最新机械制图课件--平面的投影分析课件ppt.ppt

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时间:2021-04-19

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1、机械制图课件--平面的投影分析平行垂直倾斜投影特性★平面平行投影面-----投影就把实形现★平面垂直投影面-----投影积聚成直线★平面倾斜投影面-----投影类似原平面真实性类似性积聚性⒈平面对一个投影面的投影特性⒉平面在三投影面体系中的投影特性平面对于三投影面的位置可分为三类:投影面垂直面投影面平行面一般位置平面特殊位置平面垂直于某一投影面,倾斜于另两个投影面平行于某一投影面,垂直于另两个投影面与三个投影面都倾斜正垂面侧垂面铅垂面正平面侧平面水平面VWHSWS侧垂面投影特性:1、abc积聚为一条线2、abc、abc为ABC的类似形Cab

2、ABcabbbaacccabcacbcba类似性类似性积聚性铅垂面投影特性:在它垂直的投影面上的投影积聚成直线。该直线与投影轴倾斜。另外两个投影面上的投影有类似性。为什么?是什么位置的平面?2)投影面平行面水平面正平面侧平面VWH水平面投影特性:1、abc、abc积聚为一条线积聚为一条线,具有积聚性2、水平投影abc反映ABC实形CABabcbacabccabbbaacc正平面VWH投影特性:1、abc、abc积聚为一条线,具有积聚性2、正平面投影abc反映ABC实形cabb

3、acbcabacabcbcaCBA投影特性:1、abc、abc积聚为一条线,具有积聚性2、侧平面投影abc反映ABC实形侧平面VWHabbbacccabcbacabcCABaabcabcabc积聚性积聚性实形性水平面投影特性:在它所平行的投影面上的投影反映实形。另两个投影面上的投影分别积聚成与相应的投影轴平行的直线。3)一般位置平面一般位置平面投影特性abc、abc、abc均为ABC的类似形abcbacababbaccbacCABPCR产物的回收一、实验目

4、的及背景在生物技术实验中,PCR反应获得的目的片段,酶切后所得特定的DNA序列,分子杂交中所制备的探针等,经过琼脂糖凝胶电泳后,目的片段与其它DNA分开,这就需要有一套方法将目的DNA从凝胶中分离出来,通过处理后得到纯化的目的DNA,以用于以后分子杂交,重组子构建,序列分析等。从凝胶中分离回收DNA的方法现在常用的技术有:电洗脱法低熔点琼脂糖凝胶法玻璃奶法快速纯化凝胶回收试剂盒低熔点琼脂糖凝胶法65oC琼脂糖凝胶熔点低熔点琼脂糖凝胶37oC液体电洗脱法基本原理将电泳分离后含目的DNA片段的琼脂糖切割下来,装于透析袋中,继续在高电压下电泳,这时目的DNA会从凝

5、胶中电泳出进入透析袋中,由于DNA分子量大,不能透过透析袋,从而保留于透析袋中。取出透析袋中含DNA的溶液,进一步用酚、氯仿抽提纯化。二、实验试剂及仪器DNA回收试剂盒琼脂糖电泳仪、电泳槽紫外检测仪手术刀三、实验步骤切取琼脂糖凝胶中的目的DNA条带,放入干净的离心管中称重,如凝胶重为100mg,可视为100μl(100mg≈100μl),以此类推。加入3倍体积溶液GSB,于55℃水浴融胶6-10min,间断(2-3min)混合,确保胶块完全融化,当胶完全融化后,观察溶液的颜色,如颜色为紫色,加入适量3M醋酸钠(pH5.2),调整颜色和GSB颜色相同(黄色)。

6、(为增加DNA回收量,可加入1倍体积异丙醇于已融化的凝胶溶液中,如凝胶重为100mg,加入100μl异丙醇)。待融化的凝胶溶液降至室温(高温时吸附柱结合DNA能力弱),加入吸附柱中静置1分钟,10,000×g离心1分钟,弃流出液。4.加入650μl溶液WB,10,000×g离心1分钟,弃流出液。5.10,000×g离心1-2分钟,去除残留的WB。6.将吸附柱置于一干净的离心管中,在柱的中央加入30-50μlEB或去离子水(pH>7.0)(EB或去离子水在60-70℃水浴预热,使用效果更好),室温静置1分钟。7.10,000×g离心1分钟,洗脱DNA。将洗脱出

7、的DNA于-20℃保存。结果与分析1.分析DNA回收效果。2.记录电泳结果。

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