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《重组人粒细胞集落刺激因子的N端氨基定点PEG化修饰_英文_》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ISSN1007-7626中国生物化学与分子生物学报2009年5月CN11-3870PQChineseJournalofBiochemistryandMolecularBiology25(5):421~428N-TerminalSite-specificMono-PEGylationofRecombinantHumanGranulocyteColony-StimulatingFactor1)1)*1)1)NIEYong-Jun,CHENJun-Hui,WANGXin-Chang,TANXiao-Jun,1)2)2)WANGWen-Li,ZHUHao-Wen,R
2、ONGZh-iGang(1)StateKeyLaboratoryofPharmaceuticalBiotechnology,SchoolofLifesciences,NanjingUniversity,Nanjing210093,China;2)BiopharmaceuticalInstituteofJiangsuWuzhong,Suzhou215000,China)AbstractDespiteofallitstherapeuticvaluesforhumanbeings,theuseofrecombinanthumangranulocytecolony-s
3、timulatingfactor(rhG-CSF)hasaprimarylimitationbecauseofitsshorthal-flifeintheperipheralblood.Inordertosolvethisproblem,theN-terminusofrhG-CSFwasPEGylatedinasite-specificmannerbymethoxypoly-ethyleneglycol(mPEG)propionaldehydeswithanaveragemolecularweightofeither5kDor204kD,respectivel
4、y.WithastatisticalL9(3)orthogonaltest,theoptimalconditionsofthesite-specificreactionwereachieved.TheresultsindicatedthatPEG-rhG-CSFhadhigherstabilitythanunmodifiedrhG-CSFwhileincubatedwithproteaseorhumanserumorplacedinanextremeenvironmentsuchasatanextremetemperatureorinasolutionwith
5、extremepH.MeanwhilethemodifiedrhG-CSFincreasedthenumberofleukocytesinthebloodofKunmingmicemuchmoresignificantlythandidunmodifiedrhG-CSF.Inconclusion,theseresultsshowthatPEGylationnotonlyenhancesthestabilityofrhG-CSFinvitro,butalsodistinctlyincreasesitsinvivoactivityandthusthisPEGyla
6、tionpromotestheclinicalapplicationofrhG-CSF.KeywordsrhG-CSF;N-Terminalsite-specificmono-PEGylation;stability;orthogonaltest重组人粒细胞集落刺激因子的N端氨基定点PEG化修饰1)1)*1)1)1)2)2)聂永军,陈钧辉,王新昌,谭小军,王文丽,朱浩文,荣志刚(1)南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室,南京210093;2)江苏吴中生物制药研究所,苏州215000)摘要尽管重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)具有重大的治疗价值,
7、然而在实际应用却受到体内半衰期过短因而需要频繁重复注射的限制.为了解决这一问题,我们利用两种不同分子量(5kD和20kD)的单甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-PAL)对rhG-CSF的N端氨基进行了定点PEG化修饰.通过正交实验的统计学方法得到了最适修饰条件.研究发现,PEG化后的rhG-CSF具有了更高的体外稳定性,其体内活性也得到了很大提高,体内作用时间得到很大延长.因此,对于rhG-CSF的N端氨基定点PEG化修饰,可以显著提高rhG-CSF的临床应用价值.关键词重组人粒细胞集落刺激因子;N-端氨基定点PEG化修饰;稳定性;正交实验中图分类号Q51[6,7
8、]Sincethehumangranu
