血小板抗原抗体检测及其输血科应用

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1、血小板抗原抗体检测及临床应用吉林芬瑞生物制品销售有限公司李一夫010203目录/contents血小板抗原血小板抗体与疾病血小板抗体检测的临床意义和临床应用血小板简介血小板：D:2-5umV:红细胞*1/5功能：促进止血和加速凝血正常范围：100-300×109/L骨髓干细胞胞质块脱落来源：多功能祖细胞巨核祖细胞幼巨核细胞巨核细胞血小板血小板形态静息状态活化状态血小板抗原血小板“非特异性”抗原血小板“特异性”抗原HPA抗原HLA-Ⅰ类抗原ABH抗原血小板具有HLA-Ⅰ类抗原（HLA-A、HLA-B抗原和少量HLA-C抗原），无HLA-Ⅱ类抗原。故输注血小板要比器官移

2、植所需配型简单。血小板个体间HLA-Ⅰ类抗原位点数差别不大。每个血小板上至少有20000个HLA抗原位点。HLA抗原部分为血小板的固有蛋白，另一部分从血浆中吸附。血小板上的ABH抗原个体之间表达不同，约5%的非O型个体为A抗原或B抗原的高表达者。故血小板输血应同型输注；抗体检测应采用O型血小板，以排除ABO系统抗体的干扰。◆GPIb、GPIIb/IIIa、GPIa/Iia、CD109等也携带少量ABH抗原ABH抗原主要存在于血小板膜的GP分子上，也少量存在于血管内皮细胞、结缔组织细胞和平滑肌细胞。1990年国际输血协会血小板免疫学工作组提出了HPA命名，以发现的时间

3、顺序排列：HPA-1、HPA-2、HPA-3等系统。HPA抗原已确定了33个HPA，其中12个抗原为双等位基因表达（HPA-1,-2,-3,-4，-5和-15）。其中高频率抗原命名a，低频率抗原命名b。其余21个抗原为低频率抗原，尚未发现对偶抗原，命名为bw。单核苷酸多态性（SNP）:33个HPA中均已搞清楚基因背景，其中32个HPA的多态性型是由一个氨基酸置换所致，而这又是由编码血小板膜糖蛋白（GP）基因的一个核苷酸的不同所致。HPA-14bw不具有单核苷酸多态性。其核苷酸置换发生在AAG1929-31。HPA抗原HPA抗原HPA抗原血小板抗原定型血清学定型即用已

4、知特异性抗体检测血小板血型抗原缺点：特异性抗体来源困难---人血清中血小板抗体通常为多特异性---单克隆抗体匮乏，目前国际上仅有HPA-1a单抗，无其它HPA单抗。基因定型限制性片段长度多态性分析（RFLP）序列特异性寡核苷酸聚合酶链反应(PCR-SSO)序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)用途：（1）健康人群HPA基因分型，建立已知HPA基因型的血小板献血员库。（2）检测受者HPA基因型，以便从血小板献血员库中寻找与其HPA基因型相匹配的血小板供者。（3）检测患者HPA基因型，辅助临床胎儿/新生儿免疫性血小板减少症、输血后紫癜及血小板输注无效症等疾病的病因

5、诊断。（4）对特定区域或种族人群HPA基因分型，可为人类遗传学研究提供相关资料和证据。1aa2aa3ab4aa5aa6aa7aa8aa9aa10aa11aa12aa13aa14aa15ab16aa17aa血小板抗原定型血小板抗体的产生方式以上途径产生的血小板同种抗体与血小板上的相应抗原结合，导致血小板被内皮网状系统清除。怀孕移植（骨髓、器官）药物、自身免疫输血小板、红细胞（尤其是没有滤白的红细胞）血小板抗体与部分相关疾病抗体分类疾病HLA/HPA抗体其它抗体同种抗体格兰茨曼血小板功能不全病抗GPⅡb/Ⅲa抗体同种异体抗体新生儿同种异体免疫性血小板减少症HPA1a(7

6、8%),HPA5b(19%)HPA-2,3,4(3%),HPA-15,HPA-9bw,Anti-CD36血小板输注无效症HLA-I抗体50~80%,HPA17~25%(日本人为HPA-2b),HPA-15,anti-CD36极少数为ABO抗体血小板输血后紫癜HPA-1a,HPA-1b,HPA-2b,HPA-3a,HPA-3b,HPA-15,anti-CD36少数为抗GPIa/IIa抗体被动同种异体免疫性血小板减少症HPA-1a,HPA-5b移植相关同种异体免疫性血小板减少症HPA-1a,HPA-3,HPA-5b自身抗体自发性血小板减少症多数位于GPⅡb/ⅢaGPIb

7、/IX/V，少数位于GPIV/V和GPIa/IIa继发于母体自发性血小板减少症同上药物依赖性抗体奎宁/奎尼丁抗体所致疾病抗原位于GPⅡb/Ⅲa和GPIb/IX肝素抗体所致疾病抗原表位是PF4胎盘屏障YYYY母体同种异体抗体通过胎盘母体同种异体免疫胎儿血小板减少举例——NAITNAIT胎母同种异体免疫血小板减少症（fetomaternalalloimmunethrombocytopenia，FMAIT）致病机理与新生儿溶血病（HDN）相似，前者是由胎儿父母血小板抗原不合引起的血小板减少症，后者为红细胞抗原不合引起的溶血性疾病。由于胎儿遗传自父亲的血小板抗原刺激母体