转基因大豆A5547—127品系成分LAMP快速检测方法的建立-论文.pdf

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1、食品研究与并发2013年9月检测分析FoodResearchAndDevelopment第34卷第17期69DOI：10．3969／j．issn．1005—6521．2013．17．018转基因大豆A5547—127品系成分LAMP快速检测方法的建立蔡颖，周广彪‘，刘津，高东微，凌莉，刘静字，易敏英，吴少云，李志勇，’(1．汕头出入境检验检疫局技术中心，广东汕头，515031；2．广东检验检疫技术中心，广东广州510623；3．华南理工大学生物科学与工程学院，广东广州510641)摘要：根据转基因大豆A5547—1

2、27品系外源插入片段与植物基因组序列设计品系特异性引物，筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化，最终建立了转基因大豆A5547—127品系成分特异性LAMP的快速检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度和稳定性测试。结果表明：该方法能快速、特异性检测出转基因大豆A5547—127品系成分，定性检测低限为0．5％，稳定性和特异性均能达到100％。关键词：环介导等温扩增；品系特异性；转基因大-~,-A5547—127品系；检测DevelopmentofLoop-mediatedIsothermalAmplificat

3、ion(LAMP)MethodforRapidDetectionofTransgenicSoybeanA5547-127ComponentCAIYing，ZHOUGuang-biao，LIUJin，GAODong-wei2,LINGLi，LIUJing-yu，YIMin-ying，WUShao-yun，LIZhi-yong'(1．InspectionandQuarantineTechnologyCenter，ShantouCIQ，Shantou515031，Guangdong，China；2．GuangdongIn

4、spectionandQuarantineTechnologyCenter，Guangzhou510623，Guangdong，China；3．CollegeofLightIndustryandFoodSciences，SouthChinaUniversityofTechnology，Guangzhou510641，Guangdong，China)Abstract：Accordingtoexogenousinsertsequencesconnectionwiththeplantgenomesequencesoftr

5、ansgenicsoybeanA5547-127，severaleventspecificprimersetsweredesigned．Theoptimumwasselectedfromthesecandidates，thenthereactionsystemandreactionconditionswereoptimized．Finallyaloop-mediatedisothermalamplification(LAMP)methodforrapidlydetectingtransgenicsoybeanA55

6、47—127componentwasdeveloped．Theperformances，includingspecificity，sensitivityandstabilityweretestedwiththismethod．TheresultsshowedthatthemethodcanspecificallydetecttransgenicsoybeanA5547—127componentrapidly，withlimitofdetection(LOD)aslowas0．5％，stabilityandspeci

7、ficitybothof100％．Keywords：loop-mediatedisothermalamplification；eventspecific；transgenicsoybeanA5547—127；detec-tion转基因大豆A5547—127品系是美国拜尔公司研发的抗草胺磷除草剂的转基因大豆品种，1998年已获基金项目：出入境检验检疫行业标准制定计划项目：出口食品中转美国官方批准使用，并相继在墨西哥、加拿大、日本、阿基因成分环介导等温扩增(IAMP)检测方法(2011B286k)；广东省科根廷、巴西等

8、国家获准进行商业化种植或作为食品原技计划项目(2009B0627)：食品转基因成分快速检验能力建设(粤科料进口Ilj。该品系在我国未批准许可进口及使用，为非函财字[20091627号)；广东检验检疫局科技计划项目：主要转基因食品法转基因大豆品系。(20O9GDK45)我国每年从国外进口大量的大豆，2011年进口量作者简介：蔡颖(1974一)，男(汉)，副主任