酶辅助超声提取蒙药瞿麦总皂苷工艺研究.pdf

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1、2014第十六卷第三期-i-Vo1.16No.3酶辅助超声提取蒙药瞿麦总皂苷工艺研究六陈建平,朱晓伟,成日青,布仁,于姝燕,杜艳青,王来兵,牧丹,崔颖,赵国丁(内蒙古医科大学药学院呼和浩特010110)摘要:目的:优化酶辅助超声法提取蒙药瞿麦总皂苷的最佳提取工艺。方法:采用紫外可见分光光度法,以总皂苷提取率为评价指标,先后通过单因素试验和正交试验,对酶辅助超声提取法进行优化。结果:最佳工艺条件为酶用量4.0mg,超声功率180W,超声时间15min,料液比1:30。在此条件下蒙药瞿麦总皂苷的提取率为2.367%。结论:该方法节约

2、成本,节省时间,提取率高,可作为蒙药瞿麦总皂苷的提取方法。关键词:瞿麦总皂苷酶辅助超声提取紫外可见分光光度法doi:10.11842/wst.2014.03.043中图分类号:R283文献标识码:A瞿麦DianthussuperbusL.,别名十样景花、竹节产),BSA124S型电子天平(北京赛多利斯科学仪器草花、山瞿麦、剪绒花,蒙药名高优一巴沙嘎。石竹科有限公司),恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂),电多年生草本植物Ⅲ,全草入药。性苦、寒、辛、无毒。具子恒温不锈钢水浴锅(余姚市上通温控仪表厂),旋有凉血、止痛、解毒、利尿通淋、破

3、血通经的功能,用转蒸发仪(郑州长城科工贸有限公司),循环水式多于治疗热淋、血淋、石淋、小便不通、淋沥涩痛、月经用真空泵(郑州长城科工贸有限公司),电热鼓风干闭止、肝热、“宝Et”、痧症及产褥热,为蒙医常用药燥箱(上海一恒科学仪器有限公司),KH5200DE型高之一【。临床疗效广泛,可复方或者单独使用。皂苷功率数控超声清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)。是其主要化学成分之一,具有抗肿瘤作用}31、心血管瞿麦购自内蒙古天立药业,经内蒙古医科大学药理活性_41、抗微生物作用、抗真菌作用、免疫调节药学院药用植物学教研室乔俊缠教授鉴定为石

4、竹作用、去痰作用及促子宫收缩作用等。目前,国内外科植物瞿麦D.superbusL.的带花地上部分。薯蓣皂对瞿麦皂苷提取工艺的报道较少。本实验通过结合苷元对照品(批号:111539—200001,中国药品生物制酶解法和超声法的优势I6】,首次采用酶辅助超声法品鉴定所提供),淀粉酶(江苏无锡生产)。所用试剂提取蒙药瞿麦中总皂苷。均为分析纯。1仪器与试药2实验方法TU1901型双光束紫外分光光度计(北京普析通2.1对照品溶液的制备用有限责任公司),LX07A多功能粉碎机(上海江信精密称取干燥至恒重的薯蓣皂苷元对照品5.0科技有限公司)

5、,AB135分析天平(Switzerland生mg,用无水乙醇溶解,定容至25mL容量瓶中,摇匀,即得2.0txg·mL薯蓣皂苷元对照品溶液。收稿日期:2013-06—19修回日期:2014—03—05★内蒙古医科大学青年创新基金项目(YKD2013QNcx013):蒙药瞿麦化学成分分离及主要化学成分提取工艺研究,负责人:陈建平;内蒙古医科大学本科教学项目(NYYXZJ201304):校级优秀主讲教师,负责人:陈建平;内蒙古医科大学大学生“英才培育”项目(2014YCPY015):蒙药瞿麦有效成分的提取工艺研究及含量测定,负责人

6、:陈建平。★★赵国丁,副教授,主要研究方向:中蒙药质量标准规范化和药效物质基础研究。665[WorldScienceandTechnology~ModernizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica]世界科学技术一中医药现代化★技术应用研究2.2供试品溶液的制备显色,在410nm处测定吸光度,以吸光度为横坐精密称取蒙药瞿麦粉末1.0g,加10mL石油标,浓度为纵坐标绘制标准曲线,得回归方程y=醚于50~C水浴加热回流2h,过滤,干燥至无石油醚0.025X+0.004,r

7、=O.9999,结果表明浓度在4.176~味,将其置于锥形瓶中,加入pH6.0的HAc—NaAc2O.88g·mL内与吸光度值呈良好线性关系。缓冲液,浸泡30min,加入一定量的淀粉酶,6O℃水3实验方法浴加热30min,于95℃水浴灭酶10min后放至室温超声,过滤,滤液用水饱和正丁醇萃取3次,合并滤3.1单因素试验液,挥干,用无水乙醇洗出,定容至25mL容量瓶中。3.1.1酶用量考察2.3测定波长的选择精密称取蒙药瞿麦粉末1.0g,以料液比为1:15,精密量取对照品和供试品溶液0.5mL,置l0超声功率200W,超声时间30

8、min,淀粉酶用量分mL具塞试管中,于60~C水浴挥干,加人0.2mL5%别取1、2、4、6、8、10mgE,按“2.2”项下方法操作,香草醛一冰醋酸溶液,0.8mL高氯酸于60。【=水浴加再按“2.3”项下方法显色,在410nm处测其吸光度热20min,取出放

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