ampk对低氧诱导血管生成作用的研究

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1、分类号学号S2012010120学校代码10927密级硕硕士士学学位位论论文文AMPK对低氧诱导血管生成作用的研究学位申请人：肖瑶学科专业：药学指导教师：吴基良教授校外教师：刘忠和主任医师答辩日期：2015年05月27日目录缩略词……………………………………………………………………………1中文摘要…………………………………………………………………………2ABSTRACT…………………………………………………………………………3前言………………………………………………………………………………4材料与方法………

2、……………………………………………………………………61材料………………………………………………………………………………61.1实验细胞…………………………………………………………………61.2主要试剂…………………………………………………………………61.3主要仪器…………………………………………………………………71.4主要配方…………………………………………………………………82实验方法………………………………………………………………………102.1HUVECs的体外培养………………………………………

3、……………102.2HUVECs的鉴定…………………………………………………………112.3MTT法检测不同浓度CoCl2对细胞活性的影响…………………………112.4蛋白免疫印迹法检测HUVEC细胞p-AMPK/AMPK蛋白的表达………122.5分组………………………………………………………………………142.6体外划痕实验……………………………………………………………142.7Matrigel成管法……………………………………………………………152.8统计学处理……………………………………………………

4、…………153结果……………………………………………………………………………163.1HUVEC体外生长形态及光镜下态………………………………………163.2人第Ⅷ因子相关抗原免疫组化检测……………………………………163.3MTT法检测低氧对细胞活性的影响……………………………………173.4低氧对人脐静脉内皮细胞P-AMPK/AMPK蛋白表达水平的影响……173.5AMPK对低氧诱导HUVECs迁移能力的影响…………………………183.6AMPK对低氧诱导HUVECs小管形成的影响…………………………1

5、8讨论………………………………………………………………………21结论………………………………………………………………………………….23参考文献……………………………………………………………………………24文献综述……………………………………………………………………………28致谢…………………………………………………………………………………36缩略词缩略词英文全称中文全称ECMendothelialcellmedium内皮细胞培养基FBSfetalbovineserum胎牛血清EDTAethylenedia

6、minetetraaceticacid乙二胺四乙酸3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-MTT噻唑蓝2-H-tetrazoliumbromideVEGFvascularendothelialgrowthfactor血管内皮生长AMPKadenosine5‘-monophosphate(AMP)-activatedAMP依赖的蛋白激酶HUVECShumanumbilicalveinendothelialcells人脐静脉内皮细胞SDSsodiumdodecylsu

7、lforide十二烷基磺酸钠PMSFphenylmethanesulfonylfluoride苯甲基磺酰氟horseradishperoxidasecolorDAB辣根过氧化物酶显色试剂盒developmentkitPVDFPollyvinylidenefluoride聚偏二氟乙烯DMSOdimethylsulfoxide二甲基亚砜HRPhorseradishperoxidase辣根过氧化物酶PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液DAPI4',6-diamidino-2-pheny

8、lindole4',6-二脒基-2-苯基吲哚MAPKmitogen-activatedproteinkinase丝裂原活化蛋白激酶HIFhypoxiainduciblefactor-1低氧诱导因子-1EPCsendothelialprogenitorcells血管内皮祖细胞1中文摘要目的：建立简单有效且重复性高的人脐静脉内皮细胞(HumanUmbilicalVeinEndothelialCells，HUVECs)