标本溶血对elisa检测乙肝表面抗原的影响

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1、标本溶血对ELISA检测乙肝表面抗原的影响在临床上常见的引起标本溶血的原因包括［2］:由于病人严重脱水、低血容量休克等原因导致穿刺困难造成的溶血;由于抽血器具质量不合格如真空管负压不够或塑料试管质量较差导致的溶血;用干燥管采血为了尽快分离血清用竹签搅拌不当引起的溶血等。2标本溶血对乙肝表面抗原检测的影响一些研究没有发现标本溶血对HBsAg检测的影响。李穗芬［3］对20例HBsAg阴性和10例HBsAg阳性病人的溶血和非溶血标本包括10例OD值在临界值附近的标本进行了对照，结果非溶血和溶血标本的阴、阳性结果完全一致。

2、20例HBsAg阴性和10例OD值在临界值附近的样本，溶血与对应非溶血标本OD值间差异没有显著性;10例HBsAg阳性样品，溶血标本OD值明显大于对应非溶血标本OD值。因此得出结论，标本溶血不影响HBsAg结果的判定，只是使HBsAg阳性标本的OD值提高。许斌等［4］对HBˉsAg强阳性样品的非溶血与溶血（Hb浓度为241g/L）标本的A值作了对照后未发现两者有统计学差异，得出结论:溶血对HBsAg的检测没有影响（严格意义上应表述为:溶血对HBsAg强阳性标本的检测没有影响）。单桂秋等［5］的研究也显示，HBsAg

3、阳性样品的非溶血与溶血标本的A值间经t检验差异无显著性。其他的一些研究则发现，溶血对HBsAg的检测有影响。钱厚明等［6］发现，在17例溶血标本中，初检的5例HBsAg阳性标本，经重新抽血复检后有2例仍为阳性，另3例转阴。认为是溶血导致了假阳性的出现。刘玉振等［7］研究发现，溶血对HBsAg的检测有影响，当红细胞浓度>25%造成的溶血可导致假阳性。龙宪和等［8］研究发现，无论在健康人还是乙肝病毒感染者中，溶血均导致了ELISA一步法检测HBsAg假阳性结果的出现，而采用二步法则可以保证结果判读无误。3标本溶血

4、对乙肝表面抗原检测影响的可能机制溶血是由于各种原因造成红细胞破坏，胞内血红蛋白（Hb）等物质和细胞内液进入血清。溶血对ELISA的影响主要是反应孔对溶血血清中Hb的非特异性吸附和溶血时细胞内液对血清的稀释作用。单桂秋等［5］的实验也证明了溶血对血清具有稀释作用。Hb具有类过氧化物酶活性，其作用与辣根过氧化物酶类似，如果反应孔非特异吸附Hb而残留，则可催化底物显色，使本底A值升高甚至造成假阳性。如果洗涤质量好，则可能大大减少或排除非特异性吸附的干扰。单桂秋等［5］的实验未体现血中Hb非特异性吸附的影响。龙宪和等［8］

5、采用二步法操作可以排除溶血释出的Hb对HBsAg检测的影响也说明洗板质量在ELISA检测中的重要性。总之，溶血对ELISA检测HBsAg有一定的影响，影响的性质及其大小因所使用的试剂、测定方法、标本HBsAg的有无及浓度高低、洗板的质量好坏而异。参考文献1靳敏.溶血对临床生化检验影响的探讨.广西医学，2002，24（9）:1363-1364.2张小洁，刘建芝.真空采血标本溶血原因分析及预防措施.护士进修杂志，2001，16（3）:180.3李穗芬.标本溶血对乙肝表面抗原检测的影响.广州医药，2001，32（5）:6

6、5.4许斌，朱虎定.ELISA检测HBsAg影响因素的探讨.临床检验杂志，2000，18（4）:232.5单桂秋，苏建婷.溶血及脂浊样品对ELISA检测乙肝表面抗原的影响.临床检验杂志，1999，17（2）:102-103.6钱厚明，赵江燕，张燕.应重视ELISA检测HBsAg灰区范围内样品的复检.上海医学检验杂志，2002，17（3）:156.7刘玉振，张淑琴，马宏伟.溶血对抗-HCV、HBsAg等测定结果的影响.中国输血杂志，1999，12（1）:32-33.8龙宪和，童华诚.溶血对乙型肝炎五项血清标志物检测结

7、果的影响.中华医学检验杂志，1996，19（1）:47-48.