课题3　分解纤维素的微生物的分离.pptx

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1、专题二微生物的培养与应用课题3分解纤维素的微生物的分离课题背景棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物，其纤维素的质量分数可达92%～95%，亚麻、木材、作物秸秆等也富含纤维素。许多商品纤维素都是由天然纤维素制得的。用分解纤维素的微生物处理后，纤维素可分解成糖。它不仅可以供给人们能量，还可以用于酿酒、酿醋等食品加工业，成为葡萄糖的替代品。在土壤中有许多能利用和分解纤维素来作为能源的微生物，因为它们含有纤维素酶。课题目标1.能简述纤维素酶的种类及作用。2.掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物操作技术，了解这类微生物的应用。:纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、

2、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。葡萄糖苷酶1．纤维素:含________三种元素，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是________，人体内没有________，所以人体不能直接以纤维素为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成________释放到无机环境。栏目链接一、基础知识（一）纤维素与纤维素酶C、H、O葡萄糖纤维素酶葡萄糖2.纤维素酶纤维素C1酶Cx酶纤维二糖葡萄糖①取二支20mL的试管3、实验：纤维素酶分解纤维素的实验②各加入一张滤纸条③各加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸－醋酸钠缓冲液1

3、1ml和10ml甲乙④在乙试管中加入1mL纤维素酶⑤两支试管固定在锥形瓶中，放在140r/min的摇床上振荡1h⑥结果：乙试管的滤纸条消失讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？滤纸崩溃法（二）纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接对微生物进行筛选。刚果红染色法颜色阅读课本课本28页相关部分，回答下列问题：2、筛选原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通

4、过___________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈【例题】植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列相关问题：(1)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分形成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将______________分解成______________。(2)在含纤维素的培养基中加入刚果红(CR)染料时，CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。纤维二糖葡萄糖红透明圈土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培

5、养基上挑选产生透明圈的菌落（操作流程）二、实验设计〖思考1〗本实验流程与尿素分解菌的分离实验流程有哪些异同？课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在选择培养基上；本课题通过选择培养使细菌增殖后，再涂布在鉴别培养基上。其它操作基本相同。操作步骤【土壤取样】采集土样时，应选择富含纤维素的环境。将滤纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。30天后从腐烂的滤纸上筛选纤维素分解菌。思考？2、为什么要在富含纤维素的环境中找纤维素分解菌？在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高3、将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸

6、埋于深约10cm的腐殖土壤中。1.目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物2.制备选择培养基a.旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？b.这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，是如何进行选择的？c.你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用。液体培养基，配方中无凝固剂琼脂。有选择作用，碳源是纤维素，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。选择培养纤维素分解菌的选择培养基纤维素粉5gNaNO31gNa2HPO4·7H2O0.5gKH2PO40.9gMgSO4·7H2O0.5gKCl0.5g酵母膏0.5g水解酪素0

7、.5g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml分析选择培养基配方，回答问题。或应控制的变量是将__________改为_________。纤维素粉葡萄糖3、具体操作：将土样加入装有30ml选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养1～2天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用〖旁栏思考4〗为什么选择培养能够“浓缩”