肺结核患者疱疹病毒感染的检测及意义探讨

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1、肺结核患者疱疹病毒感染的检测及意义探讨湖南省邵阳市中心医院421000摘要：目的探讨肺结核患者疱疹病毒感染的检测及临床意义。方法选取我院收治45例肺结核患者作为观察组，同时选取38例正常健康人作为对照组，对两组患者均采用酶联免疫法检测血清中人巨细胞病毒（HCMV）及单纯孢疹病毒（HSVI型、II型）感染的IgM抗体，采用化学发光法检测血清中EB病毒VCAIgM抗体，再釆用PCR-southern对两组患者外周血单个核细胞中EBVDNA表达进行检测。结果观察组患者血清HCMV-IgM及HSV-IgM阳性率分别为20.0%，15.6%,对照组分别为5.3%,0%;两组比较差异明显P<0

2、.05;观察组VCA-IgM阳性率为6.7%，对照组未检出VCA-IgM阳性,两组比较无明显差异，P>0.05；观察组EBVDNA阳性率为33.3%,对照组为7.9%,两组比较差异具有统计学意义，P<0.01o结论肺结核患者存在较高的HCMV、HSV及EBV活动性感染，疱疹病毒感染与肺结核患者病情有一定联系。关键词：肺结核；疱疹病毒感染；检测结核病对人类健康产生严重危害，结核病是一种慢性传染疾病。近年来，结核病的发病率明显升高。有研究表明，肺结核患者一般免疫功能较低，可能存在疱疹病毒活动性感染，加重了结核病患者病情［1］。疱疹病毒一般表现为潜伏感染，一旦患者免疫功能下降即可引

3、发激活感染。为更好了解疱疹病毒对结核病病情的影响，木研究对我院收治的45例结核病患者的血清进行检测，重点检测HCMV-IgM及HSV-IgM（I型、II型）和EB病毒VCA-IgM及外周血单个核细胞中EBV-DNA。现报道如下。1资料与方法1.1一般资料选取我院呼吸科门诊于2014年7月-2015年4月间收治的肺结核患者45例，其中男25例，女20例，年龄18-79岁，平均年龄(47.4±2.1)岁。其中继发性肺结核38例，原发性肺结核7例。向吋选取正常人38例，其中男27例，女11例，年龄17-78岁，平均(48.1±1.9)岁。两组患者在年龄、性别等方面比

4、较无明显差异，P>；0.05,具有临床可比性。1.2方法1.2.1IgM抗体检测分别采集观察组和对照组外周血，将血清分离，采用北京災尔生物工程有限公司生产的酶联免疫法试剂盒对HCMV抗体(IgM)、HSVI型、II型抗体(IgM)进行检测，采用深圳市新产业生物工程有限公司生产的化学发光法试剂盒检测血清中EB病毒VCAIgM抗体，过程严格按照说明书进行，对阳性和可疑阳性标本进行重复检验。其中HSV的I型、II型IgM抗体只要有一种结果检测为阳性，即HSV-IgM判读为阳性。1.2.2EBV-DNA的检测分别采集观察组和对照组外周静脉血，行EDTA抗凝，将PBMC分离，加入消化液中，56

5、°C水浴，lh后将其煮沸，持续15min，12000r/min离心lOmin,提取上清液。采用EBVBamHI-W区特异性引物和探针，检测提取细胞DNA，上游引物序列选为5’-CCAGACAGCAGCCAATTGTC-3,下游引物序列选为5’-GGTAGAAGACCCCCTCTTAC-3’,PCR反应体积为30μl,引物含量20pmol/L,Tag酶l.OU，dNTP83μmol/L。设立阴性对照和阳性对照，模板DNA5μl,阴性对照组采用去离子水，94°C预变性，持续5min,再行以下循环30次：94°C持续lmin,60°C持续2

6、min,72°C持续3min,最后72°C持续5min,最后取10μlPCT以20g/L琼脂糖凝胶电泳，吋间为45min,再给予漠化乙锭染色，于紫外线下进行观察。1.3观察指标观察两组患者血清中HCMV及HSV感染的IgM及EB病毒VCA-IgM和外周血单个核细胞中EBVDNA表达，并作临床对比分析。1.4统计学方法所有数据均采用SPSS13.0统计学软件处理，计数和计量资料分别采用X2检验和t检验，检验水准为σ=0.05。2结果观察组HCMV-IgM阳性率为20.0%,对照组为5.3%，两组比较差异明显，P<0.05；观察组HSV-IgM阳性率为15.6%,对照

7、组为0%，两组比较冇显著差异，P<0.05；观察组VCA-IgM阳性率为6.7%,对照组未检出VCA-IgM阳性，两组比较无明显差异，P>；0.05；观察组EBVDNA阳性率为33.3%，对照组为7.9%,两组比较差异明显，P<0.01o详见表1。3讨论结核病是由结核杆菌感染导致，人体各个器官均可累及，但主要侵入器官是肺部，肺部感染后，可继发脑膜、颈淋巴、肠、腹膜等部位感染。此病主要传播方式为呼吸道传播。结核病发病吋