课题3　分解纤维素的微生物的分离.pptx

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1、课题3分解纤维素的微生物的分离专题2微生物的培养与应用植物果实在收获以后，大量的秸秆、叶子剩余下来，不仅污染环境，而且造成了大量的浪费。焚烧秸秆秸秆导入新课植物的根、茎、叶等器官中都含有大量的纤维素，麻、棉花、麦秆、稻草、甘蔗渣等，都是纤维素的丰富来源。一般木材中，纤维素占40～50%。麻棉花纤维素是一种重要的碳水化合物，土壤中的某些微生物能将其分解利用。纤维素分解细菌这些微生物之所以能够将纤维素分解利用，是因为他们能够产生纤维素酶。为了能更好的应用这些微生物造福人类，我们首先要将他们从土壤环境中种类众多的微生物中分离出来。1.

2、纤维素纤维素是以一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是地球上含量最丰富的多糖类物质。2.纤维素酶纤维素酶是一种复合酶，一般认为至少包括三组分，即C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶（一）纤维素和纤维素酶纤维二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纤维素一、基础知识【思考】实验分析：对照组实验组实验说明：纤维素酶可以分解纤维素（二）纤维素分解菌的筛选1.方法：刚果红染色法该方法通过颜色反应直接筛选2.原理：刚果红可以与纤维素形成______________,当纤维素被____________分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心

3、的___________,可以通过_______________________来筛选纤维素分解菌。红色复合物纤维素酶透明圈是否产生透明圈空白的刚果红培养基纤维素分解菌在刚果红培养基上形成的透明带从功能上看，这是一种什么培养基？鉴别培养基二、实验设计将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上土壤取样选择培养梯度稀释分离分解纤维素微生物实验流程示意图挑选产生透明圈的菌落具体操作步骤：1、土样采集：阅读【资料一】，思考以下问题（1）为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？答：由于生物与环境的相互依存关系，在富含纤维素的环境中，纤维

4、素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。（2）将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对聚集，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境一般应将纸埋于深约10cm的腐殖土壤中。121、纤维素分解菌选择培养基属于______（固体、液体）培养基，原因是__________2、选择培养：阅读【资料二】液体没有添加琼脂2、该培养基对微生物_____（具有，不具有）选择作用。如果具有，其选择机制是__________________________

5、__________________________________________________具有以纤维素粉为唯一碳源，能分解纤维素的微生物可以大量繁殖；若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是将__________改为_________。3、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用？葡萄糖纤维素粉提示：自变量为培养基的种类，即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。3、鉴别纤维素分解菌的培养基——刚果红培养基染色法优点缺点先培养微生物，再加入刚果红倒平板时就加入刚果

6、红颜色反应基本是纤维素分解菌的作用操作繁琐，刚果红可能会使菌落之间发生混乱操作简便，不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分两种方法的比较：有可能刚果红染液把一个菌落的菌冲到另一个菌落里,这样的话菌落就可能不是单菌种了,挑菌摇菌的时候有可能得到混合菌三、操作提示1、复习微生物技术a培养基的配制b无菌操作技术c稀释涂布平板法d选择培养基的作用e土壤取样2、选择培养的操作方法土样选择培养基培养吸取部分培养液新鲜的选择培养基培养稀释涂布想一想为什么选择培养能够

7、“浓缩”所需的微生物？答：在选择培养条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。四、结果分析与评价1、培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落？对照的培养基在培养过程中没有菌落长出说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。2、分离的结果是否一致？由于在土壤中细菌的数量远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易分离得到的是细菌。由于所取土样的环境不同，可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。讨论本实验

8、的流程与课题2中的实验流程有哪些异同？答：课题2是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为唯一氮源的选择性培养基上，直接分离得到菌落。本实验通过选择培养，使纤维素分解菌得到繁殖后，再将菌液涂布在选择培养基上。其他步骤基本一致。五、课题延伸纤维素酶发酵方法:液体发酵固