalyzedbyusingflowcytometry．TheproliferationofTcellswasperformedbymethylthiazolyltetrazolium(MTT)assay．RESULT：Afterculturecells

7、from17samplesandallthe8healthyvolunteers’samplesexhibitedtypicalmorphogicalfeaturesofDCs．Throughflowcytometry，wefoundtheexpressionofHLA—DRof17leukemicsampleswasincreasedfrom23．66±20．02％to46．85±24．07％．CD86wasincreasedfrom5．13±5．04％to15．69--+13．96％．CDla4wasincreasedfrom13．82±13．22％

8、to28．35±19．74％．Thereweresignificantlysta