课题3　分解纤维素的微生物的分离 (2).pptx

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1、课题3.分解纤维素的微生物的分离人教版高中生物选修一专题二【基础知识】1.纤维素酶纤维素酶是一种复合酶C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶过程（原理）：纤维素C1酶、CX酶纤维二糖葡萄糖葡萄糖苷酶纤维素酶分解滤纸的实验：试管1试管2滤纸滤纸PH4.8缓冲液PH4.8缓冲液纤维素酶纤维素酶现象现象++11mL10mL+-滤纸条不分解滤纸条分解，溶液浑浊【基础知识】2.纤维素分解菌的筛选方法：刚果红染色法原理：刚果红可与纤维素形成红色复合物，而其分解产物不能。当纤维素分解菌菌落周围的纤维素被分解后，不能再形成红色复合物，从而在菌落周围形成透明圈土壤取样

2、选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基挑选产生透明圈的菌落【实验设计】实验流程1在哪儿取样？2若无适宜的取样环境又该如何取样？选择培养的目的必须的要有吗？培养基配方分析其有选择的作用吗？有如何证明？鉴别培养基有选择作用吗？常用的刚果红染色法是？及其各自的优缺点？【实验设计】实验流程你准备在什么样的地方取样？纤维素含量丰富的区域。如果没有纤维素含量非常丰富的区域，也可以将滤纸埋在土壤中，一段时间后从滤纸上分离微生物，为什么可以这样做？滤纸中含有大量纤维素，将滤纸埋在土壤中是人工创造了适合纤维素分解菌生活的环境。关于滤纸埋放的深

3、度你有什么建议？约10cm的腐殖土壤中。【实验设计】实验流程选择培养的目的是什么？增加纤维素分解菌的浓度。选择培养是必须的吗？不是，视样品中纤维素分解菌的浓度而定，必要时可以重复选择培养。这个培养基对微生物是否有选择作用？如何选择？有，以纤维素为最主要的碳源提供纤维素分解菌适宜生长的环境，不能分解纤维素的微生物生长相对不易。可以通过设置对照来说明培养基起到了选择作用吗？用不具备选择作用的普通（完全）培养基培养相同的对象。【实验设计】实验流程这里用的鉴别纤维素分解菌的培养基配方有选择作用吗？为什么？没有，因为土豆汁里还含有大量的淀粉可做CM

4、C-Na以外的碳源你能比较一下刚果红的两种染色方法的优缺点吗?方法1方法2操作缺点优点先培养，后染色配制培养基时加入刚果红，再接种培养操作复杂，菌落易发生混杂操作简便，菌落不发生混杂可以降解色素的微生物等对鉴别结果产生干扰鉴别结果较为准确组分含量提供的主要营养物质CMCNa5～10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、特殊营养成分KH2PO40.25g无机盐琼脂15g凝固剂土豆汁100mL碳源上述物质溶解后，用蒸馏水定容至1000mL鉴别培养基【课题延伸】本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，这只是分离纯化的第一步。如何进一步确定得到的微生物

5、是纤维素分解菌呢？通过进一步发酵培养检测其能否产生纤维素酶。方法：固体发酵或液体发酵如何测定发酵产物里是否含有纤维素酶以及酶活性的高低呢？通过对滤纸等纤维素的分解产物进行定量的测定。如果筛选出了纤维素分解菌，但是纤维素酶产量很低，怎么办？更换取样环境或对象；对已有的纤维素分解菌进行诱变。通过本专题的学习，你学会分离培养微生物的一般方法了吗？取样选择培养梯度稀释涂布平板挑选菌落鉴别发酵培养检测与反馈1．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是()A．分解尿素的细菌B．硝化细菌C．分解纤维素的细菌D．乳酸菌2．关于选择培养叙述正确的是()A．

6、可以增加纤维素分解菌的浓度B．可以减少纤维素分解菌的浓度C．所用培养基是固体培养基D．所用培养基是平板培养基再见！