临床生化检验方法学评价试验

《临床生化检验方法学评价试验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、贵阳医学院医学检验系黄海实验27临床生化检验方法学评价试验1实验目的掌握：方法学评价试验的原理和基本方法及统计分析熟悉：方法学评价试验的具体操作。2一、重复性实验二、回收试验三、干扰试验四、方法比较试验五、方法性能决定图绘制六、最低检测限实验3实验原理批内重复性试验是指在同一条件下（用同样的方法，同一种试剂和标准品，同一台仪器，在同一实验室由同一人操作，并保持实验期间准确度不变）对同一标本在尽可能短的时间内进行m轮，每轮n次重复测定，以获得批内精密度数据的试验方法。其结果能反映测定方法的随机误差大小。一、重复性实验4试剂与器材1.标本采

2、用血糖浓度约为6.7mmol/L的血清标本（收集无溶血、无脂浊、无肝炎病毒污染的人混合血清或动物血清）。2.GOD-POD试剂盒。5操作步骤将血清标本用GOD-POD法作5轮，每轮4次血糖测定，即可获得20个测定数据。6计算1.检验20次测定数据中的离群值如存在异常值时应剔除。对小样本测定来讲，可采用Grubbs检验，该方法是最合理的检验方法。7计算用Grubbs检验准则，检验离群值的统计学公式是：式中，Xd为离群值；X为包括离群值在内的测定值的均数；s为包括离群值在内的测定值的标准差8如计算的G值大于系数表中相应显著水平的a和测定次数

3、n时的临界值Ga.n，则将Xd作为异常值舍弃，可按下列三种情况来处理：（1）只有一个离群值的情况：设有n个测定数（X1

4、侧，例如X1和Xn都属于离群值，则分别检验X1和Xn，是否应该舍去。如果一个数据决定舍去，那么再检验另一个数据时，测定次数应该作为减少一次来处理；而且此时应该选择99%的置信水平。计算112.按照批内精密度的计算公式计算5轮每轮4次测定值的平均数(X)、标准差(s)和变异系数（CV%）。（1）（2）式中为5轮各次测定值的方差，即：公式12首先计算出每轮测定值的均数、标准差（Si）及方差S1、S2、S3、S4，并将数值填入表27-1内，再将5轮Si总和代入公式即可算出批内标准差Sw。最后计算出变异系数（CV%）表27-1批内重复性试验的数

5、据处理测定批数每轮测定次数（n）及测定值（Xi）∑XiSiSi2123412345合计13注意事项血糖的医学决定水平值为2.8mmol/L、6.7mmol/L和8.9mmol/L。分析物浓度应选择医学决定水平才更具价值。2.用于评价方法精密度的变异系数应该是剔除离群值后的计算结果。14评价批内不精密度的判断限是1/4允许误差范围。批间不精密度的判断限是1/3允许误差范围。允许误差范围可以根据CLIA88规定的能力比对试验的TEa确定。返回本实验目录15实验原理二、回收试验回收试验是用以发现分析方法比例系统误差的有效评价方法。即通过测定G

6、OD-POD法测定血糖的回收率，能较确切地判断该分析方法比例系统误差的有无或大小，从而评价方法的准确性。16试剂与器材80mmol/L葡萄糖标准液生理盐水3.GOD-POD试剂盒4.血清标本收集无肝炎病毒、无溶血、无脂浊的人混合血清，先用GOD-POD法测定血糖浓度，再用生理盐水稀释血糖浓度至2.2mmol/L备用。17操作步骤1.样品制备基础样品：血清0.9ml+0.1ml生理盐水。回收样品Ⅰ：血清0.9ml+0.01ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.09ml生理盐水。回收样品Ⅱ：血清0.9ml+0.06ml80mmol/L葡萄糖

7、标准液+0.04ml生理盐水。回收样品Ⅲ：血清0.9ml+0.09ml80mmol/L葡萄糖标准液+0.01ml生理盐水。2.血糖浓度测定按GOD-POD法测定各制备样品的血糖浓度，每份样品作双份检测，结果取平均值18计算1.加入浓度计算2.回收量计算2.回收率计算将各项计算结果填入表27-2。19表27-2回收试验的数据处理样品测定浓度（mmol/L）加入浓度（mmol/L）回收浓度（mmol/L）回收率（%）基础样品回收样品Ⅰ回收样品Ⅱ回收样品Ⅲ平均回收率20注意事项1.标本加入标准液后，总浓度应在该方法的分析范围内。最好使被测标本

8、的浓度达到医学决定水平，血糖测定的医学决定水平为2.8mmol/L、6.7mmol/L、8.9mmol/L。2.纯标准品溶液的加入体积不得超过血清样品的10%，若稀释过大，误差将发生改变。3.准确加量是本试