幽门螺杆菌baba2和胃黏膜上皮leb抗原在不同血型中表达情况及与消化性溃疡的关系

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1、幽门螺杆菌babA2和胃黏膜上皮Leb抗原在不同血型中表达情况及与消化性溃疡的关系：邓淑娟,李兴华,方德宁,曾钗明【摘要】目的：研究不同血型(ABO)患者幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)表达血型抗原结合黏附素(bloodgroupantigenbindingadhesion,babA2)和胃黏膜上皮表达Leinetherelationshipbetensgotbyendoscopy.OneinedforbabA2genotypebypolymerasechainreaction.GastricexpressionofLebobtainedfrompatientspl

2、eeasuredimmunochemicallytodetermineintensity(range0-9).ExpressionofbabA2andLebindifferentbloodgroup,andtherelationshipong56patients,Otypebloodproportioninpepticulceralgroups(P<0.0125),LebantigenscoreofOtypebloodensongbabA2positivepatientsaybethroughhighexpressionofLebandbloodgroupantigenbind

3、ingadhesionofHp.　　[Key/mmolCO2为阳性)和(或)血抗Hp抗体(IgG为阳性或弱阳性)证实,并测其血型(ABO)。所选病例均未使用抗Hp药物。每人均进行内镜检查并取2块胃窦部组织活检,用于Hp培养及组织病理检查。　　1.3PCR检测HpbabA2的表达　　微需氧培养箱(5%O2,10%CO2,85%N2)中培养Hp,经尿素酶试剂检验为Hp阳性。提取Hp的RNA,细菌的RNA提取方法同细胞,反转录后,采用聚合酶链反应法(PCR)扩增检测babA2基因表达情况。扩增引物为bab上游:CCAAACGAAACAAAAAGCGT(与AF033654的第105-124个碱基

4、对相符),bab下游:GCTTGTGTAAAAGCCGTCGT(与AF033654的第357-375个碱基对相符)[5]。反应条件:94℃,5min变性;94℃,1min;45℃,1min;72℃,1min;30个循环;72℃,5min延伸。最后得到的是长度为271bp的PCR产物。　　1.4胃黏膜组织病理检查和胃上皮Leb免疫组织化学分析及评分胃黏膜活检组织经甲醛固定,石蜡包埋,切片后分别进行HE染色组织病理检查及免疫组化染色检测Leb表达情况。病理组织学诊断采用中华病理学会制定的胃活检标本诊断标准。免疫组化采用二步法,经柠檬酸钠缓冲液微波修复,过氧化氢去除内源性过氧化物酶,分别滴加一

5、抗,二抗(通用兔抗人抗体),DAB显色后适时终止反应,苏木精衬染细胞核,中性树胶封固。每个病例中至少有一个代表性区域经免疫组织化学染色。根据IHC评分法[6]对Leb密度进行评分。　　1.5统计学处理　　对消化性溃疡患者中O型血、babA2阳性所占比例与正常人血型分布的构成比进行三样本率的两两比较,行χ2检验,P<0.0125为差异有统计学意义。胃黏膜上皮Leb密度评分经F检验具有方差齐性,应用两样本t检验,P<0.05为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1消化性溃疡与血型的关系　　56例患者的内镜及病理诊断分别为浅表性胃炎25例,消化性溃疡31例。患者的血型分布见表1。据大

6、样本统计,中国汉族人群中O型血约占31%,其余血型占69%,组间两两比较,具体结果见表1。表156例患者血型分布与正常人血型分布比较:十二指肠溃疡25例,胃溃疡6例;b:浅表性胃炎19例,萎缩性胃炎6例从表1可以看出,消化性溃疡组中O型血所占比例高于胃炎组及正常人群中O型血比例(P均<0.0125),差异有统计学意义;胃炎组与正常人群O型血比例差异无统计学意义(P>0.125),说明O型血的人更容易患消化性溃疡。　　2.2不同血型患者胃黏膜上皮表达Leb情况及其与消化性溃疡的关系56例胃黏膜标本行免疫组化检测,胞质呈棕色为Leb表达阳性(图1为阳性及阴性镜下表现),分别计分,并

7、计算O与非O血型患者Leb的得分。依据阳性细胞的百分比、阳性强度、染色不均匀性进行评分,每项均采用0～3分制,总分数为0～9分。具体评分规则如表2。　　消化性溃疡组Leb评分为(6.03±2.12)分,胃炎组Leb评分为(5.28±1.96)分,两者有统计学差异(P<0.05),消化性溃疡患者胃黏膜表达Leb抗原高于胃炎患者。O型血患者胃黏膜Leb评分为(6.39±1.28)分,非O型血患者胃黏膜Leb评分为(4.