淀粉酶酶学性质的研究

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1、淀粉酶酶学性质研究生物化学　　　　　　　　　　学号：淀粉酶酶学性质的研究学生姓名：####指导教师：#####所在院系：生命科学学院所学专业：#######学号：#########大学中国·哈尔滨2011年12月10淀粉酶酶学性质研究摘要：酶是酶是一种生物催化剂，它具有催化剂属性，同是也具有一些无机催化剂所不具有的特性。催化特定化学反应的蛋白质、RNA或其复合体。是生物催化剂，能通过降低反应的活化能加快反应速度，但不改变反应的平衡点。本实验通过利用淀粉酶水解还原糖，还原糖能使3，5-二硝基水杨酸还原，生成棕色的3-氨基-5硝基水杨酸。淀粉酶活力与还原糖

2、的量成正比，用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量，以单位质量样品在一定时间内生成还原糖的量表示酶活力。酶的活性又同时受到温度、PH、激活剂抑制剂等的影响。关键词：淀粉酶活力温度PH激活剂和抑制剂前言：淀粉酶是水解淀粉和糖原的酶类总称，通常通过淀粉酶催化水解织物上的淀粉浆料，由于淀粉酶的高效性及专一性，酶退浆的退浆率高，退浆快，污染少，产品比酸法、碱法更柔软，且不损伤纤维。淀粉酶的种类很多，根据织物不同，设备组合不同，工艺流程也不同，目前所用的退浆方法有浸渍法、堆置法、卷染法、连续洗等，由于淀粉酶退浆机械作用小，水的用量少，可以在低温条件下达到

3、退浆效果，具有鲜明的环保特色。此酶以Ca2+为必需因子并作为稳定因子和激活因子，也有部分淀粉酶为非Ca2+依赖型。淀粉酶既作用于直链淀粉，亦作用于支链淀粉，无差别地随机切断糖链内部的α－1，4-链。因此，其特征是引起底物溶液粘度的急剧下降和碘反应的消失，最终产物在分解直链淀粉时以葡萄糖为主，此外，还有少量麦芽三糖及麦芽糖，其中真菌a-淀粉酶水解淀粉的终产物主要以麦芽糖为主且不含大分子极限糊精，在烘焙业和麦芽糖制造业具有广泛的应用。另一方面在分解支链淀粉时，除麦芽糖、葡萄糖、麦芽三糖外，还生成分支部分具有α-1，6-键的α-极限糊精（又称α-糊精）。一般

4、分解限度以葡萄糖为准是35-50%，但在细菌的淀粉酶中，亦有呈现高达70%分解限度的（最终游离出葡萄糖）。通过研究淀粉酶的性质，能使我们更好的了解它，并充分利用于工业生产、食品加工、医疗等产业。7淀粉酶酶学性质研究1材料与方法1.1材料萌发的小麦种子（芽长约1cm）1.2主要实验仪器及试剂离心机分光光度计容量瓶研钵电炉恒温水浴离心管标准麦芽糖溶液（1mg/ml）3，5-二硝基水杨酸0.1mol/l的柠檬酸缓冲液1%淀粉溶液等1.3方法1.3.1芽糖标准曲线的制作取6支干净的具塞刻度试管，编号，按表13-1加入试剂表13-1麦芽糖标准曲线制作管号1234

5、56麦芽糖标准液/ml00.40.81.21.62.0蒸馏水/ml2.01.61.20.80.40麦芽糖含量/ml00.40.81.21.62.03,5-二硝基水杨酸/ml2.02.02.02.02.02.0光密度值00.0380.1030.1660.2310.299摇匀，置沸水浴煮沸5分钟。取出后流水冷却，加蒸馏水定容只20ml.以1号管作为空白调零点，在540nm波长下比色测定光密度。以麦芽糖含量为横坐标，光密度纵坐标，绘制标准曲线。实验数据的记录如表13-2麦芽糖含量00.40.81.21.62光密度值00.0360.10.1610.2260.2

6、83表13-2实验数据标准曲线绘制如图13-37淀粉酶酶学性质研究图13-3标准曲线1.3.2粉酶液的制备称取1g萌发3d的小麦种子（芽长约1cm），置于研钵中，加少量石英砂和2ml蒸馏水，研磨匀浆，用6ml蒸馏水粉刺将残渣洗入离心管。提取液在室温下放置提取15—16min,每隔数分钟搅拌一次，使其充分提取。然后在3000r/min转速下离心10min，将上清液倒入100ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为淀粉酶原液，用于淀粉酶活性的测定。1.3.3活力的测定取8支干净试管，编号，按表13-4加入试剂表13-4酶活力的测定项目总淀粉酶活性的测定

7、试管号II-1II-2II-3II-4淀粉酶原液（ml）0000钝化-淀粉酶置于70℃水浴中15min,冷却酶稀释液(ml)1.01.01.01.0预保温将各试管和淀粉溶液置于40℃水浴中保温10minPH5.6缓冲液（ml）1.01.01.01.00.4mol/LNaoH(ml)4.00001%淀粉（ml）2.02.02.02.0保温在40℃恒温水浴中5min0.4mol/LNaoH(ml)04.04.0`4.0将各试管摇匀，分别取2ml放入25ml刻度管中，再加入2mlDNS试剂混匀沸水浴煮沸5min取出冷却，再用蒸馏水稀释至25ml混匀，在分光光

8、度计上540nm处进行比色，测定光密度值，记录测定结果。原始数据记录：7淀粉酶酶学性质研究编号