溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响.pdf

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1、实用医学杂志2010年第26卷第13期·检验与临床·溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响张桂芳摘要目的：探讨溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响。方法：制备HIV抗体阴性非溶血和配对溶血(Hb2—7g／L)血清48份。另制备HIV抗体阴性非溶血和重度溶血(Hb80g／L)血清l份、HIV抗体阳性非溶血和重度溶血(Hb108g／L)血清l份，用HIV抗体阴性血清对HIV抗体阴性重度溶血血清、HIV抗体阳性非溶血和配对重度溶血血清进行倍比稀释，得到不同溶血程度的样品。测定HIV抗体．检测溶血及不同溶血程度对HIV抗体的影响结果：48份HIV

2、抗体阴性非溶血和溶血血清比较，差异无统计学意义(f=0．078，P=0．938)；对HIV抗体阴性重度溶血倍比稀释血清的A值和Hb浓度做相关性分析，两组间无相关性r=一0．382，P=0．221)；对HIV抗体阳性溶血、非溶血倍比稀释血清的A值进行比较，差异无统计学意义(￡=0．236，P=0．817)。AA(溶血血清A一非溶血血清A)与Hb浓度作相关性分析．两组间无相关性r=0．149，P=0．644)。结论：溶血对双抗原夹心法检测HIV抗体无影响。但是如果试剂反应孔包被、封闭的质量差可能引起Hb的非特异吸附而造成假阳性，故日常工作中要尽

3、量避免样品溶血，严格按照全国艾滋病检测技术规范操作关键词HIV抗体：溶血：双抗原夹心法检测HIV抗体是诊断AIDS和HIV感染的有<1为阴性。效途径．由于ELISA灵敏度高、特异性强、操作简1．3．2HIV抗体阴性非溶血和溶血稀释样品的制便、试剂稳定易保存等优点，是HIV抗体筛查的常备取HIV抗体阴性样品，分离非溶血血清，剩余用方法之一⋯，目前国内外主要使用第三代试剂标本用冻融法分离溶血血清(Hb80g／L，为排除冻(双抗原夹心法)。日常工作中经常遇到溶血样融的影响。分离的非溶血血清与溶血血清相同条件品．溶血对许多检验项目都会产生不同程度的

4、影冻融)。用HIV抗体阴性非溶血血清对HIV抗体阴响。在ELISA试验中溶血对HIV抗体的影响有不性溶血血清作倍比稀释(原液、1：2、⋯1：1024)，制同的报道[3-4]。但溶血的严重程度与A(Absoqbance)值备不同溶血程度的HIV抗体阴性血清，检测非溶呈怎样的关系报道较少，笔者就溶血及溶血不同血血清和溶血稀释血清的HIV抗体，测定A值，同程度对双抗原夹心法检测HIV抗体的影响进行了时测定稀释标本的Hb浓度。另取48份HIV抗体分析。阴性样品．分离非溶血血清，然后通过人为机械溶1材料与方法血分离溶血血清(Hb2—7g／L)，检测非

5、溶血血清1．1试剂HIV抗体第三代(双抗原夹心法)诊断和溶血血清的HIV抗体，测定A值。试剂盒、HIV抗体质控血清购自北京万泰有限公司。1．3．3HIV抗体阳性非溶血和溶血稀释样品的制1．2仪器MULTISKANMK3型酶标仪，赛默飞世备取HIV抗体阴性标本，待血液凝固后去除血尔仪器有限公司；DEM一3型自动洗板机，北京拓普凝块，加人HIV抗体强阳性灭活血清，充分混匀，分析仪器有限公司：电热恒温水温箱，上海医疗器制备HIV抗体较强阳性标本，离心分离非溶血血械厂：XT．1800全自动血细胞分析仪，sysmex公司。清．剩余标本用冻融法分离溶血

6、血清(Hb108g／L，1．3方法非溶血血清与溶血血清相同条件冻融)。再用同一1．3．1HIV抗体检测双抗原夹心法，操作按HIVHIV抗体阴性血清对HIV抗体较强阳性非溶血和抗体诊断试剂盒说明书进行，波长450nm、参考波溶血血清作倍比稀释(原液、1：2、⋯1：2048)，进行长630nm读取吸光度值(A)。以吸光度值／临界值HIV抗体检测，测定A值，同时测定各标本Hb浓[S／CO(Cutof)]判断结果，S／CO≥1为阳性，S／CO度。1．4统计学方法采用SPSS14．0软件进行配对资料t检验，P<0．05为差异有统计学意义。对A值doi

7、：10．3969~．issn．1o06—5725．2010．13．066和溶血程度进行相关分析，P<0．05为A值与溶血作者单位：056200河北省邯郸市，冀中能源峰峰集团有限公司总医院程度有相关性。实用医学杂志2010年第26卷第13期24332结果高[51。2．1溶血对HIV抗体阴性样品的影响同时检测通过实验发现，HIV抗体阴性非溶血样品与溶HIV抗体阴性非溶血样品和不同程度溶血样品的血稀释样品的A值差别较小(图1)，对A值和HbHIV抗体，A值随Hb浓度变化的结果见图1。对A浓度进行相关性分析，r=～0．382，P=0．221>0．0

8、5，值和Hb浓度做相关性分析。两组间无相关性(r=说明A值与Hb浓度无相关性。48份HIV抗体阴一0．382，P=0．221)。同时检测48份HIV抗体阴性性非溶血与溶血样品的配