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烟草瞬时表达.doc

烟草瞬时表达.doc

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时间：2019-11-24

烟草瞬时表达.doc_第1页
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1、MES溶液10mmolMES,10mmolMgCl2，调整PH值到5.8乙酰丁香酮0.1mmol/l取0.018g用DMSO溶解1.准备好12-15天的烟草（本生烟），2.培养农杆菌200rpm28c12-16h3.离心收集菌块2ml3000g3min4.加500ulMES重悬菌块避光室温（25C)静置3-4h5.取20ul+180ulMES测OD600值6.加MES稀释到OD600浓度为1（加1‰乙酰丁香酮）7.利用注射器将稀释液注射到嫩叶内，使叶体浸润整块叶片8.浸润后48h-72h用激光共聚焦显微镜观察9.如需要DAPi染色细胞核，用10nm的dapi

2、稀释1000倍，注射到烟草细胞内，避光培养3-4小时后用激光共聚焦显微镜观察

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