果寡糖对黄羽肉鸡种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢率的影响.pdf

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国饲斟及饲荠试验z⋯．e￡琏矗l_鞴●譬doi：10．7G33／j．issn．1003—6202．2014．06．015果寡糖对黄羽肉鸡种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢率的影响赵峰，蒋芳，夏中生，黄建烨，仵天培，农志坚，於豪(1．广西大学动物科技学院，广西南宁530005；2．海南广播电视大学，海南海口570150)摘要：研究饲粮中添加不同水平的果寡糖和杆菌肽锌对24周龄广西黄羽肉鸡种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢率的影响。结果表明：与饲喂基础饲粮的对照组比较，基础饲粮添加0．2、0．4和0．6的果寡糖组，广西黄羽肉鸡种鸡的产蛋率、蛋均重、蛋料比、种蛋合格率、合格种蛋受精率和孵化率提高；血清中胆固醇和甘油三酯含量降低，饲粮养分的表观代谢率提高。与基础饲粮添加0．05的杆菌钛锌制剂组比较，添加果寡糖组效果具有优势。综合分析广西黄羽肉鸡种鸡饲粮q-果寡糖添加水平以0．4％较为适宜。关键词：广西黄羽肉鸡种鸡；果寡糖；产蛋性能；血清生化指标；饲粮养分代谢率；杆菌肽锌中图分类号：S816．7：$831．89文献标志码：A文章编号：1003—6202(2014)06—0056—05Effectsofdietaryfructo-oligosaccharidesonlayingperformanceandserumbiochemicalparametersofyellowbroilerbreederhensZhaoFeng，JiangFang，XiaZhongsheng，HuangJianye，WuTianpei，NongZhijian，YuHao(1．CollegeofAnimalScienceandTechnology，GuangxiUniversity，Nanning530005，China；2．HainanRadio&TVUniversi—ty，Haikou570150，China)ABSTRACT：24week—oldGuangxilocalyellowbroilerbreederhenswereselectedtostudytheeffectsofdietaryfructo—oligosac—charides(FOS)orantibiotics(bacitracinzinc)onlayingperformance，serumbiochemicalindicesanddietarynutrientmetaboliz—ability．Theresultsshowedthat：comparedwiththecontrolgroup，dietaryFOSsupplementedwith0．2，0．4，0．6couldincreasethelayingrate，averageeggweight，feedeggratio，eggspercentofpass，fertilityrateandhatchabilityofqualifiedegg，andreduceserumlevelsoftotalcholesterolandtriglyceride，andimprovetheapparentmetab0lizabilityofdietarynutrients．TheeffectsofdietsupplementedwithFOSwasbetterthanthoseofdietsupplementedwith0．05antibiotics．ItwassuggestedthattheappropriateadditiveamountofFOSindietsforyellowbroilerbreederhensshouldbe0．4．KEYWORDS：Guangxilocalyellowbroilerhens；fructooIigosaccharides；layingperformance；serumbiochemicalindicators；di—etarynutrientsmetaholizabmty；bacitracinzinc随着社会经济的发展和人们生活水平的提高，长繁殖、抑制有害菌的定植、改善肠道微生态环境、消费者对动物产品的食用安全性及其对人类健康的提高动物免疫力、促进动物生长、促进动物肠道发育影响极为关注，饲用抗生素促长剂的长期使用所造和营养物质的吸收利用、调节机体营养物质代谢、改成的动物产品药物残留、细菌耐药性等诸多弊端已善畜禽肉蛋品质、预防疾病等功效]。谭聪灵等在受到相关机构、研究学者和动物生产者的高度重视。生长猪饲粮中添加果寡糖(FOS)替代抗生素，猪生欧洲和日本等国已禁止在饲料中使用抗生素，我国产性能改善，血清免疫球蛋白IgA、IgG、浓度显著提对饲用抗生素的使用也已严格限制其种类、用量和高；胡彩虹等在生长肥育猪饲粮中添加果寡糖，方法等。因此寻求抗生素替代品，研究开发新型绿平均日增重提高9．67，肠道乳酸杆菌数增加色饲料添加剂成了当前动物营养和饲料科学的热点314．81口；王明海在产蛋鸡饲粮中添加果寡糖，产之一。国内外试验研究表明，功能性寡糖(function—蛋率提高11．81，饲料利用率提高8．49，蛋壳厚a1oligosaccharides)，如果寡糖、甘露寡糖、异麦芽寡度增加了5．7]。但有关果寡糖在肉用种鸡饲粮糖、木寡糖等，具有选择性刺激动物肠道有益菌的生中的应用研究报道较少，本试验旨在研究饲粮中添收稿日期：2Ol4一O318；修回日期：2014-05—26基金项目：广西自然科学基金项目(No．2012GXNSFAA053054)；南宁市科学研究与技术开发项目(No．20o9o2013A)作者简介：赵峰(1981-)，女，硕士，讲师，研究方向为饲料学。通讯作者：夏中生(1956一)，男，教授，硕导，研究方向为动物营养调控与饲料添加剂。 赵峰等：果寡糖对黄羽肉鸡种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢率的影响／2014年第6朋国加不同水平的果寡糖对广西优质黄羽肉鸡(或称三号入孵，7d后照蛋，记录各组种蛋的受精率，跟踪黄鸡)种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢各组种蛋的孵化率。率等方面的影响，并与抗生素进行比较，探讨饲粮1．3．2血清生化指标中果寡糖的适宜添加水平及其替代抗生素的可行试验结束日早上空腹采血，各组按重复取5只性，为果寡糖在黄羽肉鸡生产中合理利用提供参考。鸡，分别于翅根静脉采血5m1置于10ml无菌离心管，45。斜面静置2h；然后离心，取血清，用日立(HI—1材料与方法TA—CHI)7020型全自动生化分析仪测定血清生化1．1试验动物与试验设计指标。双缩脲法测定总蛋白(TP)，溴钾酚绿比色法试验用果寡糖制剂由南宁奥立高生物科技有限测定白蛋白(ALB)，酶终点比色法测定总胆固醇公司提供(粉剂，含果寡糖3O9／6)，杆菌肽锌制剂(含(T—Cho)和甘油三酯(TG)，GOD—PAP终点法测血杆菌肽锌15)为市售产品。试验在广西玉林市新糖(GLU)，IFCC动力法测定尿素氮(BUN)，比色法桥种鸡场进行，选择24周龄的广西优质黄羽肉鸡测定碱性磷酸酶(ALP)、天冬氨酸氨基转移酶(三黄鸡)种鸡810只，随机分为1个对照组和4个(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)。试验组共5个处理组，每组162只鸡，设3个重复，1．3．3饲粮养分代谢率每个重复54只(3只置1个笼饲养)。对照组饲喂试验结束前3d收集粪样，各组每天按重复收基础饲粮(其组成和营养水平见表1)，4个试验组饲集鸡排泄物样本(粪样)，然后将各重复的3d的粪喂在基础饲粮基础上分别添加0．2果寡糖、0．4样均匀混合再取样，同时采集饲粮样本；试验结束后果寡糖、0．6果寡糖和0．05杆菌肽锌制剂的试将各组粪样、饲粮样本带回实验室分析检测各项常验饲粮。规养分指标。采用内源指示剂(AIA)(4mol／L盐表1基础饲粮组成及营养水平酸不溶灰分)法进行饲粮各种养分代谢率的分析，先饲粮组成质量分数营养成分营养水平分别测出饲料和粪样中的AIA含量，再进行其他成玉米／56．50代谢能／M-I·l1．50分的分析测定。饲粮和粪样本中各项主要成分指标米糠粕／4．8O粗蛋白质／16．50的测定方法：粗蛋白质测定采用凯氏定氮法，粗脂大豆粕／23．9O钙／3．50玉米蛋白粉／2．0O有效磷／0．50肪测定采用乙醚浸提法，粗纤维测定方法采用酸碱豆油／0．50蛋氨酸／0．40消煮法，钙的测定采用高锰酸钾法，总磷的测定采磷酸氢钙／1．OO赖氨酸／0．80用分光光度法。饲粮养分代谢率按下列公式计算：粗石粉／5．00亚油酸／1．5O表观代谢率一F1一(b／a)×(c／d)]×100，细石粉／3．30预混料／3．00式中，a为饲料中某养分的质量分数，；6为粪样合计／1o0．oo中某养分的质量分数，；c为饲料中AIA的质量1．2饲养管理分数，；d为粪样中AIA的质量分数，。试验鸡舍为水帘式有窗鸡舍，采用三层阶梯式1．4数据处理笼养方式，每笼3只种鸡，排风扇强制通风，白天自试验数据用SPSS17．0软件进行单因素方差分然采光，晚上适时人工补照，保证每天光照16h，专析，数据用“平均值±标准误”表示；用LSD法进行人饲喂和管理，鸡群受精频率为1次／(4d)，自由饮多重比较，显著性水平为0．05。水和采食，尽量减少免疫注射的次数，防止种鸡的应激，保证试验鸡群的稳定性。正式试验开始前进行2结果与分析‘7d预饲，待各组各项生理及生产指标无显著差异2．1生产性能时正式试验，为期7周。其他管理按该种鸡场正常2．1．1产蛋率和种蛋合格率程序进行。由表2可知，与对照组比较，饲粮中添加果寡糖1．3观测指标和测定方法和杆菌肽锌均能显著提高广西黄羽肉鸡种鸡产蛋率1．3．1生产性能指标(P<0．05)。添加o．2、0．4和0．6的果寡糖每日按重复记录产蛋数目、合格蛋数(除去软壳组的广西黄羽肉鸡种鸡产蛋率与对照组比较，分别蛋、破烂蛋、沙壳蛋、脏蛋及大小不合格的种蛋)、平提高4．39、6．16和5．O9％(P<0．05)；但与杆均蛋重、产蛋量、采食量等；每周对各组产蛋种鸡称菌肽锌组比较差异不显著(P>0．05)。添加0．2、重，观察各组体重改变，同时观察试验期间各组种鸡0．4和0．6的果寡糖组的广西黄羽肉鸡种鸡种的羽毛颜色及精神状况。每周收集各组的种蛋后编蛋合格率与对照组比较，分别提高3．01％、3．15和 国赵峰等：果寡糖对黄羽肉鸡种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢率的影@／2o14年第6阴2．76(PO．05)；下同。2．1．2料蛋比无显著差异(P>0．05)。此外，试验还观察到饲粮由表2可知，与对照组相比，添加果寡糖和杆菌添加果寡糖和杆菌肽锌的组不同程度地降低了广西肽锌均能显著降低料蛋比(P％O．05)。添加0．2％、黄羽肉鸡种鸡死淘数。0．4和0．6的果寡糖组的广西黄羽肉鸡种鸡料2．2血清生化指标蛋比与对照组比较，分别降低5．26、8．88和由表3可知，随着果寡糖添加水平的提高，血清8．55；0．2、0．6果寡糖组与杆菌肽锌组比较也总蛋白含量逐渐增加，且添加0．2、0．4和0．6有所降低，但差异均不显著(P>O．05)。果寡糖组与对照组相比差异显著(P％0．05)。果寡2．1．3平均蛋重糖组与对照组比较可显著提高血清球蛋白含量由表2可知，添加0．4和0．6的果寡糖组的(P％0．05)。血清白蛋白含量各组间无显著差异广西黄羽肉鸡种鸡平均蛋重与对照组比较分别提高(P>0．05)。与对照组和杆菌肽锌组相比，0．2、3．05和3．70(P0．05)。与组也较对照组有所提高，但差异不显著(P>0．05)；对照组比较，添加果寡糖和杆菌肽锌均能显著降低2·1．4合格种蛋受精率和孵化率血清甘油三酯含量(P％0．05)，也能一定程度降低由表2可知，添加果寡糖和杆菌肽锌均可提高尿素氮含量(P>0．05。与对照组和杆菌肽锌组比合格种蛋的受精率及孵化率。添加0．4和0．6较，果寡糖组血清中碱性磷酸酶活性增加显著(P<的果寡糖组的广西黄羽肉鸡种鸡合格种蛋受精率比0．05)，血清中天冬氨酸氨基转移酶活性有所下降对照组分别提高2．08和2．05(P％0．05)；但与(P>0．05)；各组血清丙氨酸氨基转移酶活性无显0．2果寡糖组、杆菌肽锌组相比则无显著差异著差异(P>0．05)。与对照组比较，添加果寡糖和(P>0．05)。4ZOo果寡糖组、0．6果寡糖组和杆菌杆菌肽锌血液中葡萄糖含量有所提高，但各组间差肽锌组孵化率与对照组比分别提高2．05、2．30异均不显著(P>0．05)。和1．34(P<0．05)，0．2％果寡糖组与对照组比较表3饲粮中添加果寡糖和杆菌肽锌对广西黄羽肉鸡种鸡血清生化指标的影响2．3饲粮养分表观代谢率对照组相比分别提高6．8O和8．24(P％O．05)，从表4可见，饲粮粗蛋白质表观代谢率，0．6％但与杆菌肽锌组相比差异不显著(P>O．05)。饲粮果寡糖组最高(67．32％)，且与对照组和杆菌肽锌组粗脂肪的表观代谢率，0．2、0．4和0．6果寡糖相比差异显著(P肽锌组(P<0．05)。饲粮粗纤维的表观代谢率，0．05)。与对照组比较，添加果寡糖和杆菌肽锌均能0．2、0．4果寡糖组与对照组相比差异均不显著显著提高广西黄羽肉鸡种鸡对饲粮中总磷的表观代(P>0．05)；但0．6果寡糖组显著高于对照组谢率，0．2、0．4、0．6果寡糖组和杆菌肽锌组分(P(o．05)，0．69／6果寡糖组与杆菌肽锌组间差异不别提高了14．38O、13．98、17．13和14．76％显著(P>0．05)。饲粮钙的表观代谢率，添加果寡(P％0．05)；但添加果寡糖的各组和杆菌肽锌组间糖和杆菌肽锌均可一定程度提高广西黄羽肉鸡种鸡差异不显著(P>0．05)。表4添加果寡糖和杆菌肽锌对广西黄羽肉鸡种鸡饲粮养分表观代谢率的影响肝脏后，对胆固醇的合成进行调控，抑制部分胆固醇3讨论的合成和吸收，降低血清中总胆固醇含量口；血清3．1添加果寡糖对种鸡生产性能和饲粮养分代谢甘油三酯是血脂的主要成分之一，果寡糖具有水溶率的影响性膳食纤维的特性，可以吸附机体内的脂类物质，改功能性寡糖属于非消化性寡糖，主要是通过其善脂质代谢以降低血脂含量。本试验添加果寡糖组对单胃动物胃肠道微生态的调节作用来实现其特殊鸡血清尿素氮有所降低，与罗予等给小鼠灌服果寡性功能的。果寡糖选择性地促进肠道有益菌群(乳糖，血清尿素氮浓度升高的报道l1不一致；这可能酸杆菌、双歧杆菌和拟杆菌等)的增殖，竞争性抑制是动物种类物种、饲粮结构或者使用剂量和方式不有害菌，从而改善人和动物肠道的内环境，保持肠道同所致。有益菌处于优势状态，增进肠道健康l3]。本试验3．3广西黄羽肉鸡种鸡饲粮中果寡糖的适宜添加在广西优质黄羽肉鸡种鸡饲粮中添加0．2、0．4水平和0．6％的果寡糖改善了种鸡产蛋率、种蛋合格率、功能性寡糖(益生元)的作用效果与饲粮结构和平均蛋重、料蛋比、种蛋受精率和孵化率等产蛋性能添加量密切相关，添加量不够，优势有益菌群难以形和繁殖性能；提高饲粮粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维和成，添加量过多，造成浪费的同时也会增加肠道渗透总磷等营养物质表观代谢率；这些与文献E63、文献压，影响肠道微生态的平衡。据报道，肉鸡饲粮中添[7]的报道基本一致。其机理可能是果寡糖一方面加1果寡糖会造成鸡群腹泻增加，从而降低生产调整肠道微生态，维持肠道健康，有利于养分消化吸性能。王晓霞等通过对肉鸡肠道微生物菌群的分收；另一方面，Xu等发现，肉鸡饲粮添加0．4果寡析，认为在肉鸡饲粮中果寡糖添加水平以0．3较糖可以提高肉鸡回肠、空肠的微绒毛高度及绒毛高好Els]；吴天星等认为在肉鸡饲粮中果寡糖的适宜添度与隐窝深度的比值，增加了吸收面积[8]，从而提高加水平为0．25～0．50E143。本试验在饲粮中添养分消化率；此外，还可能是果寡糖促进有益菌增殖加0．2～0．6的果寡糖均能不同程度提高广西产生的L一乳酸和挥发性脂肪酸，降低肠道的pH黄羽肉鸡种鸡的生产性能；但从产蛋率、料蛋比、合值，使矿物质元素的溶解度升高，从而提高矿物质元格种蛋受精率和孵化率等指标以及种鸡血清生化指素的吸收率]。标、饲粮养分表观代谢率等方面综合分析认为，广西3．2添加果寡糖对广西黄羽肉鸡种鸡血清生化指优质黄羽肉鸡种鸡的玉米一豆粕饲粮中果寡糖添加标的影响水平以0．4为宜。血清中球蛋白的量与机体的免疫机能有关，饲3．4果寡糖在广西黄羽肉鸡种鸡生产中替代杆菌粮中添加果寡糖可以显著提高血清中的球蛋白量，肽锌的可行性增强体液免疫，这与瞿明仁等在泰和鸡上的试验效本试验结果表明，饲粮中添加0．2～0．6的果一致l1；本试验在广西黄羽肉鸡种鸡饲粮中添加果寡糖，广西黄羽肉鸡种鸡产蛋率、蛋料比、种蛋合果寡糖，降低了血清中的总胆固醇和甘油三酯的含格率等生产性能与添加杆菌肽锌相比无显著差异或量，其效应可能是果寡糖被有益菌群发酵成为乙酸、者不同程度地优于杆菌肽锌组；血清总胆固醇、甘油丙酸和丁酸等挥发性脂肪酸，丙酸通过门静脉达到三酯等脂质含量以及血清尿素氮含量不同程度低于 赵峰等：果寡糖对黄羽肉鸡种鸡产蛋性能、血清生化指标和饲粮养分代谢率的影响／20l4年第6期杆菌肽锌组；血清总蛋白、球蛋白含量不同程度高于专学报，2002，12(4)：26—28．Es]项明杰，刘明，彭奕冰，等．低聚果糖对双歧杆菌增殖效果及杆菌肽锌组；饲粮粗蛋白质、粗脂肪、钙和总磷等养肠道菌群的影响[J]．检验医学，2005，20(1)：49—51．分表观代谢率也不同程度高于杆菌肽锌组。因此，[6]DelzenneN，AertssensJ，VerplaetseH，eta1．Effectoffer—综合分析认为，果寡糖不仅可以替代广西黄羽肉鸡mentablefructo—oligosaccharldesonmineral，nitiogenanden种鸡饲粮中的杆菌肽锌，而且还可不同程度改善广ergydigetivebalanceintherat[J]．LifeSciences，l995，57(17)：l579-1587明黄羽肉鸡种鸡的生产性能和生理生化机能，增强[7]OhtaAM，OhstukiS，BabaS，eta1．Calciumandmagnesium机体免疫机能和动物健康，提高饲料利用率。absorptionfromthecolonandrectumareincreasedinratsfedfruct∞ligosaccha“des[J]．JNutr，1995，125：24172425．4结论[8]XuZR，HuCH，XiaMS，eta1．Effectsofdietaryfructo—oligo—综合本试验结果认为，果寡糖替代饲粮抗生素saccharideondigestiveenzymeactivities，intestinalmicroflora(杆菌肽锌)饲喂广西黄羽肉鸡种鸡，可以不同程度andmorphologyofmalebroilers[J]．PoultrySci，2003，82：1030—1036．提高广西黄羽肉鸡种鸡的生产性能、饲粮养分表观[9]朱志怀，李永民，王志远．低聚果糖对钙元素的吸收的作用研究代谢率和饲料利用率，降低血清脂质含量，增强动口]．中国乳品工业，2008。8(36)：63—64．物免疫机能和机体健康；与杆菌肽锌相比，功能性寡[1O1瞿明仁，宋小珍，游珍明．低聚果糖替代抗生素使用对泰和鸡糖——果寡糖作为无残留、无细菌耐药性等弊端的免疫促进作用的研究[J]．饲料工业，2003，12(24)：27—28．新型绿色饲料添加剂具有独特的优势，值得在黄羽[11]胡彩虹，占秀安，许梓荣．果寡糖对肉仔鸡肌肉中胆固醇水平的影响及其机理探讨[J]．畜牧兽医学报，2003，34(4)：349—肉鸡生产中开发利用。玉米一豆粕型饲粮中果寡糖355．的添加水平以0．4较为适宜。[12]罗予，蔡访勤，孟林敏，等．低聚果糖对小鼠肠道菌群、血甘油三酯及血尿素氮的影响[J]．食品科学，2003，24(4)：136[参考文献]138．[1]瞿明仁．功能性寡糖及其在动物营养中研究进展[A]．见：王康[13]王晓霞，易中华，计成，等．果寡糖和枯草芽孢杆菌对肉鸡肠宁．动物营养研究进展[c]．北京：中国农业科学技术出版社，道菌群数量、发酵粪中氨气和硫化氢散发量及营养素利用率2008．的影响[J]．畜牧兽医学报，2006，37(4)；337—341．f2]谭聪灵，夏中生，李永民，等．饲粮中添加果寡糖对生长猪生产i,14]吴天星，戴贤君，吴林友．果寡糖对肉鸡生产性能的影响EJ]．性能和免疫机能的影响[J]．粮食与饲料工业，2010(4)：45～48．浙江农业学报，1999，11(2)：85—87．[3]胡彩虹，王友明．果寡糖对育肥猪生长及肠道菌群等的影响(责任编辑：苏幔)fJ]．无锡轻工大学学报，2001(6)：568—572．[4]王明海．果寡糖对蛋鸡产蛋性能及鸡蛋品质的影"hEJ]．南京农(上接第55页)asmodifiersofrumenmicrobialfermentationi'J]．JournalofDairyScience，2007，90(6)：25802595．[8]XuM，RinkerM，McLeodKR，eta1．Yuccaschidigeraex—[参考文献]tractdecreasesinvitromethaneproductioninavarietyoffora—[1]徐青云，李振．YE作为饲料添加剂的应用[J]．中国动物保gesanddiets[J]．AnimalFeedScienceandTechnology，2010，健，2006(7)：4446．159(1—2)：l8—26．[2]CheekePR．ActualandpotentialapplicationsofYuccaschidi—E9]WallaceRJ，ArthaudL，NewboldCJ．InfluenceofYuccashi—geraandQuillajasaponariasaponinsinhumanandanimalnudigeraextractonruminalammoniaconcentrationsandruminaltrition[J]．JournalofAnimalScience，2000，77(E—Supp1)：microorganismsi,J]．AppliedandEnvironmentalMicrobiology．1一10．1994，60(6)：1762—1767．[3]冯宗慈，高民．通过比色法测定瘤胃液氨氮含量方法的改进[10]李忠秋，马红，孙金艳，等．丝兰提取物对体外模拟条件下绵[J]．内蒙古畜牧科学，1993(4)：40—41．羊瘤胃脲酶活性的影响[J]．中国饲料，2009(22)：17—19．[4]李国祥，王梦芝，李世霞，等．YE对山羊瘤胃发酵参数、原虫密[11]WangY，McAllisterTA，NewboldCJ．Effectsofyuccaschi—度及甲烷产量的影响口]．饲料工业，2008，29(18)：1518．digeraextractonfermentationanddegradationofsteroidalE5]HohshausenL，ChavesAV，BeaucheminKA，eta1．Feedingsaponinsintherumensimulationtechnique(RusITEc)[J]．saponincontainingyuccaschidigeraandquillajasaponariatoAnimalFeedScienceandTechnology，1998，74(2)：143—153．decreaseentericmethaneproductionindairycows_J]．Journal[12]LilaZA．MohammedN。KandaS．Effectofsarsaponinonru—ofAnimalScience，2009，92(7)：2809—2821．minalfermentationwithparticularreferencetomethanepro—[6]WuZ，SadikM，SleimanFT，eta1．Influenceofyuccaextractductioninvitro[J]．DairyScience，2003，86(10)：3330—Olruminalmetabolismincows[J]．AnimSci，1994，7Z：1038—3336．1042．(责任编辑：苏幔)[7]CalsamigliaS，BusquetM，CardozoPW，eta1．Essentialoils