mir-221对正常乳腺和乳腺肿瘤干细胞调控的研究

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1、夺因許違據来大赛UniversityofScienceandTechnologyofChina博±学位论文戀-22论文题目miR1封正帝乳腺和乳腺邪痛干細舱调控巧研堯作者姓名赵志奉细淹^生物学学科专业导师姓抑*;合教授名二0—五年巧^完成时间夺固#g省若大s博±学位论文馨m瓜-221对正常乳膀和乳腺肿瘤干细胞调控的研究作者姓名:赵志举学科专业:细胞生物学导师姓名:柳素玲教授二一完成

2、时间;零五年四月UniversityfScienceandTechnolofChinaogyo’ADissertationforDoctorsDegree戀-221RoleofmiRinreula村nnormalggmammaryeithelialhierarchandpybr-eastcancerstemlikecells’NAu化orsame:ZhiuZhaojSecialit:CellbiolopygySu

3、pervisor:Prof.SulingLiuFinishedtime:April29化,中国科学技术大学学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文,是本人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。除己特别加W标注和致谢的地方外,论文中不包含任何他人已经发表或撰写过的研究成果一。与我同工作的同志对本研究所做的贡献均己在论文中作了明确的说明。-'作者签名:签字日期:wr1八中国科学技术大学学位论文授权使用声明一作为申请学位的条件之,学位论文著作权拥有者授权

4、中国科学技术大学拥;有学位论文的部分使用权,即学校有权按有关规定向国家有关部n或机构送交论文的复印件巧电子版,《,允许论文被查阅和借阁可W将学位论文编入中国学位论文全文数据库》等有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制一手段保存、汇编学位论文。本人提交的电子文档的内容和纸质论文的内容相致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。□公开□保密()__年作者签名:和朱坪导师签名:与私麟厶签宇日期.■i签字日期::W王T。、m目录一第部A1-

5、miR221对正常现腺和乳腺肿瘤干细胞调控的研究1中文摘要3Abstract4第一章绪论511孰腺干细胞5.U.1乳腺干细胞的研究方法71.2肿瘤干细胞812.1.乳腺癌的治巧现状821..2现腺抑瘤干细施101.2.3乳腺肿瘤干细胞的研究方法1224EMT11..与肿瘤干细胞3.1.25信号通路与肿瘤干细胞化1.2.6microRNA与肿瘤干细胞21.c脚A与肿瘤干细胞12.7In252.81.表

6、观调控蛋白与肿瘤干细胞26第二報料和方法302.1实验相关药品和试剂30230.2载体构建m-2.2.1i反221过表达载体构建31-2.2miRRNA.2221sh载体构建312.2.3ATXN1shRNA载体构建312.2.4巧光素酶基因报告载体构建322.3病毒包装和感染33I2.4细胞培养332PCR-3.5实时定量(QPCR)32.1RNA34.5提取2.5A.2RN反转录35

7、-PCR236.5.3Q2.6免疫组化和姐织切片免疫巧光%2正常乳腺细胞微球培养和消化.7372.8ALDEFLUOR分析和分选382.9细胞表面标记物的流式分析和分选392.10基因苍片392.11巧光素酶报告技术412.12小鼠成瘤实验41第H章结果分析与讨论42-31mi22.民1在乳腺干细胞中高表达423-22.2mi民1调节乳腺干细施的分化443m-22iR.31的表达量与现腺癌的恶性程度呈正相关48-3.

8、4miR221调控乳腺肿瘤干细胞503-.5miR221调控EMT过程巧36mR-221ATXN1.i调控乳腺干细胞和乳腺干细胞通过抑制%参考文献61第二部分74PIM2调控人巧胎干细胞的多能性75中文摘要77Abstract78一第章研究背景791.1胚胎干细胞792.2胚胎干细胞的调控79第二章材料和方法842.1实验相关药品和试剂842.2载体构建84si2.3eR

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