遗传学实验一_生物学_自然科学_专业资料

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1、《遗传学实验》20111621班和20111622班实验一植物细胞的有丝分裂染色体标木制片及观察一、实验冃的1•观察植物细胞有丝分裂过程屮染色体的形态和变化。2.学会植物根尖有丝分裂装片的制作方法和技巧。二、实验原理背景知识介绍:1882年，德国生物学家费莱明(WaltherFlemming)发现了冇丝分裂现彖；但从更详细的一些资料看，认识有丝分裂过程是人们在不断地对比和总结屮获得的。——1841年，波兰生物学家RobertRemak)发现一个母细胞可分裂为两个子细胞；1842年,瑞士植物学家内格里(KarlW

2、ilhelmvonnageli)观察到分裂期的染色体结构。——1848年，德国生物学家霍夫曼斯特(WilhelmHofmeister)发现了分裂期核膜消失现象。——1877-1882年，费莱明提出了分裂期染色体“纵向分裂”模式,并用“mitosis”表示整个细胞分裂的过程。1884年，波兰德国卅i物学家斯觉斯伯格(EduardStrasburger)用“prophase”、“metaphase”和“anaphase”表示分裂期中的前期、中期和后期。1894年,德国解剖学家伦德加德(HenrikLundegard

3、h)用"interphase”表示分裂间期。-至此，有丝分裂全过程就被认为划分为询期、中期、后期、末期和间期5个时期，有丝分裂全过程的描述得到了统一。有丝分裂的过程：间期：包括Gl、S、G2期。G1期，合成细胞住长必需的蛋口质、糖类和脂质等牛化物质；染色质去凝集，为DNA合成做准备，因此乂称DNA合成预备期或复制而期。有些细胞暂吋离开了细胞周期进入GO期，停止分裂；一旦得到信号指令便乂会返回细胞周期，分裂增殖。GO期细胞多发生于G1期，人体绝大多数细胞是处于GO期。像肝细胞，当它受到外部因素刺激后，如切割掉部分

4、肝，便可使细胞从GO期返回到细胞周期中。S期，DNA复制，组蛋白合成，复制后两份DNA分子在S期货或S期后不久，通过黏结蛋白(cohesion)相互黏合。G2期，RNA和蛋白质合成，特别是微管蛋口大量合成，为M期纺锤体装配提供原材料。同种细胞，细胞周期时间长短因生理活动、营养状况等差异而有所不同，不同种类细胞之间,细胞周期时间短的差别很大,主要是G1期不同,而S期、G2期和M期时间相对恒定，尤其是M期更为恒定，常仅维持0.5小时。•在蚕豆根尖细胞的有丝分裂周期中，G1期为5hr,S期为7.5hr,G2期为5hr

5、,间期共长17.5hr,而M期全长只有2hr。前期(prophase)当染色体呈可见的细线吋标志着细胞分裂开始，进入细胞分裂前期。•侮个染色体两条染色单体开始螺旋化、卷曲；•着丝粒尚未分裂，因而螺旋、卷曲的两条染色单体由同一个着丝粒联结；•核仁、核膜逐渐解体，前期结束时核仁消失。中期(metaphase)标志:核仁、核膜消失•染色单体进一步螺旋、收缩肓至呈最短、最粗的状态；•纺锤丝形成一个三维的结构，称为纺锤体(spindle)；•纺锤丝与染色体的着丝点附着，并牵引染色体，使其着丝粒均匀分成在垂直于两极的一个平

6、面上(赤道板或赤道面)染色体臂口由分布在赤道而的两侧。•染色体形态稳定，排列均匀，是研究染色体形态和数FI的最佳时期。后期(anaphase)后期就是从着丝粒分裂到染色单体到达两极的过程。•由于纺僦丝的牵引作用，着丝粒发生分裂；•每条染色体的两条染色单体，分别山纺锤丝拉向两极;•两极部具有相同的染色(单)体数。末期(telophase)染色体到达两极后：•核膜、核仁重建；•染色体解螺旋化，呈松散状态；•细胞质分裂，细胞板形成。植物根尖的分牛细胞的有丝分裂，侮天都有分裂高峰时间，此吋把根尖固定，经过染色和压片，再

7、置放在显微镜下观察，町以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。(a)Interphase(b)Prophase(f)Earlytelophase(e)Anaphase三、实验材料萤豆(Viciefaba2n=12)洋葱(Aillumcepa2n=16?大蒜玉米四、实验器具和药品1•用具：显微镜、载玻片，盖玻片，指管，试剂瓶，滴瓶，银了，解剖针，滤纸、铅笔、橡皮等。2.药品：无水酒精，95%酒精、80%酒精、70%酒精，冰醋酸，1N盐酸、1%醋酸洋红、铁矶（硫酸亚铁）、对■二氯苯或秋水仙素、aT臭蔡、8-疑基

8、味咻。3.试剂配制卡诺固定液的配制：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。染色液的配制：1%的醋酸洋红染色液：将100ml45%的乙酸加热煮沸，移玄•火苗，徐徐加入l-2g洋红,溶解后再煮沸l-2min,冷却加入2%的恢矶水溶液5-10滴，或在煮沸醋酸洋红染色液中悬置数枚锈铁钉（防止溶液溢出），以增强染色性能。配制的染色液过滤后贮存于棕色试剂瓶中备用。0.01%-0.2%秋水仙碱