iga肾病患者血清il-17、il-23的水平及意义

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授予单位代码10089m学号或申请号20122025HebeiMedicalUniversity硕士学位论文科学学位IgA肾病患者血清IL-17�IL-23的水平及意义研究生：林芳导师：李素敏教授专业：内科学二级学院：第二医院2015年3月 河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师（或指导小组）的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应法律责任。研究生签名：糾為导师签章二级学院领导義章：、([Iv:...../河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人己经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。.，研究生签名：导师签章：年5月日 目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4英文缩写⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8研究论文IgA肾病患者血清IL-17、IL-23的水平及意义前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27综述IL-17在IgA肾病中作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41 中文摘要IgA肾病患者血清IL-17、IL-23的水平及意义摘要目的：IgA肾病是最常见的原发性肾小球肾炎，是由于异常糖基化IgA1聚合，或与IgG形成聚合物而沉积于肾小球系膜区，进而诱导肾脏炎症、免疫反应。IgA肾病病理变化以系膜细胞和基质增殖为基本组织学改变。肾小球系膜增生的发病机制目前还不是十分清楚。多种损伤因子和有害物质均可促进系膜细胞增生，包括免疫复合物、激活的补体成分、脂多糖、多种细胞因子、血管活性物质、生物活性酶、低密度脂蛋白以及细胞基质成分等。白介素-17(interleukin-17,IL-17)是近年发现的由Th17细胞分泌的是一种促炎性细胞因子，能促进趋化因子分泌，募集炎症细胞，扩大炎性反应，进而抵抗病原体感染，在粘膜免疫和诱导自身免疫性疾病中发挥着关键作用。其家族成员包括(IL-17A~F)，IL-17A即IL-17，是目前受到研究者关注最多的成员。白介素-23(interleukin-23,IL-23)是IL-12异源二聚体细胞因子家族中新的一员，IL-23受体包括IL-12受体β1(IL-12Rβ1)和IL-23受体2个亚基。IL-23主要作为一种前炎症细胞因子而发挥作用，主要作用于记忆性T淋巴细胞，具有影响免疫反应的作用，还具有潜在的抗感染和抗肿瘤作用，在一些炎症性自身免疫性疾病模型的形成和发展中起着十分重要的作用。已有研究证实IL-23可促进Th17细胞的分化、增殖，进一步促进IL-17的分泌，这些结果说明IL-23/IL-17通路在一些自身免疫性疾病的发病机制中有一定作用。本课题拟检测不同临床及病理水平IgA肾病患者血清中IL-17及IL-23含量，分析IgA肾病与两者之间的关系，以探讨它们在IgA肾病系膜增生中的作用及机制。方法：河北医科大学第二医院肾内科于2013年10月至2014年8月期间，首次入院并经肾活检确诊为IgA肾病患者40例(平均年龄36.1±13.0岁，其中男性22例，女性18例)，无近期感染史或过敏史及重金属接触史；近3个月内未应用非甾体类消炎药、糖皮质激素、细胞毒药物或免疫抑制剂。排除紫癜性肾炎、狼疮性肾炎、甲状腺疾病、血液病、肝脏疾病及肿瘤等继发因素。根据2009年牛津分型，按肾小球系膜平均积分进行分组：(1)M0组平均积分≤0.5，(2)M1组平均积分＞0.5。按肾小管萎缩或1 中文摘要间质纤维化程度分组：(1)T0组：0%~25%为轻度；(2)T1组：26%~50%为中度；(3)T2＞50%为重度。正常对照组8例(平均年龄34.9±9.0岁，其中男性3例，女性5例)。ELISA方法检测血清中IL-17及IL-23的表达并收集患者性别、年龄、24小时尿蛋白定量、肌酐、收缩压、舒张压等临床指标进行相关性分析，所有实验数据采用均数±标准差表示，组间比较方差齐采用方差分析，方差不齐采用非参数检验，在SPSS19.0统计分析软件上进行。结果：1临床资料组间比较：按系膜增生分组各组间年龄、性别、舒张压均无统计学差异(P＞0.05)；M1组收缩压高于M0及对照组(P＜0.05)；实验组肾小球滤过率低于对照组(P＜0.05)；M1组尿蛋白定量与M0组比较无统计学差异(P＞0.05)。按间质纤维化分组各组间年龄、性别、舒张压、收缩压、均无统计学差异(P＞0.05)；肾小球滤过率随着间质纤维化程度加重而降低(P＜0.05)；各组间尿蛋白定量无统计学差异(P＞0.05)。2血清IL-17水平M1组高于M0组、M0组高于正常对照组，差异有统计学意义(P＜0.05)；血清IL-17水平随间质纤维化加重而逐渐升高，差异有统计学意义(P＜0.05)；而血清IL-23水平各组间比较无统计学意义(P＞0.05)。3血清IL-17与IL-23的相关性分析：血清IL-17与IL-23呈正相关(r=0.433，P＜0.05)。4血清IL-17及IL-23与临床各指标的相关性分析：血清IL-17水平与收缩压、舒张压、24小时尿蛋白、总胆固醇、甘油三酯呈正相关（相关系数分别为r=0.740、r=0.632、r=0.477、r=0.365、r=0.320，P＜0.05）；血清IL-23水平与收缩压呈正相关（相关系数r=0.347，P＜0.05）。结论：1在IgA肾病中，随着系膜增生、间质简直纤维化的加重，血清中IL-17的含量逐渐升高，24尿蛋白定量逐渐增高，肾小球滤过率逐渐降低，血清IL-17水平与24尿蛋白定量呈正相关关系，提示IL-17参与了IgA肾病进展，且其在血清中的水平可以反应疾病的严重程度。2血清IL-23水平与血清IL-17水平呈正相关关系，IL-23与24小时尿蛋白定量及肾小球滤过率无相关性且正常对照组与IgA肾病组血清IL-2 中文摘要23水平无统计学差异，表明IL-23参与IL-17的产生，并没有直接参与IgA肾病的发展。关键词：IgA肾病,白介素-17,白介素-23,肾小球系膜增生,肾间质纤维化3 英文摘要LevelandclinicalsignificanceofIL-17andIL-23inIgAnephropathyABSTRACTObjective:IgAnephropathyisthemostcommonprimaryglomerulonephritis,itisduetoabnormalglycosylationofIgA1polymerization,orformingpolymerswithIgGtodepositionintheglomerularmesangium,andtheninducedrenalinflammation,immuneresponse.ThepathologicalchangesinIgAnephropathyweremesangialcellandmatrixproliferation,itswasthebasicorganizationchange.Thepathogenesisofglomerularmesangialproliferationisnotyetveryclear.Multipledamagefactorsandharmfulsubstancescanpromotetheproliferationofmesangialcell,includingtheactivationofimmunecomplex,complementcomponents,lipopolysaccharide,avarietyofcytokines,vasoactivesubstances,biologicalactivity,lowdensitylipoproteinandcellmatrixcomponentsetc.Interleukin-17(interleukin-17,IL-17),withisrencentyearfoundandissecretedbyTh17cells,isaproinflammatorycytokine,anditcanpromotethesecretionofchemokines,recruiteinflammatorycells,inflammatoryreactionandexpand,resistancetopathogeninfection.IL-17playakeyroleintheinductionofmucosalimmunityandautoimmunediseases.Thefamilymembersincluding(IL-17A~F),IL-17A(IL-17)iscurrentlyattentionbyresearchersofthemembers.Interleukin-23(interleukin-23,IL-23)isanewmemberofIL-12familycytokinesheterologousdimerization,IL-23receptorsincludingtheIL-12receptorβ1(IL-12Rβ1)andtheIL-23receptor2subunit.IL-23mainlyplayaproinflammatorycytokinerole,witheffectsoftheimmuneresponse,alsohasthepotentialofantiinfectionandantitumoreffects,andalsoplaysanveryimportantroleintheformationanddevelopmentmodelofsomeinflammatoryautoimmunedisease.PreviousstudieshaveconfirmedthatIL-23canpromoteTh17celldifferentiation,proliferation,furtherpromotethesecretionofIL-17,theseresultsindicatethatIL-23/IL-17pathwayhasaroleinthepathoge4 英文摘要nesisofsomeautoimmunediseases.ThisprojectaimstodetectIL-17andIL-23contentinserumofpatientswithdifferentclinicalandpathologicallevelsinIgAnephropathy,IgAnephropathyandtheanalysisoftherelationshipbetweenthetwo,toexploretheroleoftheminIgAnephropathymesangialproliferationandmechanism.Methods:Thestudypatientssecletfromthedepartmentofnephrology,thesecondhospitalofHebeiMedicalUniversity.from2013Octoberto2014August,anddiagnosedbyrenalbiopsyin40casesofIgAnephropathypatients(meanage36.1+13yearsold,male22andfemale18),excludingsecondarypurpuranephritis,lupusnephritis,thetumor,bloodsystemdiseases,liverdiseasesofkidneydisease.Allpatientswereinformedconsent,andnearly3monthswithouttheuseofglucocorticoid,cytotoxicdrugsorimmunosuppressiveagents;norecenthistoryofinfectionorspecialmaterialallergyhistory;noautoimmunedisease,viralhepatitis,malignanttumor,thyroiddiseasehistory;nometalcontacthistory;butsteroidaltheanti-inflammatorydrugapplicationhistory.Accordingtothe2009Oxfordclassification,groupedbymesangialaverageintegral:M0integralaverageislessthanorequalto0.5,theaverageM1integral>0.5.IgAnephropathyweredevidedintothreepathologicalgroupsbyOxfordclassificationofIgAnephropathyin2009(mildpathologicalchangegroupT00%～25%;moderatepathologicalchangegroupT126%～50%;severepathologicalchangegroupT2>50%).Normalcontrolgroupof8patients(meanage34.9+9yearsold,male3andfemale5).Usingenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)testingserumIL-17andIL-23concentration.Recordthegeneralconditionofthepatientandrelatedclinicalindexes,sex,age,24hoursurineprotein(24Upro),serumcreatinine(Scr),systolicbloodpressure(SBP),diastolicbloodpressure(DBP)andotherclinicalindicatorsforanalysis.AllstatesanalyseswereperformedusingStatisticalpackageforsocialsciences(SPSS)19.0forWindows.Continuousvariabesareexpressedasmean±standard,comparisonbetweenthegroupsusingvarianceANOVA,homogeneityofvarianceusingnonparametrictest.5 英文摘要Results:1Theclinicaldata:theage,sex,diastolicpressurehavenosignificantdifference(P>0.05);groupM1ishigherthanM0andcontrolgrouponsystolicbloodpressure(P<0.05);theexperimentgroup’sglomerularfiltrationratelowerthanthecontrolgroup(P<0.05);groupM1urinaryproteinquantitativecomparedwithM0group,havenostatisticallearnthedifference(P>0.05).Groupedbyinterstitialfibrosis:Theage,sex,diastolicandsystolicbloodpressure,hadnostatisticaldifference(P>0.05);Glomerularfiltrationratewithaggravatingthedegreeofinterstitialfibrosisreduced(P<0.05);Urineproteinquantitativenostatisticaldifferencebetweengroups(P>0.05).2ThelevelofserumIL-17increasedgraduallytendtoanemiaworsens.Thedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05);ThelevelofserumIL-17fibrosisisaggravatinggraduallyincreases,thedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05);thelevelofserumIL-23amongthethreegroupshadnostatisticalsignificance(P>0.05).3CorrelationanalysisofserumIL-17withIL-23:serumIL-17waspositivelycorrelatedwithIL-23(r=0.433,P<0.05).4CorrelationanalysisofserumIL-17andIL-23withtheclinicalvariousindicators:thelevelofserumIL-17andsystolicpressure,diastolicpressure,24hoursurineproteinwerepositivelycorrelated;thelevelofserumIL-23positivelycorrelatedwithsystolicbloodpressure.Conclusion:1InIgAnephropathy,thelevelofIL-17inserumgraduallyincreasedalongwiththeaggravationofmesangialproliferationandrenalinterstitialfibrosis.Atthesametime,24UPro、eGFRgraduallyincreasedalso.SuggestingthatIL-17isinvolvedintheprogressionofIgAnephropathyanditslevelintheserumcanresponsetothediseaseseverity.2ThelevelofserumIL-23waspositivelycorrelatedwiththelevelofserumIL-17,IL-23and24hoururinaryproteinquantitativeandglomeru6 英文摘要larfiltrationratehadnocorrelation.ThenormalcontrolgroupandIgAnephropathyserumlevelofIL-23wasnosignificantdifference,suggestingthatIL-23intheIL-17generation,andnotdirectlyinvolvedinthedevelopmentofIgAnephropathy.Keywords:IgAnephropathy,interleukin-17,interleukin-23,glomerularmesangialproliferation,Renalinterstitialfibrosis7 英文缩写英文缩写英文缩写英文名称中文名称IL-17Interleukin-17白介素-17IL-23Interleukin-23白介素-23IgANImmunoglobulinAnephropathyIgA肾病ESRDEnd-stagerenaldisease终末期肾脏疾病HPHelicobacterpylori幽门螺杆菌DCDendriticcell树突状细胞PDCsPlasmacytoiddendriticcells细胞样树突状细胞RARhetunatoidarthritis风湿性关节炎KGFKeratinocytegrowthfactor角质细胞生长因子HGFHepatocytegrowvthfactor肝细胞生长因子COX-2Cyclooxgenase-2环氧化酶-2G-CSFGranulocytecolonystipulatingfactor粒细胞集落刺激因子TGF-βTransforminggrowthfactor转化生长因子-β8 研究论文IgA肾病血清中IL-17、IL-23的水平及意义前言IgA肾病(ImmunoglobulinAnephropathy,IgAN)是全世界特别是在亚洲地区最常见的原发性肾小球疾病。IgAN病情恶化与粘膜感染密切相关，[1]40%的患者缓慢进展为终末期肾脏疾病(End-stagerenaldisease,ESRD)。肾小球系膜增生是IgAN的基本病理过程，是导致肾小球硬化的主要原因之一。肾小球系膜增生的发病机制目前还不是十分清楚。多种损伤因子和有害物质均可促进系膜细胞增生，包括免疫复合物、激活的补体成分、脂多糖、多种细胞因子、血管活性物质、生物活性酶、低密度脂蛋白以及细胞基质成分等。在对细胞因子网络与系膜细胞之间作用的研究中发现，系膜细胞在炎症过程中是炎症介质作用的靶细胞，加之又有自分泌和旁分泌功能，在炎症介质作用下释放出各种细胞因子，从而刺激和激活系膜细胞，促进系膜细胞增生。肾间质纤维化是IgAN发展为终末期肾病的共同途径。肾间质纤维化的发病机制目前还不是十分清楚。近年来一种新的能大量分泌白介素-17(interleukin-17,IL-17)的CD4+T细胞亚群的发现分白介素细胞亚群引起了普遍关注，被称为TH17细胞。IL-17家族包括六个成员(IL-17A~17F)，IL-17A即IL-17，是目前受到研究者关注最多的成员，在粘膜免疫和诱导自身免疫性疾病中发挥着关键作用。Th17细胞分化产生IL-17与多种细胞因子密切相关，其中IL-23在诱导其分化过程中起到十[2]分关键的作用。越来越多的实验证实IL-23参与的Th17细胞引起的炎性反应即IL-23/IL-17炎症轴被认为在自身免疫性疾病的发生、发展中起[3]着至关重要的作用。本课题拟检测IgA肾病患者血清中IL-17及IL-23含量变化，以探讨它们在IgA肾病进展中的作用。材料和方法1研究对象1.1病例选择选取2013年10月至2014年8月间在河北医科大学第二医院肾内科，9 研究论文首次入院并经肾活检确诊为IgA肾病患者40例，无近期感染史或过敏史及重金属接触史；近3个月内未应用非甾体类消炎药、糖皮质激素、细胞毒药物或免疫抑制剂。排除紫癜性肾炎、狼疮性肾炎、甲状腺疾病、血液病、肝脏疾病及肿瘤等继发因素。1.2实验分组对照组：取健康体检者8例(男3例，女5例)，平均年龄(34.9±9.0)岁，为正常对照组。入选的健康体检者均排除中枢神经系统疾病、心血管疾病、肝、肾疾病、糖尿病和其它全身系统性疾病；均在近3个月内无感染史及疫苗接种史、无免疫病史。实验组：40例IgA肾病患者，其中男性22例，女性18例，平均年龄36.1±13.0。根据2009年牛津分型，按肾小球系膜平均积分进行分组：(1)M0组平均积分≤0.5；(2)M1组平均积分＞0.5。按肾小管萎缩或间质纤维化程度分组：(1)T0组：0%~25%为轻度；(2)T1组：26%~50%为中度；(3)T2＞50%为重度。2方法2.1仪器及试剂试剂：IL-17ELISA试剂盒由欣博盛生物科技有限公司生产，由河北博海生物工程开发有限公司提供。IL-23ELISA试剂盒由欣博盛生物科技有限公司生产，由河北博海生物工程开发有限公司提供。主要仪器：仪器厂商型号-70℃低温冰箱日本三洋公司MDF-382E自动平衡离心机北京离心机厂LDZ5-2一次性吸管河北博海生物工程开发有限1ml公司EP管河北博海生物工程开发有限1.5ml公司全自动酶标检测仪美国MDC公司VersaMax型酶标仪美国BIO-TEKELx80010 研究论文电热恒温水箱余姚市东方电工仪器厂HH.W21.600微量震荡器无锡县金城仪器厂WZS-III型2.2标本的采集和保存2.2.1血液标本收集IgA肾病组和正常对照组均空腹8~12小时，于次日清晨抽取肘静脉血5ml2份，放于含依地酸钠(EDTA)的采血管中，一份送至我院检验科测定生化指标，另一份温室放置2小时后，均以3000r/min离心10分钟，吸取上层血清标本2ml存于EP管中，放置于-80℃冰箱中保存、待检。2.2.2临床资料收集对所有实验对象进行病史询问，记录其年龄、性别、居住地、原发病、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血肌酐(Scr)、24小时尿蛋白定量(24hUPro)、免疫球蛋白A(IgA)、总胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、应用CKD-EPI评估肾小球滤过率(eGFR)。2.3ELISA法检测血清IL-17和IL-23水平：操作均严格按照试剂盒说明书进行。2.3.1人IL-17ELISA法的检测2.3.1.1原理：本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人IL-17A单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人IL-17A会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人IL-17A抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人IL-17A抗体与结合在单抗上的人IL-17A结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人IL-17A，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，人IL-17A浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人IL-17A的浓度。2.3.1.2准备试剂a提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，以平衡至室温。b用双蒸水将20×浓缩洗涤液按1:20稀释(示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的双蒸馏水)。c标准品:加入标准品&标本通用稀释液0.5ml至冻干标准品中，静置15分钟，待其充分溶解后，轻轻混匀(浓度为1000pg/ml)。11 研究论文d生物素化抗体工作液：按当次试验所需要得用量，使用前20分钟，用生物素化抗体稀释液将30×浓缩生物素化抗体稀释成1×工作液。e酶结合物工作液：按当次试验所需要的用量，使用前20分钟，用酶结合物稀释液将30×浓缩酶结合物稀释成1×工作液。2.3.1.3检测步骤a从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条。b空白孔加标准品&标本通用稀释液，其余相应孔中加标本(100μl/孔)，用封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱孵育90分钟。c提前20分钟准备生物素化抗体工作液。d洗板5次。e空白孔加生物素化抗体稀释液，其余孔加入生物素化抗体工作液(100ul/孔)。用新封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱孵育60分钟。f提前20分钟准备酶结合物工作液。避光室温(22-25℃)放置。g洗板5次。h空白孔加酶结合物稀释液，其余孔加入酶结合物工作液(100μl/孔)。用新封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱，避光孵育30分钟。i打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。j洗板5次。k加入显色底物(TMB)100μl/孔，避光36℃孵箱，避光孵育15分钟。l加入终止液100μl/孔,混匀后即刻测量OD450值(3分钟内)。2.3.1.4结果计算与判断a每个标准品和标本的OD值应减去空白孔的OD值。b以标准品：1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0pg/ml为横坐标，OD值作纵坐标，用软件绘制标准曲线。c通过标本的OD值可在标准曲线上查到IL-17浓度。2.3.1.5试剂盒性能灵敏度：最小可测人IL-17达8pg/ml。特异性：可同时检测重组或天然的IL-17，不与其他细胞因子交叉反应。重复性：板内，板间变异系数均<9%2.3.2人IL-23ELISA法的检测：12 研究论文2.3.2.1原理：本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人IL-23单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的人IL-23会与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素化的抗人IL-23抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素，生物素与亲和素特异性结合；抗人IL-23抗体与结合在单抗上的人IL-23结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物，若反应孔中有人IL-23，辣根过氧化物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变黄。在450nm处测OD值，人IL-23浓度与OD450值之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中人IL-23的浓度。2.3.2.2准备试剂a提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，以平衡至室温。b用双蒸水将20×浓缩洗涤液按1:20稀释(示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的双蒸馏水)。c标准品:加入标准品&标本通用稀释液0.5ml至冻干标准品中，静置15分钟，待其充分溶解后，轻轻混匀(浓度为1000pg/ml)。d生物素化抗体工作液：按当次试验所需要得用量，使用前20分钟，用生物素化抗体稀释液将30×浓缩生物素化抗体稀释成1×工作液。e酶结合物工作液：按当次试验所需要的用量，使用前20分钟，用酶结合物稀释液将30×浓缩酶结合物稀释成1×工作液。2.3.2.3检测步骤a从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条。b空白孔加标准品&标本通用稀释液，其余相应孔中加标本(100μl/孔)，用封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱孵育90分钟。c提前20分钟准备生物素化抗体工作液。d洗板5次。e空白孔加生物素化抗体稀释液，其余孔加入生物素化抗体工作液(100μl/孔)。用新封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱孵育60分钟。f提前20分钟准备酶结合物工作液。避光室温(22-25℃)放置。g洗板5次。h空白孔加酶结合物稀释液，其余孔加入酶结合物工作液(100μl/孔)。用新封板胶纸封住反应孔，36℃孵箱，避光孵育30分钟。13 研究论文i打开酶标仪电源，预热仪器，设置好检测程序。j洗板5次。k加入显色底物(TMB)100μl/孔，避光36℃孵箱，避光孵育15分钟。l加入终止液100μl/孔,混匀后即刻测量OD450值(3分钟内)。2.3.1.4结果计算与判断a每个标准品和标本的OD值应减去空白孔的OD值。b以标准品：1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6、0pg/ml为横坐标，OD值作纵坐标，用软件绘制标准曲线。c通过标本的OD值可在标准曲线上查到IL-23浓度。2.3.2.5试剂盒性能灵敏度：最小可测人IL-23达8pg/ml。特异性：可同时检测重组或天然的IL-23，不与其他细胞因子交叉反应。重复性：板内，板间变异系数均<9%。2.4统计学方法应用美国SPSSl9.0版本统计软件作统计分析。计量资料数据以均数±标准差表示。多组均数间的比较，在正态分布和方差齐同的条件下作单因素方差分析，非正态、方差不齐条件下采用非参数检验；IL-17及IL-23含量及临床数据间的比较用Pearson分析；IL-17及IL-23水平的独立影响因素采用多元线性逐步回归分析；P≤0.05有统计学意义。结果1临床指标1.1一般情况：IgA患者40例，平均年龄(36.1±13.0)岁，其中男性22例，女性18例；对照组8例，平均年龄(34.9±9.0)岁，其中男3例，女5例。1.2年龄：各组年龄差异无统计学意义(P＞0.5)，对照组：平均年龄(34.9±9.0)岁，M0组平均年龄(34.0±12.4)岁、M1组平均年龄(41.7±13.3)岁，T0组平均年龄(35.17±11.39)岁、T1组平均年龄(37.71±14.68)岁、T2组平均年龄(34.00±14.68)岁。(Fig.1、Table1、Table2)1.3性别：M0组29例，男性14例，女性15例；M1组11例，男性8例，14 研究论文女性3例。T0组17例，男性10例，女性7例；T1组15例，男性8例，女性7例；T2组8例，男性3例，女性5例。对照组男性3例，女性5例。各组患者间性别无统计学差异(P＞0.5)。(Table1、Table2)1.4SBP：对照组与实验组比较收缩压异有统计学意义(P＜0.05，对照组为124.83±11.45mmHg，实验组为145.38±24.90mmHg)。按系膜增生分组M0组与M1组比较收缩压差异有统计学意义(P＜0.05，M0138.31±21.63mmHgvsM1164.00±21.15mmHg)。按间质纤维化分组各组间收缩压比较差异无统计学意义(P＞0.05，T0145.94±26.51mmHgvsT1146.94±24.51mmHgvsT2138.00±23.31mmHg)。(Fig.2、Table1、Table2)1.5DBP：对照组与实验组比较舒张压无统计学意义(P＞0.05，对照组85.75±10.50mmHgvs实验组92.80±15.29mmHg)；按系膜增生分组M0组与M1组比较舒张压无统计学意义(P＞0.05，M090.69±16.80mmHgvsM198.36±8.66mmHg)。按间质纤维化分组各组间舒张压差异无统计学意义(P＞0.05，T093.28±8.35mmHgvsT192.06±22.17mmHgvsT293.60±3.58mmHg)。(Table1、Table2)1.6eGFR：对照组与实验组比较肾小球滤过率差异有统计学意义(P＜0.025，对照组124.81±10.25ml/min/1.73mvs实验组88.88±37.17ml/min/1.723m)。按系膜增生分组M0组与M1组比较肾小球滤过率无统计学意义(P2＞0.05，M089.66±36.07ml/min/1.73mvsM186.81±41.70ml/min/1.732m)。按间质纤维化分组各组间肾小球滤过率差异有统计学意义(P＜0.05，22T0113.36±16.52ml/min/1.73mvsT179.27±35.95ml/min/1.73mvsT2233.36±14.07ml/min/1.73m)。(Fig.3、Table1、Table2)1.724小时尿蛋白定量：实验组24小时尿蛋白定量高于对照组且差异具有统计学意义(P＜0.05，对照组0.01±0.014g/dvs实验组1.58±0.78g/d)。按系膜增生分组M1组24小时尿蛋白定量高于M0组但差异无统计学意义(P＞0.05，M01.46±0.80g/dvsM11.88±0.63g/d)。按间质纤维化分组各组间尿蛋白定量差异无统计学意义(P＞0.05，T01.39±0.53g/dvsT11.51±0.86g/dvsT22.44±0.74g/d)。(Fig.4、Table1、Table2)1.8免疫球蛋白A：按系膜增生分组M1组免疫球蛋白水平高于M0组且差异有统计学意义(P＜0.05，M04.07±0.70g/LvsM15.07±1.04g/L)。按间质纤维化分组各组间免疫球蛋白A差异无统计学意义(P＞0.05，T04.15 研究论文13±0.91g/LvsT14.43±0.69g/LvsT24.60±1.48g/L)。(Table1、Table2)1.9总胆固醇：按系膜增生分组M1组总胆固醇水平高于正常对照组差异具有统计学意义(P＜0.05，M17.31±1.96mmol/Lvs正常对照组4.61±0.94mmol/L)，M1总胆固醇水平高于M0组差异无统计学意义(P＞0.05，M17.31±1.96mmol/LvsM06.14±1.68mmol/L)。M0组总胆固醇水平高于正常对照组但差异无统计学意义(P＞0.05)。按间质纤维化分组总胆固醇各组间差异无统计学意义(P＞0.05，T06.74±1.56mmol/LvsT15.99±1.95mmol/LvsT27.06±2.12mmol/L)。(Fig.5、Table1、Table2)1.10甘油三酯：按系膜增生分组甘油三酯各组间差异无统计学意义(P＞0.05，正常对照组1.42±0.82mmol/LvsM02.06±0.87mmol/LvsM11.92±0.77mmol/L)。按间质纤维化分组甘油三酯各组间差异无统计学意义(P＞0.05，T01.92±0.86mmol/LvsT12.17±0.83mmol/LvsT21.86±0.83mmol/L)。(Table1、Table2)2血清IL-172.1血清IL-17水平：按系膜增生分组IL-17水平各组间差异有统计学意义(P＜0.05，正常对照组7.16±3.97pg/mLvsM011.06±1.78pg/mLvsM113.48±2.62pg/mL)。按间质纤维化分组IL-17水平各组间差异有统计学意义(P＜0.05，T011.33±1.53pmol/LvsT111.69±0.95pmol/LvsT211.94±1.02pmol/L)。(Fig.6、Table1、Table2)2.2血清IL-17水平与临床指标的相关性2.2.1血清IL-17水平与性别、年龄、eGFR、免疫球蛋白A无相关性(相关系数分别为r=0.137、r=-0.100、r=-0.138、r=0.010，P＞0.05)。(Table3)2.2.2血清IL-23血清IL-17水平与收缩压、舒张压、24小时尿蛋白、总胆固醇、甘油三酯呈正相关(相关系数分别为r=0.740、r=0.632、r=0.477、r=0.365、r=0.320，P＜0.05)。(Fig.7、Table3)3.1血清IL-23水平：按系膜增生分组IL-23水平各组间差异无统计学意义(P＞0.05，对照组35.98±11.24pg/mLvsM040.78±7.78pg/mLvsM143.75±9.11pg/mL)。按间质纤维化分组IL-23水平各组间差异无统计学意义(P＞0.05，T040.59±7.77pmol/LvsT141.77±8.95pmol/LvsT242.94±8.02pmol/L)。(Table1、Table2)3.2血清IL-23水平与临床指标的相关性16 研究论文3.2.1血清IL-23水平与性别、年龄、24小时尿蛋白、eGFR、舒张压、总胆固醇、甘油三酯、免疫球蛋白A无相关性(相关系数分别为r=0.194、r=0.152、r=0.253、r=-0.136、r=0.258、r=0.177、r=0.234、r=-0.157，P＞0.05)。3.2.2血清IL-23水平与收缩压呈正相关（相关系数r=0.347，P＜0.05）。4血清IL-17与IL-23的相关性分析：血清IL-17与IL-23呈正相关(r=0.433，P＜0.05)。(Fig.8、Table3)17 研究论文附图6050Age(y)403020100ControlgroupM0M1Fig.1Differencesinagebetweengroups200SBP(mmHg)150100500ControlgroupM0M1Fig.2DifferencesinSystolicbloodpressurebetweengroups18 研究论文125eGFR(1.73/ml/m10075)250250ControlgroupM0M1Fig.3DifferencesineGFRbetweengroups324Upro(g/d)210ControlgroupM0M1Fig.4Differencesin24Uprobetweengroups19 研究论文108CHOL(mmol/L)6420ControlgroupM0M1Fig.5DifferencesinCHOLbetweengroups2015IL-17(pg/mL)1050ControlgroupM0M1Fig.6DifferencesinIL-17betweengroups20 研究论文附表Table1ClinicalcharacteristicsofpatientwithdifferentmesangialhyperplasiaControlgroupM0M1Age(y)34.9±9.034.0±12.441.7±13.3Sex(male/female)3/514/158/3aaSBP(mmHg)124.83±11.45138.31±21.63164.00±21.15DBP(mmHg)85.75±10.5090.69±16.8098.36±8.662eGFR(1.73/ml/m)124.81±10.2589.66±36.0786.81±41.70bb24Upro(g/d)0.01±0.0141.46±0.801.88±0.63IgA(g/L)-4.07±0.705.07±1.04ccCHOL(mmol/L)4.61±0.946.14±1.687.31±1.96TG(mmol/L)1.42±0.822.06±0.871.92±0.77dddIL-17(pg/mL)7.16±3.9711.06±1.7813.48±2.62IL-23(pg/mL)35.98±11.2440.78±7.7843.75±9.11abcNote:P＜0.05MOvsM1;P＜0.05MOvsM1;P＜0.05M1vscontroldgroup;P＜0.05MOvsM1vscontrolgroup.Table2ClinicalcharacteristicsofpatientwithdifferentinterstitialfibrosisControlgroupT0T1T2Age(y)34.9±9.035.17±11.3937.71±14.6834.00±14.68Sex(male/female)3/510/78/73/5SBP(mmHg)124.83±11.45145.94±26.51146.94±24.51138.00±23.31DBP(mmHg)85.75±10.5093.28±8.3592.06±22.1793.60±3.582eGFR(1.73/ml/m)124.81±10.25113.36±16.5279.27±35.9533.36±14.0724Upro(g/d)0.01±0.0141.39±0.531.51±0.862.44±0.74IgA(g/L)-4.13±0.914.43±0.694.60±1.48CHOL(mmol/L)4.61±0.946.74±1.565.99±1.957.06±2.12TG(mmol/L)1.42±0.821.92±0.862.17±0.831.86±0.83IL-17(pg/mL)7.16±3.9711.33±1.5311.69±0.9511.94±1.02IL-23(pg/mL)35.98±11.2440.59±7.7741.77±8.9542.94±8.0221 研究论文Table3CorrelationbetweenserumIL-17andclinicalparameterAgeSexeGFRCHOLTGr-0.1000.137-0.1380.3650.320P0.4890.3550.3510.0110.032IgASBPDBPUproIL-23r0.0100.7400.6320.4770.433P0.9500.0000.0000.0010.00222 研究论文讨论[4]IgA肾病是最常见的原发性肾小球肾炎，是由于异常糖基化IgA1聚合，或与IgG形成聚合物而沉积于肾小球系膜区，进而诱导肾脏炎症、免疫反应。IL-17是一种促炎性细胞因子，能促进趋化因子分泌，募集炎症细胞，扩大炎性反应，进而抵抗病原体感染。IL-17的过度表达可导致多种自身免疫性疾病、肿瘤和感染性疾病等。外周活化的CD4+记忆性T淋巴细胞亚群和CD8+记忆性T淋巴细胞中的CD45RO+亚群TH17细胞受刺激后可分泌IL-17；IL-17受体(IL-17R)都属于Ⅰ型单次跨膜蛋白，且都含有保守的结构基序，包括一个胞外纤维连接蛋白Ⅲ样结构域和一个胞质的纤维母细胞生长因子基因的相似表达(SEF)/IL-17R(SEFIR)结构域。IL-17R在体内分布广泛，在成纤维细胞、肠上皮细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞、肌细胞及脾、肾、肺、肝等多种细胞和组织中均有不同程度的表[5]达，以脾脏和肾脏的含量最为丰富。IL-17必须与细胞膜上相应受体结合后才能发挥其生物学效应。IgA肾病与粘膜感染密切相关，而IL-17在粘膜感染中起关键作用，且IL-17可协助促进B淋巴细胞的活化，能够介导防御反应的IL-6、IL-1β、TNF-α等促炎症因子导致慢性炎症状态，IL-17有可能参与IgAN的发病及进展。[6]LiuC等发现IL-17通过丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和核因子κB(NF-κB)两条信号途径介导IL-17R下游信号传递及引起多种炎症细胞并启动相关靶基因转录因子、趋化因子、组织重构因子等的表达，进而招募[7]中心粒细胞、T细胞等至炎症部位。Lin等发现在IL-17高表达的患者肾功能降低，肾小管萎缩、间质纤维化表现突出，结果提示，IL-17可能参[8]与IgA肾病间质纤维化的进展。杨青梅等研究发现，IL-17与IgAN新月体的形成呈正相关，IL-17高表达时，促炎性细胞及细胞因子增多，大量中性粒细胞、巨噬细胞等趋化，释放蛋白水解酶破坏肾小球基底膜或Bowman囊壁，炎性细胞进入Bowman囊，与上皮细胞等共同占据囊腔，这有可能是新月体形成的机制之一，IL-17可以反映肾小球损伤程度。Hi[9]raiY等发现IL-17能通过ERK1/2信号通路调节mRNA转录和蛋白质翻译，诱导粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的生产，表明IL-17在肾小管损23 研究论文伤中起重要作用。本研究结果发现本研究结果发现血清IL-17水平在IgA肾病组明显高于正常对照组；并且随着系膜增生、间质纤维化程度加重，血清中IL-17的水平逐步升高，各级组间差异均有统计学意义，提示血清IL-17的水平与系膜增生程度及间质纤维化程度是一致的。异常糖基化IgA1聚合，或与IgG形成聚合物沉积在系膜区，可以活化系膜细胞由此，系膜细胞开始出现一系列变化，如细胞增生、合成细胞外基质蛋白、释放[11]多种细胞因子(如IL-6、IL-8、IL-1β、血管内皮生长因子等)。上述细胞因子可诱导TH17细胞的分化，促使其释放多种炎症因子如IL-17、IL-17[12]F等。而IL-17可招募中性粒细胞、单核细胞及T细胞等系膜区进而引[13]起系膜增生。IL-17可协助活化B淋巴细胞产生免疫球蛋白，循环中免疫复合物增多，免疫复合物沉积在系膜区进而加重系膜增生。[14]2007年Kusano等在一项前瞻性临床研究中发现，在所有研究14例IgAN患者的扁桃体中均发现有幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,HP)，提[15]示扁桃体HP感染可能与IgAN密切相关。此外，近年来有研究报道，在IgAN患者血清中，抗幽门螺杆菌IgA的抗体水平明显增高；在IgAN70%的患者中，抗幽门螺杆菌抗体沿肾小球毛细血管壁呈颗粒状沉积。上[16]述研究结果提示，HP可能是IgAN的重要致病抗原。有研究显示HP感染时，IL-17水平升高，并与相应受体结合，促进趋化因子分泌，动员免疫系统来抵抗病原菌。本研究显示IgA组血清IL-17水平高于正常对照组，且差异具有统计学意义，考虑与IgAN普遍存在HP感染有关。Hp感染与IgAN的发生和发展有密切关系，但具体机制并未阐明，HP是否为IgAN的重要致病抗原，有待我们进一步研究，为临床IgAN的病因治疗寻找科学的依据。[17]Madhur等通过研究载脂蛋白E(APOE)-/-及IL-17A/ApoE-/-老鼠予以高脂肪喂养及血管紧张素Ⅱ输液，或局部颈动脉结扎术形成颈动脉粥样硬化模型，说明IL-17可以促使颈动脉粥样硬化的狭窄加重并调节斑块稳[10]定性。国内也研究表明透析患者的IL-17浓度高于非透析患者，IL-17血清浓度越高，发生冠状动脉粥样硬化的风险越高，这与CRF患者心血管病发生率较高可能有关。本实验发现血清中的IL-17水平随着收缩压、舒张压的升高而升高。IL-17水平升高可促进机体分泌血管紧张素Ⅱ增加，进而促使血压的升高，但其中具体机制尚不十分明确。另外血压升高不排24 研究论文除与肾功能受损有关。[18]有研究表明，尿蛋白量和持续时间与IgAN的病理严重程度进展相关。蛋白尿是肾脏损伤的标志,而且作为一个独立的致病因素参与肾脏[7]疾病的进展。Lin等研究发现，IgA肾病患者血清IL-17、IL-21,、IL-23和IL-6升高，而血清IL-10降低，且血清IL-17与24h尿蛋白定量正相关，在IL-17高表达的患者中肾功能降低。本实验研究发现，随着血清IL-17水平升高，24小时尿蛋白定量也升高，血清中IL-17的水平与24小时尿蛋白定量呈正相关。白介素23(IL-23)是IL-12异源二聚体细胞因子家族中新的一员，IL-23受体包括IL-12受体β1(IL-12Rβ1)和IL-23受体2个亚基。IL-23主要由活化的树突状细胞(dendriticcell,DC)、巨噬细胞及单核细胞等产生。人的IL-23受体主要表达在活化的记忆性T细胞、自然杀伤细胞(NK)、固有免疫细胞(ILCs)，而在单核细胞，巨噬细胞及树突状细胞也有低水平表[19]达；另外，骨髓来源的浆细胞也表达IL-23受体。IL-23主要通过与其受体IL-23受体相互作用，激活下游信号通路而发挥生物学功能。IL-23主要作为一种前炎症细胞因子而发挥作用，主要作用于记忆性T淋巴细胞，具有影响免疫反应的作用，还具有潜在的抗感染和抗肿瘤作用。IL-23作为IL-12家族的新成员,在一些炎症性自身免疫性疾病模型的形成和发展中起着十分重要的作用,如炎症性肠病(BID)、自身免疫性脑脊髓膜炎[20~22](EAE)、胶原诱导的关节炎(CIA)、实验性自身免疫性葡萄膜炎(EAU)。[23~24]有研究表明IL-23可促进Th17细胞的分化、增殖，进一步促进IL-17的分泌，故被称为IL-23/IL-17通路。动物实验证实，缺失IL-23靶基因的小鼠体液免疫受损严重，IL-23缺陷的抗原提成细胞(APCs)刺激T细胞分泌IL-17前炎症因子的能力明显下降，同时IL-17缺失小鼠和IL-23缺失小[25]鼠有着相似的表型。Th17细胞的分化主要有两条途径:一是IL-23依赖的途径，IL-23通过扩大正反馈回路，上调IL-1β、IL-6及TNF-α的表达，参［26］与Th17细胞的扩增增值，并维持其存活。与此同时IL-23抑制Th17细胞向Th1细胞的分化。在体内试验中显示出，当IL-23的主要来源为树突状［27］细胞时，在某些病理条件下IL-17可永久表达。另一条为IL-23非依赖途径，即Tregs来源的转化生长因子-β(transforminggrowthfactor,TGF-β)在IL-6存在的条件下，诱导幼稚CD4+T细胞直接分化为Th17细胞。树突25 研究论文细胞产生的TNF-α和IL-1β也能促进TGF介导的Th17细胞的分化。IL-23并不是促进Th17细胞分化的必需因素，但对Th17细胞功能发挥和IL-17的分泌具有重要意义。IL-23/IL-17轴最近被描述在不同慢性发病中起主要作用炎症和免疫疾病，如类风湿性类风湿关节炎(RA），牛皮癣，特应性皮炎，[28]炎症肠道疾病(IBD)，和牙周炎。IL-23作为IL-23/IL-17通路的上游驱动[20~22]因子，其在炎症反应和自身免疫性疾病中的重要性已被广泛证明。本研究发现正常对照组与IgA肾病组血清IL-23水平无统计学差异。且IL-23与24小时尿蛋白定量及肾小球滤过率无相关性，而血清IL-23水平与血清IL-17水平呈正相关，推测IL-23参与IL-17的产生，进而影响IgA肾病的发展，即IL-23/IL-17通路可能参与IgA肾病的发展过程。本实验结果说明IL-17、IL-23可能是发生IgA肾病过程中的两个重要的细胞因子，推测在IgA肾病免疫治疗中IL-17及IL-23/IL-17轴有望成为新靶点。结论1在IgA肾病中，随着系膜增生、间质简直纤维化的加重，血清中IL-17的含量逐渐升高，24尿蛋白定量逐渐增高，肾小球滤过率逐渐降低，血清IL-17水平与24尿蛋白定量呈正相关关系，提示IL-17参与了IgA肾病进展，且其在血清中的水平可以反应疾病的严重程度。2血清IL-23水平与血清IL-17水平呈正相关关系，IL-23与24小时尿蛋白定量及肾小球滤过率无相关性且正常对照组与IgA肾病组血清IL-23水平无统计学差异，表明IL-23参与IL-17的产生，并没有直接参与IgA肾病的发展。参考文献1HwangVJ,UluA,vanHoorebekeJ,etal.BiomarkersinIgAnephropathy.Biomarkersinmedicine,2014,8(10):1263-772VOIPeE,ServantN,ZollingerR,etal.Acritiealfunetionfortransforminggrowthfactor-β,interleukin23andproinflammatorycytokinesinD26 研究论文rivingandmodulatinghumanTH-17responses[J].NatImmunol,2008,9(6):650-6573AstryB,VenkateshaSH,MoudgilKD.InvolvementoftheIL-23/IL-17axisandtheTh17/Tregbalanceinthepathogenesisandcontrolofautoimmunearthritis.Cytokine,2015,6(13):125-1374NasriH,MubarakM.ExtracapillaryproliferationinIgAnephropathy;recentfindingsandnewideas.Nephropathol,2015,4(1):124-1375ShabgahAG,FattahiE,ShahnehFZ.Interleukin-17inhumaninflammatorydiseases.Postepydermatologicialergologii,2014,31(4):256-616LiuC,QianW,QianY,etal.Actl,aU-boxE3ubiquitinligaseforIL-17signaling.SciSignal,2009,2(92):263-2377LinFJ,JungGR,ShanJP,etal.ImbalanceofregulatoryTcellstoTh17cellsinIgAnephropathy.ScandJClinLablnvest,2012,72(3):221-2298杨青梅,鲍晓荣.原发性IgA肾病外周血IL-17及TGF-β1的表达及意义中国临床医学,2013,20(2):154-1569HiraiY,IyodaM,ShibataT,etal.IL-17Astimulatesgranulocytecolony-stimulatingfactorproductionviaERK1/2butnotp38orJNKinhumanrenalproximaltubularepithelialcells,Americanjournalofphysiology.Renalphysiology,2012,302(2):244-25010王文红,邵世和,焦志军,等.小鼠Th17细胞体外诱导扩增的实验研究.中华微生物学和免疫学杂志,2012,32(3):245-24611TamouzaH,VendeF,TiwariM,etal.Transferrinreceptorengagementbypolymeric;IgAlinducesreceptorexpressionandmesangialcellproliferation:roleinIgAnephropathy.ContribNephrol,2007,157(1):144-14712ShabgahAG,FattahiE,ShahnehFZ.Interleukin-17inhumaninflammatorydiseases.PostepyDermatolAlergol,2014,31(4):256-6113OnishiRM,GaffenSL.Interleukin-17anditstargetgenes:mechanismsofinterleukin-17functionindisease.Immunology,2010,129(3):311-32114KusanoK,TokunagaO,AndoT,etal.HelicobacterinthepalatineTonsilsofpatientswithigAnephropathycomparedwiththoseofpatientswithrecurrentpharyngotonsillitis[J].Hupathol,2007,38(12):1788-179727 研究论文15KusanoK,InokuchiA,FujimotoK,etal.CoccoidHelicobacterpyloriexistsinthepalatinetonsilsofpatientswithIgAnephropathy[J].Gastroenterol,2010,45(4):406-41216BagheriN,Azadegan-DehkordiF,ShirzadH,etal.ThebiologicalfunctionsofIL-17indifferentclinicalexpressionsofHelicobacterpylori-infection.MicrobPathog,2015,13(81):33-3817MadhurMS,FuntSA,LiL,etal.Roleofinterleukin17ininflammation,atherosclerosis,andvascularfunctioninapolipoproteinedeficientmice[J].ArteriosclerThrombVascBiol,2011,31(7):1565-157218EiroM,KalohT,KurilciM,etal.Theproductofdurationproteinuria(p-roteinuriaindex)isapossiblemarkerforglomerularandtubulointe-rstitialclamage[J].Nephron,2002,90(4):432-44119CoccoC,CanaleS,FrassonC,etal.Interleukin-23actsasantitumoragentonchildhoodB-acutelymphoblasticleukemiacells[J].Blood,2010,116(19):3887-389820LangrishCL,ChenY,BlumenseheinWM,etal.IL-23drivesaPhatogenieTcellpopulationthatinducesautoimmuneinflammation[J].ExpMed,2005,201(2):233-24021YenD,CheungJ,ScheerensH,etaI.IL-23isessentialforTcellmediatedcolitisandpromotesinflammationviaIL-17andIL-6[J].ClinInvest,2006,116(5):1310-131622CaspiR,SilverP,CuaD,etaI.IL-23andIL-17inpathogenesisofexperimentalocularautoimmunity:requirementforIL-23mayextendbeyonditsroleinsustainingtheIL-17effectorresponse[J].Immuno1,2007,178(4):129-14123Sheng-YangWu,Jhang-SianYu,Fu-TongLiu,etal.Galectin-3NegativelyRegulatesDendriticCellProductionofIL-23/IL-17-AxisCytokinesinInfectionbyHistoplasmacapsulatum.TheJournalofImmunology,2013,190(23):3427-343724UrvashiBhan,MichaelJ,Newstead,etal.TLR9-DependentIL-23/IL-17isRequiredfortheGenerationofStachybotryschartarum-inducedHy28 研究论文persensitivityPneumonitis.JImmunol,2013,190(1):349-35625BaarsEW,NieropAF,SavelkoulHF.Developmentofsystemsbiologyorientedbiomarkersbypermutedstepwiseregressionforthemonitoringofseasonalallergicrhinitistreatmenteffects［J］.ImmunolMethods,2012,378(1-2):62-7126DiCesareA,DiMeglioP,NestleFO.TheIL-23/Th17axisintheimmunepathogenesisofpsoriasis［J］.InvestDermatol,2009,129(6):1339-135027靳赢,林晓萍.调节性T细胞及Th17细胞与牙周骨吸收的研究进展.口腔医学,2011,31(12):757-75928ToussirotE.TheIL23/Th17pathwayasatherapeutictargetinchronicinflammatorydiseases.InflammationandAllergy,2012,11(2):159-16829 综述综述IL-17在IgA肾病中作用IgA肾病（ImmunoglobulinAnephropathy,IgAN）是肾小球系膜区以IgA沉积为主的原发性肾小球病，是全球范围内最常见的原发性肾小球疾[1]病，约40%的成人患者在25年内进展为终末期肾病。IgAN发病中，甚至病情恶化常与粘膜感染密切相关，其肉眼血尿常随呼吸道、胃肠道黏膜感染的发生而发作。35%～40%的患者有上呼吸道感染，且常伴有扁桃体[2-3]炎。淋巴细胞(lymphocyte)是构成机体免疫系统的主要细胞群体，CD4+T细胞按其所产生的细胞因子谱，最初被分为TH1细胞和TH2细胞。最近，随着一类新的被命名为TH17细胞的CD4+T细胞亚群的发现，CD4+T细的细胞亚群分类随之被更新为三类。TH17细胞以其分泌白介素-17(interleukin-17,IL-17)而得名，除此之外,它们还分泌IL-17F、IL-21和IL-[4]22。IL-17是一种促炎性细胞因子，能促进趋化因子分泌，募集炎症细胞，扩大炎性反应，进而抵抗病原体感染。近年研究发现,IL-17引起的免疫反应在肾脏炎症性疾病的发病中也起到了重要作用。本文主要对IL-17与IgA肾病免疫发病机制中的相关作用进行阐述。1IL-17家族及受体1.1IL-17家族[5]1993年，Rouvier等首次从激活的啮齿类T细胞杂交瘤中克隆出CTLA-8的cDNA序列，并发现其与一种T细胞疱疹病毒-松鼠猴疱疹病毒(Herpesvirussaimiri)的第13个开放阅读框(HSV13,vIL-17)有57%的同源性。[6]1995年，Yao等发现CTLA-8蛋白可以分泌到胞外，能激活成纤维细胞的核因子κB(nuclearfactory-κB,NF-κB)，诱导IL-6的分泌，可以共激活T细胞增殖，并基于其类似细胞因子的性质，提议将其命名改为白介素-17。IL-17家族由150~180个氨基酸所组成，相对分子量(Mr)为20~30ku，家族各成员间有20~50%同源性。目前IL-17家族已发现6个成员：IL-17[7]A(IL-17)、IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E(亦称IL-25)及IL-17F。IL-7A是IL-7家的原型，是由155个氨基酸组成，为二硫键连接的同型二聚体糖蛋白，相对分子质量为35×103。IL-7F与IL-7A有50%的同源性，而30 综述IL-7B~E与IL-7A的同源性仅为16%-30%，而且定位在不同的染色体上。IL-7家族主要以同源二聚体或异源二聚体的形式行使功能，其中IL-17A、IL-17E及IL-17F是重要的促炎症因子。IL-17A与自身免疫性疾病关系密切。大量的研究表明IL-17A(此后同称为IL-17)在许多的实验动物模型和人类免疫性疾病中扮有重要角色。1.2IL-17受体家族IL-17受体(IL-17R)家族胞外区有293个氨基酸，跨膜区有21个氨基酸，胞内则有525个氨基酸。IL-17R家族目前由五个成员组成:IL-17RA、IL-17RB、IL-17RC、IL-17RD、IL-17RE。其都属于Ⅰ型单次跨膜蛋白，且都含有保守的结构基序，包括一个胞外纤维连接蛋白Ⅲ样结构域和一个胞质的纤维母细胞生长因子基因的相似表达(SEF)/IL-17R(SEFIR)结构域。这个结构域与IL-1受体中的Toll样结构域相似，且也表达与胞浆蛋白Act1中。IL-17受体家族成员之间可组合为不同的受体复合物，通过与不同的配体结合行使功能。其中IL-17RA作为这个家族里迄今为止最大的分子,是至少四个配体的传递信号的通用亚基。IL-17一旦与受体结合，通过丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和核因子κB(NF-κB)两条信号途径诱导下游基因表达。IL-17信号传导过程中核因子κB激活剂1(Act1)通过在K124位以K63多聚泛素化的方式修饰肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)，介导IL-17R下游信号传递及引起多种炎症细胞并启动相关靶基因转录因子、趋化因子、组织重构因子等的表达，进而招募中心粒细胞、T细胞等至炎症部位，发挥组织炎症损伤、抗病原微生[12]物免疫应答等作用。而TRAF3通过竞争结合IL-17R影响了IL-17R-Actl-TRAF6信号复合物的形成，从而有效抑制IL-17信号转导及其下游炎症因子的诱导。IL-17R在体内分布广泛，在成纤维细胞、肠上皮细胞、B淋巴细胞、T淋巴细胞、肌细胞及脾、肾、肺、肝等多种细胞和组织中均有不同程度[8]的表达，以脾脏和肾脏的含量最为丰富。尽管IL-17R分布范围广，但IL-17的主要效应细胞则是表皮细胞、内皮细胞和成纤维细胞。1.3IL-17来源IL-17主要由外周活化的CD4+记忆性T淋巴细胞亚群和CD8+记忆性T淋巴细胞中的CD45RO+亚群Th17细胞受刺激后分泌。Th17细胞分化需要31 综述[9~10]TGF-β、IL-6、IL-21、IL-23、IL-lβ、TNF的共同诱导。IL-23对于IL-17的产生以及扩大抗原致敏性Th17细胞的表达至关重要。近年研究发现，Th17细胞引起的兔疫反应而且在CD4+T细胞的分化过程中，可能存在Th1-Th17的中间状态，它们可以同时表达两群细胞的特征性转录因子T-bet和[11]RoRγt。IL-17也可由先天免疫细胞分泌，如CD3+稳定的自然杀伤性T细胞(iNKT)，淋巴组织诱导细胞(LTicells)、自然杀伤细胞、髓系细胞等。此外，肥大细胞和中性粒细胞也可以产生IL-17。Th17细胞是一群独立的CD4+细胞亚群，对于Th0细胞到Th17细胞的分化过程有人认为，Th1和Th17的分化早期是重叠的，存在一种ThI1前体细胞或者前Th1细胞的过渡状态，这种过渡状态细胞同的时表达IL-23和IL-12两种受体，当免疫环境中存在IL-12时，由Th0向Th1转化，而当免疫环境存在IL-23时，则从Th0向Th17转化。Th2细胞分泌的IL-4抑制Th17的分化；Th1细胞分泌的IFN-γ在促进Th1细胞分化的同时对Th17的分化也有明显的抑制作用。同时IL-6和TGF-β对于Th17细胞的分化是不可或缺的，而IL-21、IL-1β对于Th17细胞的分化或者维持也行使了特定的功能。2IL-17在炎症性疾病中的作用IL-17细胞因子家族在固有免疫和适应性免疫水平均参与了机体免疫调节，并在不同疾病中发挥着不同作用，它能促进炎症反应从而减轻或加[13]重病原体感染对机体的损害性作用。研究显示，IL-17在保护宿主防御感染中起到关键作用，尤其在肺、肠、口腔等粘膜位置特别显著。IL-17细胞因子的表达是由微生物信号、上皮细胞与固有及获得性淋巴细胞之间的相互连接控制的。粘膜表面富集了产IL-17的细胞，在病原体感染时，上皮细胞和固有淋巴细胞是最基础的部分，它可以控制感染，也可以为促进获得性免疫应答提供必要的信号，而IL-17能够介导防御反应的IL-6、IL-1β、TNF-α等促炎症因子导致慢性炎症状态，还可诱导基质金属蛋白酶等组织降解酶的表达，引起炎性细胞的浸润和组织破坏。此外，IL-17还能通过诱导对淋巴细胞、树突状细胞及其它免疫细胞有趋化活性的蛋白(CXCL9,CXCL10,CCL20)将这些细胞靶向到粘膜表面及诱导趋化因子CCL2与CCL7招募单核细胞。并且IL-17能够上调直接杀死入侵病原菌的抗[14]菌肽，对宿主免疫做出贡献。[15]动脉粥样硬化是一种低度慢性炎症反应性疾病。Madhur等在动脉32 综述粥样硬化斑块的形成过程中认为IL-17可以促进颈动脉粥样硬化的狭窄加重并调节斑块稳定性，通过研究载脂蛋自E(APOE)-/-及IL-17A/ApoE-/-老鼠予以高脂肪喂养及血管紧张素Ⅱ输液，或局部颈动脉结扎术形成颈动脉粥样硬化模型。结果显示在实验动物研究中，IL-17促进了动脉粥样硬化及全身的血管炎症，IL-17可调节斑块的稳定性。目前研究显示，IL-17在抵御细胞外细菌感染中的作用比抵御细胞内细菌感染中的作用重要。因为在一般情况下，IL-17在宿主防御细胞内细菌感染时不是必要的。IL-17在肺炎杆菌、鼠类柠檬酸杆菌、牙龈单胞菌等细胞外细菌感染中的作用已经在动物模型中得到验证。然而IL-17在细胞内细菌感染中的作用也逐渐被认识。例如针对结核杆菌的疫苗,需要IL-17的存在才能发挥生物学效应；抵御土拉热杆菌的感染同样需要IL-17的参与。IL-17也能参与病毒免疫反应，同时对机体可造成有益或有害的影响。T细胞疱疹病毒可表达一个IL-17的同源性基因，尽管其临床意义尚未可知，但是IL-17在病毒感染中的作用仍然引起人们的关注。在某些病毒感染背景下，IL-17通过促成细胞因子风暴起到致病作用。在一个流感病毒感染模型中，IL-17与IL-17F在感染后两天即被诱导表达，IL-I7RA敲出小鼠中中性粒细胞趋化因子与炎症因子表达减少，进而表现出比野生型小鼠更高的存活率。IL-17同时参与真菌感染，但可能会因感染途径的不同而发挥保护或者破坏作用。白色念珠菌静脉注射致病时，IL-17产生保护宿主的作用；而注射进肠腔内导致粘膜感染时，IL-17反而产生扩大炎症的作用。此外，IL-17也在机体防御寄生虫的过程中也起到重要的保护作用。3IL-17与自身免疫性疾病系统性红斑狼疮传统上被认为主要是一种B细胞疾病，但近来的研究表明IL-17在系统性红斑狼疮发病中发挥作用。在系统性红斑狼疮病人的外周血中产生IL-17的细胞比率增加，病人血清中的IL-17水平也异常高。此外，病人体内的IL-6和IL-21等炎症因子表达也有增加；浆细胞样树突状细胞(plasmacytoiddendriticcells,PDCs)在被通过Toll样受体7(TLR7)激活后可以诱导CD4+T细胞转变为TH17细胞，而病人体内又有能激活TLR7的包含核酸的免疫复合物，这种环境对于TH17细胞的产生是非33 综述常理想的。IL-7可促使B淋巴细胞活化，协助活化淋巴细胞产生免疫球蛋白，增强B淋巴细胞的功能，并可以协同B淋巴细胞活化因子(BAFF)[16,17]保护B细胞免于凋亡，从而增加了产生自身抗体的细胞数量。而炎性损伤和自身抗体产生的免疫复合物能够进一步使炎症扩大，促进免疫球蛋白的产生。风湿性关节炎(rhetunatoidarthritis,RA)的特征是炎症关节内滑膜成纤维细胞增生，关节和软骨破坏，CD4+辅助性T细胞与产生自身抗体的浆细胞浸润。RA患者的关节滑膜中浸润的T细胞表达IL-17，患者血清和滑膜液中的IL-17水平上升，IL-17可以通过刺激滑膜细胞表达分泌角质细胞生长因子(keratinocytegrowthfactor,KGF)、肝细胞生长因子(hepatocytegrowvthfactor,HGF)和肝素结合性表皮生长因子(heparin-bindingepidemalgrowthfactor,HB-EGF)等血管因子促进血管翳的形成，在RA的早[18]期即发挥破坏作用。IL-17可以诱导软骨、滑膜细胞、巨噬细胞和骨细胞分泌TNF-a,IL-Iβ与IL-6等促炎症细胞因子，这些促炎症因子导致风湿性关节炎突然发作。此外，IL-17还可通过环氧化酶-2(cyclooxgenase-2,COX-2)诱导前列腺素E2(prostaglandin,E2)，前列腺素E2的扩血管作用也能促进炎症细胞进入炎症部位，能吞噬免疫复合物及释放溶酶体，包括中性蛋白酶和胶原酶，破坏胶原弹力纤维，使滑膜表面及关节软骨受损。综上IL-17既可增强炎症，又能刺激破骨细胞分化导致骨和软骨损伤。多发性硬化是中枢神经系统(CNS)自身免疫性疾病，其主要特点是中枢神经系统白质炎性脱髓鞘病变，好发于青壮年。蛋白的表达均明显升高。[19]Lock等利用微列阵分析方法发现，多发性硬化损伤部位编码炎性细胞因子的基因转录增加，尤其是IL-17、IL-6和粒细胞集落刺激因子(granulocytecolonystipulatingfactor,G-CSF)在炎症反应急性期表达上调，而慢[20]性期则不明显。研究表明，IL-17与IL-22通过直接作用于内皮细胞破坏血脑屏障的紧密连接，这使的TH17细胞就能进入中枢神经系统造成神[21]经损伤。动物实验表明，IL-17在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠急性期的血液和脑脊液中都有较高水平的表达，IL-17细胞在EAE的发病中起重要作用。4IL-17在IgA肾病中的作用目前IgAN的病因与病机尚未完全阐明。主要认为与免疫、骨髓、遗34 综述传等因素有关，而其中免疫因素最为重要。IgA肾病是由于异常糖基化IgA1聚合，或与IgG形成聚合物而沉积于肾小球系膜区，进而诱导肾脏炎症、免疫反应。[22]Lin等研究发现，IgA肾病患者血清IL-17、IL-21、IL-23和IL-6升高，而血清IL-10降低，且血清IL-17与24h尿蛋白正相关，在IL-17高表达的患者中肾功能降低，肾小管间质损伤严重，结果提示，IL-17可[23]能参与IgAN发病过程。杨青梅等研究发现，IL-17与IgAN新月体的形成呈正相关，IL-17高表达时，促炎性细胞及因子增多，大量中性粒细胞、巨噬细胞等趋化，释放蛋白水解酶破坏肾小球基底膜或Bowman囊壁，炎性细胞进入Bowman囊，与上皮细胞等共同占据囊腔，这可能是新月体形成的机制之一，IL-17可以反映肾小球损伤程度。异常糖基化IgA1聚合，或与IgG形成聚合物沉积在系膜区，可以活化系膜细胞，引起细胞内Ca+浓度升高，激活磷脂酶C-γ1，导致蛋白质酪氨酸磷酸化作用及细胞内三磷酸肌醇的产生增多。由此，系膜细胞开始出现一系列变化，如细胞增生、合成细胞外基质蛋白、释放多种细胞因子[24](如IL-6、IL-8、IL-1β、血管内皮生长因子等)。上述细胞因子可诱导TH17细胞的分化，促使其释放多种炎症因子如IL-17、IL-17F等。IL-17可协助活化B淋巴细胞产生免疫球蛋白，IL-17可以上调小鼠肾小球系膜细胞炎症cc趋化因子配体2(CCL2)/单核细胞趋化蛋白1(MCP-1),CCL3/巨噬细胞炎症蛋白1(MIP-1)和CCL20/肝和活化调节趋化因子(LARC)的[25]表达。5结语IL-17细胞因子家族的组成、结构、信号转导、基本生物学效应及作用机制已经被不同程度地阐明。IL-17在主动免疫和固有免疫反应的交界处发挥作用，它主要由TH17细胞分泌，但在天然免疫和宿主防御中发挥作用，调控粒细胞的生成，对细胞外病原体的入侵产生阻断作用，同时在维持和诱导慢性炎症的过程中发挥了重要作用。IgAN与粘膜感染密切相关，而IL-17在粘膜感染中起关键作用，且IL-17可协助促进B淋巴细胞的活化，能够介导防御反应的IL-6,IL-1β、TNF-α等促炎症因子导致慢性炎症状态，推测，IL-17有可能参与IgAN的发病及进展。35 综述参考文献1HuangL,GuoFL,ZhouJ,etal.IgAnephropathyfactorsthatpredictandaccelerateprogressiontoend-stagerenaldisease.Cellbiochemistryandbiophysics,2014,68(3):443-72MengH,OhtakeH,IshidaA,etal.IgAproductionandtonsillarfocalinfectioninIgAnephropathy.Journalofclinicalandexperimentalhematopathology:JCEH,2012,52(3):161-1703PipiliC,MichopoulosS,SotiropoulouM,etal.IsthereanyassociationbetweenIgAnephropathy,Crohn'sdiseaseandHelicobacterpyloriinfection.Renalfailure,2012,34(4):506-5094GhanimaAT,ElolemyGG,GanebSS,etal.RoleofThelper17cellsinthepathogenesisofsystemiclupuserythematosus,TheEgyptianjournalofimmunology.EgyptianAssociationofImmunologists,2012,19(2):25-335RouvierE,LueianiMF,MatteiMG,etal.CTLA-8clonedfromanactivatedTcellbearingAU-richmessengerRNAinstabilitysequeneesandhomologoustoaherpesvirussaimirigene.JImmunol,1993,150(12):5445-54566YaoZ,FanslowWC,SeldinMF,etal.HerpesvirusSaimirieneodesanewcytokineIL-17whichbindstoanovelcytokinereceptor.Immunity,1995,3(6):811-8127YoichiroIwakura,HarumichiIshigame,ShinobuSaijo,etal.FunctionalSpecializationofInterleukin-17FamilyMembers.Immunity,2011,3(4):149-1628ShabgahAG,FattahiE,ShahnehFZ.Interleukin-17inhumaninflammatorydiseases.Postepydermatologiiialergologii,2014,31(4):256-619YangL,AndersonDE,Baeche-AllanC,etal.IL-21andTGF-βarerequiredfordifferentiationofhumanT(H)17cells.Nature,2008,454(7202):350-35210施沛青,朱书,钱友存.IL-17的信号传导及功能研究.中国细胞生物学学,236 综述011,33(4):345-35711AnnunziatoF,CosmiL,LiottaF,etal.ThephenotypeofhumanThl7cellsandtheirprecursors,thecytokinesthatmediatetheirdifferentiationandtheroleofThl7cellsininflammation.IntImmunol,2008,20(11):1361-136812LiuC,QianW,QianY,etal.Actl,aU-boxE3ubiquitinligaseforIL-17signaling.SciSignal,2009,2(92):62-6313O'QuinnDB,PalmerMT,LeeYK,etal.EmergenceoftheTh17pathwayanditsroleinhostdefense.AdvImmunol,2008,99(13):115-163.14OnishiRM,GaffenSL.Interleukin-17anditstargetgenes:mechanismsofinterleukin-17functionindisease.Immunology,2010,129(3):311-32115阳慧,苏雨江.血浆IL-17水平与颈动脉内中膜厚度的相关性研究［J］.海南医,2014,25(8):1105-111016徐靓,张慧涛,郑晶等.白细胞介素17在狼疮性肾炎小鼠中的表达及抗白细胞介素17抗体的干预作用.中国病理生理杂志,2014,30(2):343-34617OnishiRM,GaffenSL.Interleukin-17anditstargetgenes:mechanismsofinterleukin-17functionindisease.Immunology.2010,129(3):311-32118HonoratiMC,NeriS,CattiniL,etal.Interleukin-7aregulatorofangiogenicfactorreleasebysynovialfibroblasts[J].OsteoarlbritisCartilage,2006,14(6):345-35219LockC,HermansG,PedottiR,eta1.Genemicroarrayanalysisofmultiplesclerosislesionsyieldsnavtargetsvalidatedinauminmuneencephalanyelitis.NatMed,2002,8(5):500-50820KebirH,KreymborgK,IferganL,etal.HumanTH17lymphocytespromotebloodbrainbarrierdisruptionandcentralnervoussysteminflammation.NatMed,2007,13(10):1173-117521苏净.IL-17,IL23与多发性硬化相关性研究进展.国际神经病学神经外科学杂志,2008,35(5):469-47322LinFJ,JungGR,ShanJP,etal.ImbalanceofregulatoryTcellstoTh17cellsinIgAnephropathy.ScandJClinLablnvest,2012,72(3):221-22937 综述23杨青梅,鲍晓荣.原发性IgA肾病外周血IL-17及TGF-β1的表达及意义.中国临床医学,2013,20(2):154-15624TamouzaH,VendeF,TiwariM,etal.Transferrinreceptorengagementbypolymeric;IgAlinducesreceptorexpressionandmesangialcellproliferation:roleinIgAnephropathy.ContribNephrol,2007,157(1):144-14725FaustHJ,TurnerJE,SteinmetzOM,etal.TheIL-23/Th17AxisContributestoRenalInjuryinExperimentalGlomerulonepbritis.JAmSocNephro1,2009,20(5):969-97938 致谢致谢在本论文即将完成之际，谨此向我的导师李素敏教授致以衷心的感谢和崇高的敬意！我的进步离不开您的关心和支持。本论文的工作是在李老师的悉心指导下完成的。从实验的设计、开题、标本数收集、实验步骤的指导、论文的撰写都离不开李老师的支持，李老师敏锐的洞察力、渊博的知识、严谨的治学态度、精益求精的工作作风和对科学的献身精神给我留下了刻骨铭心的印象，这些使我受益匪浅，并将成为我终身献身科学和献身事业的动力。在攻读硕士的这三年里，李老师在思想上、人生态度和意志品质方面给予了谆谆教诲，这些教益必将激励着我在今后的人生道路上奋勇向前。真诚感谢河北医科大学第二医院各位老师、专家对我临床实践工作的大力支持和帮助。他们开创性的研究拓展了我的学术视野，无数次的争论和探讨使我的研究工作有了长足的进展。由衷感谢河北医科大学第二医院护士老师的大力支持，感谢在标本收集上给予的无私帮助。衷心的感谢我的父母和其他亲朋好友对我的关心、支持和理解，没有他们对我的关心、鼓励和支持，我无法完成现在的硕士学业。最后，感谢曾经教育和帮助过我的所有老师。衷心地感谢为评阅本论文而付出宝贵时间和辛勤劳动的专家和教授们！39 个人简历个人简历一、一般情况姓名林芳性别女民族汉族出生日期1986年9月23日籍贯河北省鹿泉市铜冶镇二、个人经历2007年9月~2012年7月河北大学，学士2012年9月~2015年7月河北医科大学研究生学院，硕士三、获奖情况2007-2008学年获三等奖学金2008-2009学年获二等奖学金2009-2010学年获三等奖学金2009-2010学年获国家励志奖学金四、承担或主研课题情况IgA肾病血清中IL-17、IL-23的水平及意义40