微藻脂肪酸的检测及合成脂肪酸影响因素研究

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1、卜3r0ll}}摘要本文建立了海洋微藻脂肪酸的毛细管气相色谱分析方法。藻体经超声苹取，浓缩吹干，进行抽提醋化后采用毛细管气相色谱法分析测定。实验结果表明，该方法简便、快速，回收率高(95J%-103.7%之间)，重现性好(相对偏差。.53%-5.49%),检测限低(0.0072ug)o本文对球等鞭金藻、盐生杜氏藻、小球藻、三角褐指藻四种微藻整个生长期脂肪酸含量与百分组成进行观测。结果发现，多不饱和脂肪酸(PUFA)含量在对数生长期要明显高于稳定生长期，在对数生长期逐步增加积累，进入稳定生长期其含量开始下降;饱和脂肪酸(5F

2、A)在对数生长期其含量最低，进入稳定生长期开始明显提高;单不饱和脂肪酸(MUFA)在刚刚扩大培养头两大略有F降，之后，呈现一个逐步增加积累的趋势。犷温度、营养盐和光照对微藻体内的PUFA影响显a，球等鞭金藻、盐藻、小球藻在120C条件F培养TPUFA含量最高，分别达51.43%,73.88010,48.42010,_MfOfa在8℃条件下培养TPUFA含量最高，达62.38%。随温度上升，微藻不饱和度降低，TPUFA含量明显下降。通过对二角褐指藻在硅缺乏、维生素缺乏、氮缺乏、磷缺乏等不同营养盐条件下培养其脂肪酸含量与组成变

3、化的对比试验，结果发现，随氮营养盐缺乏加剧，TPUFA含量大幅度下降，由对照组42.13%降至29.86%(50%N)和20.17%(50/.N),EPA含量则由对照组21.41%降至12.94%(50'/0N)和10.54%(50/.N).磷缺乏能导致TFA的增加和积累，但TPUFA(包括EPA)占总脂肪酸的百分比却呈现下降趋势。硅缺乏和维生素缺乏条件下，三角褐指藻体内的TPUFA均有提高，分别由42.13%升至43.48010和45.86010。不同光照强度对小球藻和三角褐指藻体内的C18:3,EPA等多不饱和脂肪酸含

4、量与百分组成影响较大，在照度为0.252x103Lux条件下，三角褐指藻体内的TPUFA含量达最大值为54.21%,随光照强度的增大TPUFA皇现下降趋势，照度增至18x103Lux时，TPUFA的含量降至31.56%。小球藻在照度为。.252x10'Lux条件卜，其体内的TPUFA含量最高为46.88%，照度增至18x103Lux，其体内的TPUFA的含量降至最低值28.11%。球等鞭金藻按不同光暗周期进行培养，结果发现其体内的脂肪酸含9与百分组成改变量较小。、/微藻培养过程每天振摇数次·能使微藻体内的PUFA有轻度的提

5、司本文对球等鞭金藻和三角褐指藻进行超声幅照实验，结果表明在较低声功率条件下，其体内的TPUFA百分含量均有明显的提高，尤其是C18:3提高幅度较大。关键词:环境因子叭“洋微藻多不饱华肪酸第一章引言海洋生物活性物质的研究，是开发海洋生物资源的一个热点，在海洋单胞藻营养成份中，多不饱和脂肪酸(PUFA)是重要的生物活性物质。EPA,DIIA在防治心脑血管疾患方面的作用主要表现在;有降低血脂的作用

6、齐的作用，抗高血压作用(希尼维斯，A.1988;Kromhouletal.,1985),DHA经研究表明是人类大脑和视网膜正常发育必不可少的物质(Uauy,1990)，有促进大脑功能，延缓机体的生理与病理性衰老进程(Martinez,1987,1988;Treen,1990),增强免疫力以及保健、防病的作用(Carlsonetal，1991)。此外，0o3系列高度不饱和脂肪酸还能抑制某些肿瘤的发生，降低其生长速度(Simopoulosetal.，1991)0高度不饱和脂肪酸，特别是长链W3-PUFA，如EPA和。HA所具有

7、的这些药用价值，己渐渐为人们所熟知，并且已投放市场。但目前市场上出售的PUFA商品基本都是从鱼油中提取出来的，用其制成的产品很难除去鱼腥味，即使是制成胶囊，仍有难闻的味道，这极大地限制了它们的应用范围;另外鱼油资源有限，必需开辟新的来源。海洋微藻是海洋中的初级生产力，具有合成EPA和DHA等长链脂肪酸的能力，事实_L，鱼油里的。3不饱和脂肪酸并不是由鱼自身合成的，而是来源于它们所摄食的藻类(Wichiden&Owen，工993)。海洋微藻不仅总脂含量高，且其总脂中高度不饱和脂肪酸(特别是。3-PUFA)含量很高。而且海洋微

8、藻没有鱼腥味，胆固醇含量较低，这对其广泛的应用前景是非常有利的。此外，微藻还具有生长周期短、繁殖速度快、可塑性强、对营养素要求简单等特点，因此利用微藻生产。3-PUFA日益受到人们的重视。海洋单胞藻多不饱和脂肪酸除了可被利用生产高级营养保健品和抗心血管药物外，生产鱼虾饲料添加剂也是极具开发潜力和高经济效