课题3　分解纤维素的微生物的分离.pptx

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1、课题3分解纤维素的微生物的分离纤维素：棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物纤维素能被土壤中微生物分解利用，这是因为他们能够产生纤维素酶一、基础知识1.纤维素纤维素是以一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质2.纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶（一）纤维素和纤维素酶纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素【思考】实验分析：P27对照组实验组实验说明：纤维素酶可以分解纤维素（二）纤维素分解菌的筛选1.鉴定方法：刚果红染色法该方法通过颜

2、色反应直接筛选2.原理：刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成______________,当纤维素被____________分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的___________,可以通过__________________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶透明圈是否产生透明圈空白的刚果红培养基纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明圈从功能上看，这是一种什么培养基？鉴别培养基二、实验设计（一）实验流程土壤取样选择培养（可省略）梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的

3、菌落1、土壤取样地点：富含纤维素的环境中2、选择培养目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能从样品中分离所需要的微生物制备选择培养基操作步骤原因：生物与环境相互依存，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对较高，获得目的微生物的几率高于普通环境（1）纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是_______________________【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几问题：液体没有添加凝固剂（琼脂）（2）该培养基对微生物_____（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选

4、择机制是____________________________________________________________________________具有以纤维素粉为主要碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；（3）你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可以设计一个牛肉膏蛋白胨培养基做对照试验或者将该培养基的纤维素改为葡萄糖。“选择培养”实验操作过程请你推测纤维素分解菌的异化类型是需氧型还是厌氧型？提示由选择培养操作中“将锥形瓶置于摇床上”可推

5、测纤维素分解菌的异化类型为需氧型。有摇床上振荡培养的目的是：增加溶氧量；使微生物与营养液充分接触。在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？3、梯度稀释4、将样品涂布到的培养基上（刚果红培养基）挑选产生透明圈的菌落，一般即为为分解纤维素的菌落。方法一：先，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在时就加入刚果红。培养微生物倒平板鉴别纤维素分解菌两种方法的比较哪种方法会导致菌落混杂？

6、方法一方法二出现假阳性的原因有哪些？1.产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈。2.有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。染色法优点缺点先培养微生物，再加入刚果红倒平板时就加入刚果红颜色反应基本是纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红可能会使菌落之间发生混杂操作简便，不存在菌落混杂问题1.产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈。2.有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。与纤维素分解菌不易区分两种方法的比较有可能刚果红染液把一个菌落的菌冲到另一个菌落里,这样的话菌落就可能不是单菌种了,挑菌摇菌的时候有可能得到混合菌15为了确

7、定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行_____________实验，纤维素酶的发酵方法有______发酵和______发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的________含量进行定量测定。发酵产纤维素酶液体固体葡萄糖三、课题延伸分解纤维素的微生物的分离纤维素酶种类、作用、催化活力刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌课堂总结思考：本实验的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？本实验流程与课题2的流程的区别如

8、下。课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本课题通过选择培养，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。比较项目分解尿素的细菌纤维素分解菌选择培养基原理培养基类型目的鉴定培养基原理现象方法菌液涂布在只有尿素为氮源的选择培养基上将细菌涂布在以纤维素粉为碳源的选择培养基上固体培养基液