流式细胞术免疫分型基础

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1、流式细胞术免疫分型基础免疫分型组成•识别细胞•诊断标准系别相关标志干/祖细胞:CD34,CD38,HLA-DR,TdT髓系:CD33,CD13,CD15,CD11b,CD14,CD64,cMPO,CD117,CD11c,CD36红系:CD71,glyA巨核系:CD41,CD61B细胞:CD10,CD19,CD20,CD22,CD23,k,λ,cCD79a,cIgM,(CD5,CD11c,CD103,CD25,FMC7)T细胞:CD2,CD3,CD5,CD7,CD4/8,cCD3,TCRNK细胞:CD16,CD56,(CD3-/CD56+)浆细胞:CD138,CD38,ck,c

2、λ原始细胞(Blast)形态学上的原始细胞包括:•干细胞•粒系:原粒+早幼粒细胞(有颗粒原粒?)•单核系:原单+幼单•淋巴系统:原+幼淋•原始巨核髓系幼稚细胞•幼稚细胞包括原粒、原单、原始巨核、幼单。•异常单核不能算幼稚单核,在鉴别急性粒单细胞白血病、急性单核细胞白血病、慢性粒单细胞白血病中有重要作用。•小的异常增生巨核和微巨核不能算幼稚细胞。•在APL中,异常早幼粒也算幼稚细胞。•原红一般不计在内,除非罕见的急性纯红细胞白血病。髓系幼稚细胞免疫标志•原粒、原单:CD34、CD117、HLA-DR、CD13、CD33、MPO+/-•原始巨核:CD61、CD41a、CD9、CD

3、36(不特异)•幼单:CD15dim、HLA-DRstr、CD64、CD11c、CD4dim、CD11b、CD33str、CD13、CD14-•APL:HLA-DR-、CD34-、CD117+、CD9+、CD15-/+、CD33str、CD64+、CD13dim淋系幼稚细胞•幼稚细胞包括原始淋巴、幼稚淋巴。表型:•幼稚标志+泛B/T标志•幼稚标志:CD34、TdT、B系(CD10)T系(CD1a、CD99str)•泛B:CD19、cCD79a、CD22•泛T:胞浆CD3、CD7、CD2、CD5•不表达成熟标志:B系胞膜轻链;T系CD4、CD8、CD32008WHO分类•偏成熟

4、髓系疾病–髓系增殖性肿瘤(MPN)(包括肥大细胞增多症)–伴有嗜酸细胞增多和PDGFRA、PDGFRB、FGFR1异常的髓系和淋系肿瘤–MDS/MPN–MDS•急性髓系白血病和急性未定系列白血病•前体淋巴肿瘤•成熟淋巴增殖性疾病–B细胞淋巴瘤–T或者NK细胞淋巴瘤–何杰金氏淋巴瘤–免疫缺陷病•组织细胞和树突细胞肿瘤MPN(髓系增殖性肿瘤)•BCR-ABL1阳性慢性髓系白血病(chronicmyelogenousleukemia,CML)•慢性中性粒细胞白血病(CNL)•真性红细胞增多症(PV)•原发性骨髓纤维化(PMF)•特发性血小板增多症(ET)•慢性嗜酸性粒细胞白血病,N

5、OS(CEL)•肥大细胞增多症(mastocytosis)•髓系增殖性肿瘤,不能分类的(MPN.U)CML加速期(AcceleratedPhase,AP)•出现下述之一考虑CMLAP:PB中嗜碱性粒细胞超过20%;(嗜碱性粒细胞识别:位置:CD45/SSC图,原粒的左上,表达CD9、CD123、CD203c、CD22dim)PB或者BM中髓系幼稚细胞为10-19%幼稚细胞克隆为非髓系。CML急变期(BlastPhase,BP)•表现为下述之一:①PB中原始细胞占白细胞20%以上,BM中原始细胞占有核细胞20%以上,②原始细胞髓外增生。70%的病例BP是急髓变,包括中性粒、嗜酸

6、性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核系、巨核系或者红系急变,或者上述组合,20-30%为淋系急变。MDS/MPN•CMML•aCML,BCR-ABL1-•JMML•MDS/MPN,UCMML诊断标准1、持续性PB单核细胞增多>1X109/L(>20%)2、无Ph染色体或者BCR/ABL1基因3、无PDGFRA或者PDGFRB重排(尤其是伴嗜酸性粒细胞增多的病例)4、PB和BM中幼稚细胞<20%5、至少1个髓系增生不良,如果没有或者只有轻微髓系增生不良,需要其它条件:①造血细胞中存在获得性、克隆性细胞或者分子遗传学异常,或者②单核细胞增多至少持续3个月和③排除其它所有导致单核细胞增多的

7、原因。急性白血病(acuteleukemia)诊断标准•BM:建议用瑞氏染色,计数500个分化细胞,PB计数200个•如果有明显的细胞减少,可以使用棕色层(buffycoat)涂片。•如存在骨髓纤维化,不能涂片,如果blast表达CD34,活检片子CD34+≥20%也可以诊断。急性髓系白血病(acutemyeloidleukemia,AML)诊断标准•BM或者PB中:髓系原始细胞≥20%,或者有髓外侵润。•特例:1、重现性遗传学异常,髓系幼稚细胞<20%也可以诊断。2、骨髓有核红细胞50%以上,见鉴别诊

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