红景天苷对新生大鼠海马区神经干细胞分化的影响

红景天苷对新生大鼠海马区神经干细胞分化的影响

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1、佳本靳夫学硕士学位论文中文摘要一、中文摘要目的观察红景天苷(sDS)药物血清对新生大鼠海马神经干细胞分化的影响,旨在进一步推动利用中药研究神经干细胞的发展。方法采用神经球连续形成法从新生24h内的wistar大鼠海马组织分离、培养神经千细胞,通过连续传代培养观察其自我更新能力。采用神经干细胞Nestin免疫细胞化学染色,鉴定所分离的细胞是否为神经干细胞。将Brdu加入细胞悬液中,验证神经干细胞的分裂增殖能力。将第3代培养的神经球接种在2块24孔培养板中,每块板分成4组,分别是正常血清对照组,红景天苷高、中、低剂量药物血清组。培养7d、14天后,分别行NSE(神经元特异烯醇化酶)、G

2、FAP(胶质纤维酸性蛋白)免疫细胞化学染色,计数阳性细胞;并对各组NsE阳性细胞的面积、周长进行图像分析:对组间差异进行统汁学检测。结果新生大鼠海马分离的单个细胞通过培养,可形成神经球,经免疫细胞化学检测为Nestin阳性细胞。Brdu孵育后,新形成的神经球Brdu免疫标记阳性。同一时间内,备药物实验组诱导神经干细胞分化为NSE阳性细胞的个数明显高于对照组(P<0.01),分化为GFAP阳性细胞的个数明显低于对照组(P

3、细胞接种的密度,可获得增殖效果理想的神经干细胞。红景天苷血清可促进神经干细胞向神经元方向分化,在一定范围内存在量效依赖关系,并对所分化的神经元样细胞有促生长、发育作用。关键词神经干细胞红景天苷诱导分化发育佳本耘大学硬士学位论文英文摘要二、英文摘要objectiveObsen,ingtheefrectofsalidroside(SDS)semmonHippoc踟palneuralstemcells(NSC)toboostthestudyofNSCwithChinesetraditionalmedicineMethodsIsolateHippocampalneuraIstemcells

4、(NSC)疗鲫Wistarratsthatwerebomin24hoursandcultivateinvitm.0bsen,etheirself-updateabilitybysuccessivecellculture,andidentifythembynestinimmunoc”ochemistrystain.PutBrdUintocellsuspensiontoidentifytheirpmlifhousabilityInocuIatethethirdofrsprir唱nervebulbintoMopiccesof24wellplatesaIldabducethempol撕ze

5、,EVeryplateisdiVidedequallyinto4groups:controlgroup,lowe卜doseSDSsemmgmup,middle—doseSDSsen肛ngroup'hi啦er’doseSDSsenlmgroup.At7dand14d,scainthembyNSE姐dGFAPimmunocytochemig虹y.takecountofthenumberofcellsstained.0bservetheresultsandaIlalySet}Iepe打metera芏1dareaofNSE+cells,c锄parethegro印difI毫rencestat

6、isticallyResuItsSinglecellisolated丘omWjstarmts’Hippoc锄palcouIdfoml廿1enervebulbanerculturing,itwasNSE+throu曲NSEimmunoc”ochemistry_newnen,ebulbhadbeingincubatedwithBrdUwouldbeBrdU+.Atmes釉etime,ThenumberofNSE十cellsinexp刚mentalgroupwashi曲ermaIlt}latincontr01group(P<0.01),butthen眦berofGFAP+ceIlswas

7、lowerthaIltllatincomrol舯up(P(o.01),bothofthemwcredosedependentmanners.tlleperimeteraIldareaofNSE十cellsinexperimentalgmupwerela毽erthallthatincontrol孕oup(P

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