蓝舌病病毒15型vp2 ns3蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定

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1、密级：论文编号：中国农业科学院学位论文蓝舌病病毒15型VP2、NS3蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定PreparationoftheMonoclonalAntibodiesagainstVP2andNS3ProteinofBluetongueVirusSerotype15andIdentificationofB—cellEpitopes硕士研究生：张沁指导教师：吴东来研究员申请学位类别：农学硕士专业：预防兽医学研究方向：兽医微生物及其分子生物学培养单位：哈尔滨兽医研究所中国农业科学院研究生院2015年5月万方数据Secrecy：No．一ChineseAcademyofAgricultu

2、ralSciencesDissertationPreparationoftheMonoclonalAntibodiesagainstVP2andNS3ProteinofBluetongueVirusSerotype15andIdentificationofB—cellEpitopesM．S．Candidate·ZhangQinSupervisor：Prof．WuDong—LaiDegree：PreventiveVeterinaryMedicineSpecialty：VeterinaryMicrobiologyandMolecularBiologyMay2015万方数据独创性声明本人声明所里交

3、的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：涨沁时间：琊年6月岁日关于论文使用授权的声明本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科学院有权保留送交论文鹪复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制罨段保存、‘汇编学位语文。同意中国农业科学院o”’4可以用不同方式在不同媒体上发表、

4、传播学位论文的全部或部分内容。研究生签名：弓长沁时间：弘万年易月’厂日僦名：融扛导师签名：巩了7卜时间：z纠绛石月乡曰万方数据中国农业科学院硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表论文题目蓝舌病病毒15型VP2、NS3蛋白单克隆抗体的制备及其抗原表位的鉴定兽医微生物及论文作者张沁专业预防兽医学研究方向分子生物学指导教师吴东来培养单位(研究所)哈尔滨兽医研究所姓名职称硕(博)单位专业签名导师评翁长江研究员硕导口中国农业科学院哈尔预防兽医学＼＼．博导囹滨兽医研究所阅硕导口＼＼人赵启祖研究员博导团中国兽医药品监察所预防兽医学答笙李一经教授硕导口东北农业大学预防兽医学．害／陪博导团席硕导口师东方教授博导

5、囹东北农业大学预防兽医学7畅签硕导口’嘞湃答华育平教授博导团，，。东北林业大学预防兽医学?。●洌7硕导口一。军事医学科学院军事辩涂长春研究员预防兽医学委孔宪刚研究员博导囤滨兽医旃究所预防兽医学施t1博导团兽医研究所硕导口中国农业科学院哈尔员步志高研究员硕导口中国农业科擎院啥尔预防兽医学弓乏高博导团滨兽医研究所硕导口中国农业科学院哈尔刘长明研究员博导团滨兽医研究所预防兽医学叠’绷。?1J会议记录(秘书)张敏敏论文答辩时间地点2015年．5月29FI哈尔滨兽医研究所主楼317学术报告厅万方数据摘要蓝舌病(Bluetonguedisease，BT)是由蓝舌病病毒(Bluetonguevirus，B

6、TV)引起的，由传播媒介库蠓在动物间广泛传播的急性、烈性动物传染病。该病主要感染反刍动物(山羊、绵羊、牛、鹿、骆驼等)，其中以绵羊最易感，病畜被感染后主要表现出高热、口腔黏膜发绀充血、面部水肿等症状，部分血清型可引起较高的死亡率。目前，BTV己多达27个血清型，各血清型之间无交叉保护作用，所以制备出针对某一特定血清型的BTV相关的诊断试剂是防治该病的最有效措施。BTV属于呼肠孤病毒科环状病毒属的成员，其基因组由10个分节段的双股正链RNA组成，分别编码7种结构蛋白(VPl～VP7)和4种非结构蛋I刍(NSl、NS2、NS3／NS3a及NS4)。其中，VP2能刺激产生型特异性中和抗体，Ns3／

7、Ns3a参与病毒的释放。根据Genbank中登陆的BTVl5L2基因序列(CAE51102．1)及S10基因序列(AGJ83560．1)分别设计一对特异性引物，以实验室构建的分别含有BTVl5的VP2编码序列以及NS3编码序列的重组质粒pZERO—B15．VP2和PEASY-B15．NS3为模板扩增VP2与NS3蛋白的编码基因。并将两者酶切处理后克隆于原核表达载体pMAL．C4X，构建重组表达质粒pC4X．B