荧光法研究不同离子对溶菌酶的猝灭作用.pdf

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1、第24卷第3期化学研究与应用Vo1．24，No．32012年3月ChemicalResearchandApplicationMar．，2012文章编号：1004—1656(2012)03．0375．05荧光法研究不同离子对溶菌酶的猝灭作用张海容，李金平(忻州师院生化分析技术研究所，山西忻州034000)摘要：本文利用荧光法，在生理pH(7．37~0．02)条件下，分别测定了Fe¨、cu“、Ni、Co“、NO：一、I一、盐酸胍对溶菌酶的猝灭作用。用荧光猝灭法求得不同猝灭剂对溶菌酶的猝灭常数生成常数、离解常数、结合位点数，l和

2、热力学参数△，I、△，、△，s。据此判断了体系中猝灭剂对溶菌酶的作用机理。I对溶菌酶的猝灭是动态猝灭，而Fe¨、Cu“、NO一Ni“、Co及盐酸胍对溶茵酶是静态猝灭；Fe3’、Cu“、Ni、c02+与溶菌酶之间的作用力主要为氢键、范德华力；NO一与溶菌酶间的作用力主要为静电作用力；I与溶菌酶之间的作用力主要为疏水作用力。在分子水平上理解这些外源性化合物与溶菌酶的作用机理具有及其重要意义。关键词：溶菌酶；荧光法；猝灭作用；离子；热力学函数中围分类号：0657．3文献标识码：AStudyofdifferentionsonflu

3、erescencequenchingoflysozymeZHANGHai—rong，LIJin-ping(LabofBiochemicalAnalysis，XinzhouTeachersuniversity，Xinzhou034000，China)Abstract：Fluorescencequenchingoflysozymewithvariousions，suchasFe，Cu，Ni，Co，NO：，I-andGuanidine·HC1weredeterminedatphysiologicalpH(7．37±0．02)．Q

4、uenchingconstant，formationconstant()，dissociationconstant(gV)，thenumberofbindingsites(n)and，thermodynamicsfunctionsofa，G、△H碑aswellas△，s2wereobtmnedforVKI3OUSquencherstoly．sozymebyfluorescencemethod．Thequenchingmechanismoflysozymewithvariousquencherswasdeterminedth

5、roughthermody·namicsfunctions．I‘wasadynamicquenchingprocess，andFe¨Cu2’Ni，Co2，，，N0；andguanidinehydrochlofidewerethestaticquenchingprocessesforlysozyme．TheinteractionforceofFe¨Cu2+Ni2+Co2．withlysozymewerehydrogenbondandVander，，，Waalsforce；NOiWasmainlyelectrostaticfo

6、rceandIWashydrophobicinteraction．ItisavitalimportantforUStounderstandtheinteractionmechanismbetweenexogenouscompoundsandlysozyme．Keywords：Lysozyme；Fluorescencemethod；Quenchingefect；Ions；Thermodynamicalfunction溶菌酶广泛存在于人体多种组织中，鸟类和形成复盐，使病毒失活，有抗菌、抗病毒、止血、消家禽的蛋清、哺乳动物的泪、

7、唾液、血浆、尿、乳汁肿止痛及加快组织恢复功能等作用。人体组织器等体液以及微生物中也含此酶。作为一种具有杀官中含有一些微量元素，与人体健康密切相关，对菌作用的天然抗感染物质，溶菌酶可与带负电荷人体的生长、发育、疾病、衰老等方面都有非常重的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白要的作用。例如[14J，铜作为各种金属酶的活性中收稿日期：2011-07-05；修回日期：201l-09-30基金项目：山西省国际科技合作项目(2010081020)；山西省自然科学基金项耳(2011011007-1)资助联系人简介：张海容(19

8、57-)，男，博士，教授，主要从事发光分析E-mail：haironglO15@163．com376化学研究与应用第24卷心，参与细胞抗衰老、抗氧化和造血过程；一些食动态猝灭⋯是猝灭剂与荧光物质的激发态分子之物中都含有亚硝酸根离子，它具有致癌作用；Ni间所发生的。静态猝灭过程是猝灭分子与荧光物可作为酶的