课题3　分解纤维素的微生物的分离.pptx

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1、分解纤维素的细菌日喀则市二高谢红民课题目标:1、简述纤维素酶的种类及作用2、掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法3、讨论这类微生物的应用价值一、纤维素和纤维素酶阅读教材P27课题背景回答下列问题1、说出纤维素的化学组成和分布2、人、兔、牛、蘑菇谁能利用纤维素？为什么？3、纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过70亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？4、纤维素酶的组成如何？有什么作用？怎样验证明它的作用？1U表示的含义是什么？5、研究分解纤维素的微生物有什么意义

2、（应用价值）？1、说出纤维素的化学组成和分布1）纤维素的化学组成纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。（2）纤维素的分布植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。2、人、兔、牛、蘑菇谁能利用纤维素？为什么？免、牛、蘑菇能利用纤维素。因为在草食性动物的消化道内共生有分解纤维素的微生物，这些微生物产生的纤维素酶分解纤维素；而人的消化道内没有这些微生物；蘑菇自身产生纤维素酶分解纤维素。3、纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植

3、物每年产生的纤维素超过70亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，这是因为它们能够产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素4、纤维素酶的组成如何？有什么作用？怎样验证它的作用？1U表示的含义是什么？（2）纤维素酶的作用（1）纤维素酶的组成①取二支20mL的试管②各加入一张滤纸条③各加入pH4.8，物质量为0.1mol/L的醋酸－醋酸钠缓冲液11ml和10ml甲乙④在

4、乙试管中加入1mL纤维素酶⑤两支试管固定在锥形瓶中，放在140r/min的摇床上振荡1h⑥结果：乙试管的滤纸条消失讨论：乙试管的滤纸条为什么会消失？甲试管的作用是什么？（3）纤维素酶作用的验证实验在一支试管中添加纤维素酶，另一支试管不添加纤维素酶；但需加入等量的缓冲液，不能加入蒸馏水，否则会影响溶液的pH。〖思考〗实验分析：P27的小实验是如何构成对照的？滤纸崩溃法1、筛选纤维素分解菌的方法是______________。该方法可以通过________反应直接筛选。刚果红染色法颜色〖思考〗如何筛选纤维

5、素分解菌？依据什么原理？二、纤维素分解菌的筛选2、其原理是：刚果红可以与纤维素形成____________，当纤维素被_________分解后，红色复合物无法形成，出现以_____________为中心的________，我们可以通过____________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶纤维素分解菌透明圈是否产生透明圈方法一：先，再加入刚果红进行颜色反应。方法二：在时就加入刚果红。培养微生物倒平板刚果红染色法这两种方法各有哪些优点与不足？染色法优点缺点方法一方法二颜色反应基本上是纤维素分解菌的

6、作用操作繁琐刚果红会使菌落之间发生混杂操作简便不存在菌落混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现模糊的透明圈；2.有些微生物能降解色素，长时间培养过程会降解刚果红形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。方法一中NaCl溶液的作用？思考：漂洗作用，洗去与纤维素结合不牢的刚果红，以免出现的透明圈不够清晰。可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌练一练：1、下列关于纤维素酶的说法，错误的是A、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶

7、可用于去掉植物的细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A、刚果红能与纤维素形成红色复合物B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D、若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌土壤取样选择培养梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落三、实验设计①分布环境1、土壤取样：富含纤维素的环境中操作步骤生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土

8、壤中获得目的微生物的几率要高于普通环境。②原因（P28旁思：为什么在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？）③实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。④讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约10cm左右的土壤中。2、选择培养增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分