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《辛伐他汀影响内皮祖细胞数量、黏附及凋亡的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、辛伐他汀影响内皮祖细胞数量、黏附及凋亡的研究作者：周亚林,杨乃全,方翔，张雅莉，朱源生，梅介平【摘要】目的细胞水平观察不同浓度辛伐他汀对内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)功能的影响。方法采用密度梯度离心法从人外周血获取单个核细胞，将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板上，培养7天后，收集贴壁细胞，通过激光共聚焦显微镜鉴定，FITC-UEA-I和DiI-acLDL双染色阳性细胞为正在分化EPCs。以不同浓度辛伐他汀(分别为0.0001、0.001、0.01、0.1、1.0μmol/L)和EPCs培
2、养。分别采用黏附能力测定实验、碘化丙啶（PI）标记观察辛伐他汀对EPCs黏附与凋亡的影响。结果辛伐他汀显著提高了外周血EPCs的数量、黏附能力，并能抑制其凋亡。辛伐他汀浓度在0.01μmol/L时对EPCs的数量、黏附功能和抗凋亡能力影响达到最大。随着药物浓度的继续增大，EPCs的上述功能反呈下降趋势，但0.1μmol/L组仍高于对照组。结论辛伐他汀能增加EPCs数量、黏附能力并能抑制其凋亡。【关键词】他汀类药物；内皮祖细胞；黏附；凋亡Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofsimvas
3、tatinonEPCnumber,adhesionandapoptosis.MethodsTotalmononuclearcells(MNCs)isolatedfromhumanperipheralbloodbyFicolldensitygradientcentrifugationicroscope,anddifferentiatingEPCsvastatinofdifferentconcentrations(0.0001,0.001,0.01,0.1and1.0μmol/L).EPCadhesionassayedbyadheren
4、tcellcountingonfibronectin-coatedculturedishes.EPCapoptosisetry.ResultsSimvastatinpromotedEPCnumberandadhesivecapacityandpreventedapoptosis.Simvastatinat0.01μmol/LhadthemaximumeffectsonEPCsnumber,adhesionandanti-apoptosis.GCoA)还原酶抑制剂(他汀类药物)除了能有效地调节血脂水平外，还具有抑制平滑肌增生和血小板聚
5、集以及抑制炎症反应等作用。最近研究表明，他汀类药物还能促进血管新生和内皮损伤后的修复过程，而且已经证实EPCs在该过程中扮演了重要角色［2-4］。本研究在细胞水平探讨了辛伐他汀对EPCs数量、黏附和抗凋亡功能的影响。1材料和方法1.1材料血液样本来自成年男性健康志愿者（无吸烟嗜好，年龄20～41岁）。密度梯度离心法获取单个核细胞，将单个核细胞铺在包被有人纤维连接蛋白(Roche公司,德国)的培养板上。以含20％胎牛血清（FBS）(Hyclone公司,澳大利亚)的M199(JRH公司,美国)培养4天，用PBS洗除非贴壁细胞，继培养至7
6、天，再加PBS洗除非贴壁细胞，取贴壁细胞供实验用［5］。辛伐他汀由默克公司惠赠。1.2方法1.2.1EPC鉴定细胞与DiI-acLDL(2.4mg/L)(DiI-acLDL，Biomedical公司,美国)37℃下孵育1h以检测EPCs对DiI-acLDL的摄取。然后2％多聚甲醛固定细胞10min，固定后PBS浸洗，将FITC-UEA-I(10mg／L)(UEA-I，Vector公司,美国)加于上述标本于37℃下孵育1h。在激光共聚焦显微镜下(laserscanningconfocalmicroscope，LSCM,ZEiss公司,
7、德国)UEA-I和Dil-acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPCs［1,6］。1.2.2实验分组贴壁细胞随机分成7组：①对照组：以不含辛伐他汀培养基与EPCs共培养24h。②辛伐他汀各浓度组（共5组）：以不同浓度辛伐他汀（分别为0.0001、0.001、0.01、0.1、1.0μmol/L）与EPCs共培养24h。1.2.3黏附能力检测依照参考2.3辛伐他汀促进外周血EPCs黏附辛伐他汀显著增加了贴壁细胞数，并且贴壁细胞数呈现随着辛伐他汀浓度的增加先增加，之后又逐步回到基线的趋势，在0.01μmol/L时达到最大效应。而1.0μ
8、mol/L组和对照组相比无统计学差异（表1）。2.4辛伐他汀抑制外周血EPCs凋亡流式细胞仪检查结果显示，辛伐他汀各浓度组都能够抑制外周血EPCs凋亡，并且0.01μmol/L组作用最为明显，随着辛伐他汀浓度的增加抗凋亡作用先增强，之
