课题3　分解纤维素的微生物的分离.pptx

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1、课题3分解纤维素的微生物的分离专题2微生物的培养与应用植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。植物每年产生的纤维素超过70亿吨课题背景麻棉花作用：纤维素在造纸业中大量使用，是重要的造纸原料。纤维素可以制成甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、微晶纤维素等衍生物。食物中的纤维素（即膳食纤维）对人体的健康也有着重要的作用。纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。课题背景纤维素（cellulose）组成：纤维素是由葡萄糖组成的大分子多糖。纤维素结构式淀粉结构式植物纤维素焚烧秸秆

2、草食性动物肠胃中的共生微生物。其原理是产生纤维素酶而分解纤维素，而人没有分解纤维素的能力。草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？纤维素是一种重要的碳水化合物，土壤中的某些微生物能将其分解利用。纤维素分解细菌纤维素纤维二糖C1酶、Cx酶2、纤维素酶纤维素酶是一种复合酶组成纤维素酶包括三种组成：C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖葡萄糖苷酶作用：C1酶、Cx酶将纤维素分解为纤维二糖；纤维二糖再由葡萄糖苷酶分解成葡萄糖。葡萄糖苷酶C1酶Cx酶C1酶葡萄糖纤维素酶活性的测定实验：图2-12A：未加入纤维素酶B：加

3、入了纤维素酶滤纸崩溃法加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液：A：11mLB：10mL，再加入1mL纤维素酶（70~80U/mL）将二支试管固定在50mL的锥形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h，观察结果。在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；尽管醋酸－醋酸钠缓冲液用量不同，但都能维持相同的pH。〖思考1〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？我们已经学习了怎样从土壤中分离分解尿素的细菌，你能自己动手设计从土壤中分离分解纤维素微生物的方法吗？想

4、一想从土壤中分离分解维生素的微生物。重点与难点（二）纤维素分解菌的筛选1、刚果红染色法在含有纤维素的培养基中加入刚果红，在纤维素分解菌周围会产生以菌落为中心透明圈。纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过____________

5、__来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈二、实验设计将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上土壤取样选择培养梯度稀释分离分解纤维素微生物实验流程示意图挑选产生透明圈的菌落具体操作步骤：1、土样采集方法与课题2类似。土样采集要在富含纤维素的环境中进行，如果找不到适合的环境，可以将滤纸埋在土壤中，过一个月左右也会有能分解纤维素的微生物生长。思考为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？答：由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高。思考将滤

6、纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。2、选择培养称取土样20g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的摇瓶中。30℃震荡培养1-2天，至培养基变浑浊。进行梯度稀释和涂布平板。纤维素粉5.0gNaNO31.0gKH2PO40.9gNa2HPO4·7H2O1.2gMgSO4·7H200.5gKCl0.5g水解酪素0.5g酵母膏0.5g蒸馏水1000mL纤维素分解菌的选择

7、培养基配方1、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是__________________。【资料二】选择培养阅读资料二“选择培养基”，回答以下几个问题：液体没有添加琼脂成分2、该培养基对微生物______（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是_______________________________________________________。以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖具有想一想为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？答：在选择培养条

8、件下，使那些能够适应条件的微生物得到迅速繁殖，而不适应这种的微生物被抑制。若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将__________改为_________。你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？葡萄糖纤维素粉鉴别纤维素分解菌的培养基配方CMC-Na5-10gKH2PO40.25g琼脂15g土豆汁100mL酵母膏0.5g蒸馏水1000mL方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应。优点：