灵芝多醣体对于巨噬细胞的影响

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1、物理專文藉由光鉗探討靈芝多醣體對於巨噬細胞的影響文/魏名佐、花國鋒、許喬威、柯孟楊、曾凱雩、許先業、邱爾德近幾年，光鉗技術已被廣泛的應用在生物物理以及細胞生物的研究主題上。我們利用光鉗系統量測巨噬細胞（J774A.1cell）與鍍有lipopolysaccharide（LPS）的聚苯乙烯微粒間的作用力，並比較當細胞受到靈芝多醣體（EORP，extractofReishipolysaccharides）24小時刺激後的變化。量測出經由靈芝多醣體刺激後的巨噬細胞和鍍有LPS的微粒間結合時間的縮短以及黏附作

2、用力的增加。此外，我們也利用共軛焦顯微鏡與流式細胞儀證實受靈芝多醣體刺激過後的巨噬細胞，LPS接受器（CD14/TLR4膜蛋白）表現量明顯地增多。綜合以上觀測，我們提出經靈芝多醣體刺激後，其巨噬細胞與LPS之結合以及對LPS之內吞能力均增加的論點。關鍵字：光鉗、光學力顯微鏡、四象限位置感測器、光學彈力常數、光學力場、布朗運動、震動光鉗、巨噬細胞、膜蛋白接受器、大腸桿菌、靈芝多醣體。1.簡介LPS之間作用力變化。中國傳統中草藥的書籍記載，靈芝可以用來促進Ashkin等人於1986年提出利用單一道雷射光身

3、體健康。近幾年來，生物科學的研究也證實靈芝中束，藉由高度聚焦的物鏡（NA>0.6），可以用來操控的醣類的確能刺激許多重要的免疫訊息傳遞[1]，其中微小的粒子，開啟了單光束光鉗（SingleBeam靈芝多醣體（EORP，extractofReishipolysaccharides）Gradient-ForceOpticalTrap,OpticalTweezers）[4]的研的結構[2]以及相關的免疫訊息傳遞均有充分的研究究熱潮。而利用近紅外光(e.g.,λ=1.06µm)鉗住單一生探討[2]。巨噬細胞在

4、免疫系統中是扮演舉足輕重的角物體的可行性也很快的經由實驗證實。利用此項技術色，細胞中重要的免疫蛋白IL-1也會因靈芝多醣體而可以輕易對細胞生物做非接觸式的微操控，進而減少產生誘發[3]。巨噬細胞的兩種膜蛋白TLR4和CD14是對生物體的機械性傷害[5]。藉由適當的光學力場計辨識lipopolysaccharide（LPS）的主要接受器，LPS是算，實驗校準後[6-8]，單光束光鉗可用來當作量測生革蘭陰式菌細胞壁上的主要成分。了解TLR4/CD14和物分子作用力的媒介（力量大約在sub-pico-New

5、tonLPS的作用機制對於初期的免疫系統調控是相當重要到幾十個pico-Newton）。光學鉗住及微操控技術已被的資訊。在這篇文章中，我們使用光鉗去探討靈芝多廣泛的應用在生物物理以及細胞生物的研究主題上[9,醣體（EORP）對於巨噬細胞的影響，特別是觀測巨10]。而利用這項技術可以幫助我們探討生物物理的基噬細胞上LPS接受器（CD14/TLR4）的表現量以及與本問題，如單分子作用力的研究及其相關應用就是一個很成功的例子[11]。abaab魏名佐花國鋒許喬威柯孟楊曾凱雩a,ba許先業邱爾德2.光鉗實驗架

6、設a陽明大學生醫光電工程研究所圖一為光學鉗住系統的實驗架設示意圖。一線性b陽明大學醫學生物技術研究所偏振的雷射光（λ=1064nm,300mW,Nd:YVO4cwE-mail:aechiou@ym.edu.twlaser）藉由旋轉半波片（HW）來改變雷射偏振角度，E-mail:g39326001@ym.edu.tw再經過極化偏正片（PZ）可以用來調控雷射光的強■1034■物理雙月刊(廿九卷六期)2007年十二月物理專文度。我們將雷射光擴束使其截面與顯微物鏡（水鏡，3.實驗結果及討論NA=1.0，10

7、0X）孔徑大小相匹配（~1cm）。第一個(1)受靈芝多醣體刺激後巨噬細胞對於大腸桿菌的telescope（telescope1包含兩個焦距同為150mm的凸吞噬以及LPS的作用透鏡），藉由移動平台移動telescope中的第一個凸透鏡，使其光路改變，藉此用來移動光鉗操控微粒。此巨噬細胞（J774A.1cells）被靈芝多醣體（EORP）外telescope中的第一片凸透鏡也用來做為震盪式光鉗刺激後，巨噬細胞對於LPS的影響以及作用力改變的的基礎，我們將第一片凸透鏡放在壓電平台（PZT）相關研究如下。巨

8、噬細胞可以藉由吞噬細菌或是LPS上藉由波型產生器以及PZT放大器使其凸透鏡來回震（細菌細胞壁的主要成分）而被活化。我們餵巨噬細胞吞噬大腸桿菌，並比較經靈芝多醣體先行處理的細盪。第二個雷射（λ=632.8nm,10mW,He-Necwlaser）用來追蹤鉗住微粒的位移擾動。經由空間濾波器及擴胞與控制組（未經靈芝處理）的巨噬細胞兩者間是否束(SF/BE)將追蹤雷射光束擴束，而第二個telescope有所差異。我們清楚的觀察到先經過靈芝多醣體處理（teles