豇豆轮纹病病菌产毒条件筛选及毒素活性测定-论文.pdf

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1、舷镊2014,40(2):53—57PlantProtection豇豆轮纹病病菌产毒条件筛选及毒素活性测定刘志恒,李健冰,安心,李蔚,曹友文,王君赫(1.沈阳农业大学植物保护学院,沈阳110866;2.彰武县植保站,阜新123200)摘要采用种子萌发抑制率和种子胚芽抑制率的检测方法,研究了豇豆轮纹病病原茵(Corynesporacassiicola)在不同培养基、培养时间、培养温度、培养液pH、光照和振荡条件下粗毒素的产生及其活性。试验结果表明:不同的培养条件下病原茵产生毒素活性不同,查彼培养液为最佳培养液,振荡培养可以促进毒素的产生,最适的产毒pH为7~

2、8,最适温度为20~25。C,最佳培养时间为15d,光照条件下病原菌粗毒素的活性最大。豇豆轮纹病粗毒素对于不同寄主的活性测定结果表明:豇豆轮纹病菌毒素接种的lO种供试植物中,大豆、菜豆致病反应明显,相对的病斑较大,而对黄瓜无致病力,不产生病斑。关键词豇豆轮纹病;多主棒孢菌;毒素;活性中图分类号:S436.43文献标识码:ADOI:10.3969/j.issn.0529—1542.2014.02.010OptimizationofculturingconditionsfortoxinproductionbyCorynesporacassiicolaLiuZh

3、iheng,LiJianbing,AnXin,LiWei,CaoYouwen,WangJunhe(1.PlantProtectionCollege,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang110866,China;2.PlantProtectionStationofZhangwuCounty,Fuxin123200,China)AbstractToxinproductionbyCorynesporacassiicolawasinvestigatedunderdifferentculturemedium,culturin

4、gduration,temperature,pH,lightorshakingconditionsbydeterminingtheinhibitoryrateofseedgerminationandgermgrowth.Theresultsshowedthattoxinactivitywasdifferentunderdifferentcultureconditions.Theoptimalcultureconditionswereasfollows:pH7—8,2O一25℃·culturinginCzapek’Sliquidmediumunderligh

5、tandsha—kingconditionsfor15h.Toxicitybioassaydemonstratedthatthecrudetoxinhadhightoxicitytosoybeansandkidneybeanswiththelargerlesion,whilenotoxicitytocucumberplants.Keywordscowpearingspot;Corynesporacassiicola;toximactivity豇豆作为辽宁的主要蔬菜作物之一,随着栽培真菌病害中发挥了巨大作用,但由于多数病原真菌容面积的扩大和栽培年限的增加,病

6、害的种类和病原易发生遗传变异,因此,出现抗性菌株的现象经常发菌的种群结构发生了很大变化,出现了一些新病害。生,并且高剂量的施用化学农药势必会影响环境及食2011年8月作者在辽宁省新民市调查中发现一种品的安全性。病菌致病粗毒素在适当的选择剂量下新病害,该病害主要危害豇豆叶片,严重时也危害豆可用于筛选高抗病水平的突变体[1],病原菌的产毒能荚,病害蔓延迅速并且危害严重,在7—8月危害最力与培养基类型和环境条件密切相关l2]。为了明确重,病叶率达到6O以上,给豇豆生产造成了很大毒素在病程中的作用和应用粗毒素进行细胞突变体损失。作者通过病害症状描述、病原菌形态鉴定

7、及筛选,首先需要培养出大量的病菌粗毒素。然而对于分子序列比对,并经柯赫氏法则证病,证明豇豆上新豇豆轮纹病病原菌的毒素培养条件迄今未见报道。见病害——轮纹病的病原菌为真菌多主棒孢本研究在分离豇豆轮纹病的基础上,初步探讨(Corynesporacassiicola)。了豇豆轮纹病菌的产毒培养条件,以期为豇豆轮纹长期以来,种植抗病品种和施用化学农药在防治病的相关研究提供一定依据。收稿日期:2013—06—12修订日期:2013—11—25*通信作者E-mail:lzhh1954@163。corn·54·i氪镰女;2014时间取样制备豇豆轮纹病病菌粗毒素。试验设3

8、次1材料与方法重复。I.1供试材料培养pH筛选。设置pH分别为2.

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